抗氧化剂对小鼠腔前卵泡及其卵母细胞体外发育的影响研究

通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索添加物抗氧化剂维生素C对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度地有所增长,其中50μg/m L浓度组在卵泡培养相同时间下,卵泡和卵母细胞的增长值相对于其他浓度组略大些,但各浓度组之间无论是卵泡直径增长值还是卵母细胞直径增长值都不存在显著性差异(P0.05).培养到第6天时,50和100μg/m L浓度组卵泡存活率最高,为59.5%,且50μg/m L浓度组第一极体排出率最高,为2.38%,但发生生发泡破裂率次于150μg/m L浓度组.可得结论:在改良的TCM199无血清培养系统中,添加50μg/m L维生素C有利于腔前卵泡卵母细胞的生长,而添加150μg/m L维生素C有利于生发泡破裂.     

促性腺激素对小鼠腔前卵泡及其卵母细胞体外发育的影响研究

通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索促性腺激素(FSH、LH)对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,在卵泡培养的同期相比,卵泡增长值最大组为FSH400+LH200组,而卵母细胞增长值最大组却是FSH400组.从添加物上看,各个实验组与对照组之间,卵泡直径和卵母细胞直径增长值都存在显著性差异(P0.05).随着培养时间的延长,FSH400+LH200组卵泡存活率、成腔率表现为最高,分别为68.6%,47%.从卵泡发生生发泡破裂率和第一极体排出率来看,FSH400+LH200组发生生发泡破裂率高于其他组,为17.6%,但第一极体排出率却低于FSH400组.因此,改良的TCM199无血清基础培养液中联合添加400mIU/mL FSH和200mIU/ML LH效果优于单独添加组的效果.     

小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究

小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长，体外成熟，体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但是体外受精后的体外发育率低于加ＦＳＨ的试验组，表明ＦＳＨ有益于卵母细胞生长过程中细胞质的成熟，单层培养的卵巢颗粒细胞对腔前卵泡的体外生长也具有促进作用，将体外受精后发育至２－细胞的胚胎     

分离方法和卵巢发育状况对猪腔前卵泡分离及体外培养的影响

以直径在200～300μm的腔前卵泡为研究对象，研究了不同分离方法及卵巢不同发育状况对猪腔前卵泡分离及体外培养的影响。结果表明，显微分离法每个卵巢可采集的卵泡数极显著高于剪碎过滤法（24．75±2．99vs2．60±0．35，P〈0．01），显微分离法分离每个腔前卵泡所用的时间极显著低于剪碎过滤法（5．40±0．44vs15．52±1．18，P〈0．01）；有黄体和无黄体的卵巢对卵泡分离的影响差异不显著（26．10±2．02vs24．35±2．32，P〈0．05），但有黄体的卵巢分离的卵泡数稍多于无黄体的卵巢。此外，对两种分离方法分离出的腔前卵泡进行培养研究表明，两种分离方法对卵泡体外生长和存活，以及正常卵母细胞比率均没有显著影响（P〉0．05）。     

小鼠腔前卵泡无血清体外培养的研究

目的:探索添加物维生素C和促性腺激素对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响及适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.方法:通过改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入1个腔前卵泡等条件下体外培养腔前卵泡卵母细胞.结果:随着培养时间的延长,各组卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,其中FSH400+LH200组和VC50+FSH400+LH200影响均大于VC50和对照组,存在显著性差异(P0.05),但二者之间无显著性差异.FSH400+LH200质量浓度组卵泡存活率、发生GVBD率和第一极体排出率均最高,分别为68.6%、17.6%、9.8%.但VC50+FSH400+LH 200组卵泡成腔率最高,为48%.结论:在改良的TCM199无血清培养系统中,联合添加促性腺激素和抗氧化剂后,卵泡成腔率大有提高,卵泡存活率、发生GVBD率和第一极体排出率仅次于单独添加促性腺激素组.     

小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究

小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长、体外成熟、体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但是体外受精后的体外发育率低于添加ＦＳＨ的试验组，表明ＦＳＨ有益于卵母细胞生长过程中细胞质的成熟。单层培养的卵巢颗粒细胞对腔前卵泡的体外生长也具有促进作用。将体外受精后发育至２—细胞的胚胎移植入受体鼠，胚胎可以正常着床发育。同时，卵母细胞的核仁和线粒体在培养过程中也发生相应的变化。     

FSH对人腔前卵泡体外生长的影响

为探讨FSH对人腔前卵泡体外生长的影响 ,为此通过在培养液中加入不同浓度的FSH ,观察卵泡存活天数和卵泡发育增大 ,并测定卵泡E2 的分泌量 .结果发现 :卵泡体外存活天数 :对照组 (无FSH)为 2 .80± 1.6 9d ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 (FSH浓度为 0 .5IU/mL、1.0IU/mL、2 .0IU/mL)分别为 5 .36± 0 .6 3、5 .47± 2 .5 0、8.13± 4.19d ,与对照组相比 ,分别为P <0 .0 5、P <0 .0 1、P <0 .0 0 1.卵泡增大比率 :对照组为 2 0 .0 0 % ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为 35 .70 %、6 0 .0 0 %、81.2 5 % ,与对照组相比分别为P >0 .0 5、P <0 .0 5、P <0 .0 1.E2 分泌量 :对照组为 49.94± 2 0 .91pg/mL ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为 10 8.6 3± 41.0 6、315 .5 3± 93.39、438.2 4± 187.6 1pg/mL .对照组与Ⅰ组相比 ,P <0 .0 0 1;Ⅰ与Ⅱ组相比 ,P <0 .0 0 1;Ⅱ与Ⅲ组相比 ,P <0 .0 5 .可见FSH能使卵泡体外存活天数延长 ,卵泡发育增大 ,卵泡E2 分泌增加 ,并大致呈正相关关系 .     

热应激对 ICR 雌性小鼠超数排卵及卵泡发育的影响

摘要:目的 探讨短期热应激对小鼠超数排卵和卵泡发育的影响。 方法 取超数排卵处理后体质量近似的 7 ~ 8 周龄 ICR 雌性小鼠 20 只,随机分为对照组和热应激组,每组 10 只,饲养于屏障环境内。 热应激组小鼠放入 38 ℃ 的生化培养箱中,热应激处理 10 h,期间自由采食和饮水。 热应激结束后,将小鼠放回屏障设施内饲养,持续 6 d,6 d后,进行超数排卵处理并处死小鼠,获取小鼠输卵管内卵子以及卵巢。 结果 热应激组小鼠超排卵数高于对照组( P<0. 05) 。 对卵巢切片进行苏木素-伊红( HE)染色后,观察发现热应激组小鼠的总卵泡数和黄体数均明显高于对照组( P<0. 01) 。 热应激组小鼠的卵泡闭锁率高于对照组,但无明显差异( P> 0. 05) 。 结论 热应激严重影响小鼠的繁殖机能,尤其是卵泡的发育过程。     

蛤蚧卵巢结构和卵泡发育的研究

利用光镜和电镜对蛤蚧卵巢结构和卵泡发育进行了观察研究，成年蛤蚧卵巢由生殖基，卵巢壁和不同发育阶段的卵泡所组成，卵原细胞位于生殖基内，每一卵巢仅有一个生殖然，卵泡发育整个过程经历卵原细胞期，初级卵泡期，生长卵泡期的成熟卵泡期４个时期。在生长儿泡期，同形滤泡细胞转变成为形态和各功能各异的３种细胞－小细胞，喑细胞和梨形细胞；随后再由异形细胞变为同形细胞，这种现象是鳞类爬行动物独有的特征。     

绵羊小腔卵泡卵母细胞的分离及相关实验

用绵羊小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞进行了一系列实验,获得小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞生发泡的有效分离方法.结果显示,常规的卵母细胞脱水收缩方法、离心方法、其它卵母细胞的电融合方法均不适用于小腔卵泡卵母细胞.     

Pb0.5Sn0.5电沉积不同生长阶段的形貌变化和微观成分分析

制备了准二维的Pb0.5Sn0.5合金电沉积物,并利用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、和电子探针(EPMA)微区成分分析研究了沉积物的形貌变化和微观成分.通过研究发现,整个沉积过程经历了3个阶段.每一阶段的形貌特征和微观成分有明显的区别.分析表明生成不同形貌和微观成分的3个阶段各有其不同的主要的生长控制因素,分别是电化学反应、电场屏蔽效应和生长前端的离子浓度周期性变化.     

中国壁虎属的地理分布、形态学和分子系统学研究进展

壁虎属(Gekko)世界报道有47种,中国是壁虎属物种多样性最为丰富的国家,已记载16种.中国壁虎属物种多分布在秦岭以南的热带和亚热带地区,北方种类较少,少数物种可分布至温带,其中11种为中国特有种,荔波壁虎、太白壁虎、文县壁虎、海南壁虎、兰屿壁虎则为分布范围狭窄的地区特有种.目前基于部分线粒体基因和核基因分子标记对中国壁虎属的分子系统学研究已解决许多分类问题,但仍存在较大分歧,种下关系及分类问题尚有待解决.因此,广泛收集中国壁虎属样本,尤其是广布种各地理种群样本,运用多基因联合分析,可有效解决中国壁虎属目前存在的分类和系统关系问题.     

小鼠视网膜胆碱能无长突细胞出生后的密度分析

为了研究小鼠出生后视网膜胆碱能无长突细胞密度和空间分布的发育变化,使用免疫组织化学的方法对不同天龄小鼠视网膜的胆碱能无长突细胞进行免疫荧光标记,并对用激光共聚焦显微镜采集的数据进行统计学分析.结果表明,小鼠视网膜胆碱能无长突细胞的密度随天龄增长而降低,这个结果与通过眼球直径预测的变化一致.     

广藿香叶的发育及不同发育期挥发油的分布

利用常规石蜡切片、半薄切片和组织化学等方法，对广藿香叶的发育及发育过程中挥发油分布部位的变化作了系统研究．结果表明：广藿香叶的发育可划分为原分生组织、初生分生组织和初生结构形成3个阶段，在叶的原分生组织中，未见有挥发油滴；在初生分生组织和叶初生结构形成早期，叶表皮上着生大量腺毛(其中盾状腺毛比较多)，此时腺毛是挥发油的主要分布部位；叶的初生结构形成后，叶肉组织、尤其是栅栏组织成了挥发油的主要分布部位．     

中华豆芫菁的触角感器与类型分布

中华豆芫菁Epicauta chinensis Laporte 是我国的特有种,其触角雌雄差异很大,表现在感器类型和数量分布既有共性又有明显差异,揭示其规律对于了解该昆虫的生物学功能具有重要意义.本文首次报道中华豆芫菁触角感器由6类11种组成,其中毛形4种、锥形2种、耳形2种、腔锥形1种、Bhm氏鬃毛形1种、芽孢形1种,此外还有大量表皮孔存在.这些感器在触角各节的类型分布不同,数量也有差异,常常表现为雄性多于雌性;根据触角感器组成类型及其分布区域,初步推断了它们的作用和功能.     

基于概率分布和形态学的快速聚类算法

提出了一种新的聚类算法PMM，使用概率分析和密度直方图法确定密度阈值，应用多密度阈值对数据空间进行滤波以消除不相关数据的干扰，使用数学形态学理论发现聚类簇，提高了聚类的准确性，按照聚类的特点实现了相关形态学操作的快速算法，提高了运算效率．实验表明PMM的计算复杂度与数据量呈线性关系，能够发现任意形状的聚类簇，对噪声不敏感，并能区分密度不同的聚类簇．