共查询到19条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
苏云金芽孢杆菌cry1I基因沉默的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
分析了苏云金芽孢杆菌(Bt)cry1和cry1I基因的保守区,在cry1类基因的下游和cry1I基因的上游设计了一对通用引物,用于检测cry1I与cry1类基因的连锁现象.从鉴定的142株Bt分离株中,PCR扩增发现71株出现约1.4kb的阳性带,说明这一现象广泛存在于Bt菌株中.在此基础上用pGEM-T Easy载体克隆了菌株Bt07和J8中的连锁序列,序列分析表明,Bt07中是cry1I基因与cry1Db基因连锁,间隔区为504bp;J8中是cry1Ia基因与cry1Ac基因连锁,间隔区为506bp.进一步比较间隔区序列,同源性达93.7%,同时含有多个原核生物终止序列,且未发现启动子序列,揭示了这两个菌株中cry1I基因沉默的成因. 相似文献
2.
以非维管植物地衣为分离材料,采用热处理加抗生素及醋酸钠的方法,经常规形态学鉴定,分离到6株苏云金芽孢杆菌.为了解其生物学特性,分别对这6株菌株进行生理生化测定和cry基因的PCR-RFLP检测,结果显示: 6个菌株均含有cry1、cry1I 、cry2基因,所有菌株均不含cry3、cry4、cry5、cry6、cry8、cry10、cry11基因.初步确定6株菌株中含有5种 cry1亚类基因(cry1Ad,cry1Ba,cry1Cb,cry1Da,cry1Ea),1种cry2亚类基因cry2Ac,2种cry1I基因亚类(cry1Ia1、cry1Ib1),其中有2个菌株的PCR-RFLP图谱均出现特异性片段,推测可能存在新基因. 相似文献
3.
分别克隆了叶片、苔藓和土壤中分离的Bacillus thuringiensis的aiiA基因,并对其编码的蛋白AiiA-P28、AiiA-B19和AiiA-S2进行了理化特征分析、进化树分析和空间结构的研究.结果表明AiiA-P28、 AiiA-B19和AiiA-S2分子质量均为28 ku ;等电点分别为4.77、4.77、4.93;三者均为亲水性蛋白,具有很高的同源性.进化树分析结果表明叶片中分离的AiiA-P28与苔藓中分离的AiiA-B19进化距离较近, 而土壤中分离的AiiA-S2则与它们的进化距离较远.三维结构分析表明,AiiA蛋白具有典型的αβ/βα折叠的空间结构. 相似文献
4.
根据NCBI上已公布的枯草芽孢杆菌BS168菌株的β-1,4-glucanase(eglS)基因以及苏云金芽孢杆菌的aiiA基因序列,设计引物并扩增得到eglS基因的启动子、信号肽序列和aiiA基因.构建重组表达载体Ps4-eaiiA,转化枯草芽孢杆菌BS168,得到枯草芽孢杆菌工程菌BS168/Ps4-eaiiA.该工程菌诱导发酵后经SDS-PAGE和Western blotting分析表明:aiiA基因实现了在枯草芽孢杆菌中的表达.对胡萝卜软腐欧文氏菌进行马铃薯的抗病性实验,结果表明aiiA基因在枯草芽孢杆菌中表达的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏杆菌表现出一定的抗病性. 相似文献
5.
6.
7.
8.
9.
利用设计的杀线虫基因cry6A的检测引物对本实验室保存的874株苏云金杆菌进行了PCR筛选,其中仅有四株含有cry6A基因.克隆了苏云金杆菌96860-8的cry6A基因,并在大肠杆菌JM103中表达.通过对秀丽线虫的生测,证实了Cry6A对线虫的毒性作用.氨基酸序列分析发现Cry6A具有一些独特的结构. 相似文献
10.
11.
从苏云金杆菌厂发酵裂解液中分离得到一株苏云金杆菌噬菌体KP-1.电镜观察表明,该噬菌体结构较为复杂,头部呈多面体,衣壳里六角形,在见并具有收缩性尾鞘,尾部末端呈扁平膨大基片.其寄生范围与其它“BT”噬菌体不同,具有非常广泛的寄主,专一性不明显,同时对噬菌体KP-1感染敏感菌株187的特性作了具体分析. 相似文献
12.
13.
用PCR方法,将苏芸金芽孢杆菌肯尼亚亚种Ag菌体(Bacillus thuringiensis kenyae Ag,简称Btken-Ag)编码cry1Ac杀虫毒素蛋白的N末端(1.84kb)的基因片段扩增后,淫EcoRⅠ消化成三个不同大小的片段,将原扩增片段及酶切片段分别连接到pCR-Script克隆载体后转化进大肠杆菌,将每一克隆片段进行序列测定,在此基础上又设计出特异引物,再次以cry1Ac的 相似文献
14.
苏云金杆菌菌体保护剂和增效剂的筛选 总被引:2,自引:0,他引:2
生物测定结果表明,Bt菌液添加苋菜红染料抗紫外线能力最强,蚕蛹粉、苏丹黑染料次之。苋菜红染料的保护作用极显著地强于蚕蛹粉以及苏丹黑。w=0.025%敌百虫对Bt菌液有明显的增效作用,两者混合后的杀虫率比单剂提高30%。乙酰甲胺磷对Bt无增效作用。 相似文献
15.
曾令波 《华中师范大学学报(自然科学版)》1996,30(4):476-479
苏芸杆菌187菌株自1978年发现以来,经近20年的研究,现已在如下方面取得了重要成果:1.苏芸金杆菌187菌株的生物学特性;2.其毒力与对纹幼虫的致病机理;3.其伴孢晶体和芽孢的超微结构,生理生化与抗原特性,4.其发酵条件与特性,5.大田灭蚊应用研究。 相似文献
16.
17.
苏云金杆菌在温室蔬菜害虫防治中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
介绍了苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Berliner)的杀虫机理、分离纯化方法及其在温室蔬菜害虫生物防治中的应用.近年来,温室蔬菜生产中害虫的发生和危害日益严重,化学农药的大量使用,使害虫天敌被大量杀伤,害虫抗药性增强,环境污染加剧,尤其是蔬菜上残留的化学农药直接威胁着人类的健康.苏云金杆菌作为一种高效微生物杀虫剂,在温室蔬菜害虫的生物防治中占有重要的地位. 相似文献
18.
质粒消除选育苏云金杆菌杀虫菌株 总被引:1,自引:0,他引:1
利用 4 2℃高温及其与 SDS复合消除质粒法处理本室分离保存的 80 10、WB2、WB3、WB6 4菌株 ,利用小菜蛾对突变株进行生测筛选 ,获得一高毒力菌株 TS16 ,其小于 2 Kb的质粒带丢失 ,6 .6 Kb的质粒带明显变淡 ,毒力比原菌株提高 50 %左右。室内摇瓶培养基的筛选表明 ,其发酵产孢量主要受 C、N源影响 ,无机盐影响较小 相似文献
19.
分子筛在苏云金芽孢杆菌发酵液浓缩中的应用研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文观察了不同孔径分子筛对 B.t.发酵液的浓缩效果 ,结果表明 6 0 0 - 5 0万 Da这 9种规格孔径的分子筛膜的滤出液都检测不到晶体和细胞的存在 ,晶体和芽胞的回收率为 10 0 %。但超滤液通量随着膜孔径增大而增大。发酵液固形物含量越低 ,分离时间越短 ,浓缩比越高 ,当固形物含量在 1.5 %时 ,分离时间为2 0 min,浓缩比为 8.6 6 7;而固形物含量为 15 %时 ,分离时间延长到 6 9min,浓缩比降为 1.348。浓缩效果还受待浓缩液通过分子筛速度的影响。 相似文献