增塑剂DEHP暴露对青春期小鼠社会行为的影响

为探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(di-ethylhexyl phthalate,DEHP)对青春期小鼠社会行为的影响.以旷场行为、高架十字迷宫、强迫游泳等行为模型实验检测小鼠焦虑抑郁行为,western blot实验检测雄激素受体(androgen receptor,AR)、多巴胺转运体(Dopamine transporter,DAT)、多巴胺受体(dopamine receptor 2,D2)的表达水平,激光共聚焦显微镜观测离体培养海马神经元的树突形态.研究结果表明:青春期DEHP暴露降低小鼠脑和血清雄激素水平,减少社会探究和社会交互能力,加剧焦虑抑郁状态;纹状体脑区多巴胺受体D2和雄激素受体AR水平下调;抑制神经元树突发育.总之,青春期DEHP暴露会抑制小鼠的社会行为,加剧其焦虑抑郁情绪,脑内雄激素和多巴胺递质系统活动及神经元树突形态的改变可能与此有关.     

去氢表雄酮对抗NMDA神经毒性与抑制细胞内Ca2+升高有关

去氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone，DHEA)是一种神经甾体物质，虽然已经发现对中枢神经系统有保护作用，但其分子机制尚未阐明．从胚胎小鼠(E15～16)大脑皮层分离神经元，离体培养10d，用MTT法检测DHEA对抗NMDA神经毒性的作用．用荧光染料Fluo-3处理后，激光共聚焦显微镜分析胞内Ca^2 浓度的变化，研究了DHEA神经保护作用与胞内Ca^2 浓度的相关性．结果发现：(1)NMDA的剂量、时间依赖方式降低神经元的活性，(2)DHEA预处理可以明显改善NMDA诱导的形态学变化，且剂量依赖性预防NMDA的毒性，(3)1mmol／L NMDA诱导细胞内游离Ca^2 荧光浓度的迅速升高，而DHEA可以阻断这种变化．以上数据表明，DHEA可以保护神经元，对抗NMDA的神经毒性作用，其机制可能与抑制胞内Ca^2 升高有关．     

邻苯二甲酸酯对斑马鱼胚胎发育的联合毒性

通过48 h单一毒性试验和正交试验,研究了邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)4种邻苯二甲酸酯类化合物暴露对斑马鱼胚胎发育的毒性效应。结果表明:这些化合物对斑马鱼胚胎发育有明显的抑制作用,可以造成胚胎发育畸形甚至死亡,具有特定最敏感的毒理学终点;4种邻苯二甲酸酯(PAEs)单独作用时毒性大小顺序依次为DBPDEHPDEPDMP;在4种PAEs对斑马鱼胚胎发育的混合暴露正交试验中,DBP和DEHP存在交互作用,对其致死毒性和发育毒性影响最大;DBP虽然对斑马鱼胚胎的致死毒性和发育毒性影响不明显,但DBP可导致胚胎发育的严重畸形。     

鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞对过氧化氢损伤易感性增高与硫氧还蛋白下调有关

帕金森病(PD)的发病机制与线粒体呼吸链复合物I(complex I)活性降低以及氧化应激损伤密切相关.使用complex I特异性抑制物鱼藤酮,损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞后,给予H2O2造成氧化应激损伤,以研究细胞抗氧化损伤能力变化的可能机制.结果表明,鱼藤酮处理后,细胞对H2O2所致氧化损伤的易感性增高,且细胞形态及细胞存活率的改变与鱼藤酮浓度呈量效关系.与此同时,细胞内抗氧化蛋白之一,硫氧还蛋白(thioredoxin)水平在细胞损伤时明显下降.以上结果表明,线粒体complex I抑制对细胞氧化应激易感性的影响可能与胞内硫氧还蛋白水平降低有关,提示硫氧还蛋白在诊断神经元损伤和神经保护中有一定的运用前景.     

电针对大脑中动脉阻塞大鼠一氧化氮合酶mRNA表达的影响

本课题旨在探讨电针对动物急性脑缺血时神经保护作用的可能机制，由于ＮＯ的作用在脑缺血不同阶段及细胞来源而有所不同，因此，观察了电针对脑缺血后各型ＮＯＳｍＲＮＡ表达的影响，结果表明，针刺可能通过抑制脑缺血后ｎＮＯＳｍＲＮＡ，ｉＮＯＳｍＲＡＮ的过量表达而起到对神经元的保护作用     

脑源性神经营养因子前体对海马神经元发育的影响

目的:通过体外培养海马神经元,给予抗proBDNF血清,观察其对体外海马神经元发育及存活的影响。方法:取新生0~1h的SD大鼠海马组织,体外培养神经元,给予抗pr0BDNF羊血清处理进行形态学观察,通过细胞免疫组织化学方法观察。结果:体外培养的海马神经元生长有明显的阶段性。给予抗pr0BDNF处理后,其表达量与神经元生长状态、存活细胞数成正比。培养Id组的表达水平高于3d、7d组,差值具有统计学意义。结论:给予外源性抗pr0BDNF羊血清处理后,体外培养的海马神经元生长状态良好且突起数目增多,提示内源性的proBDNF抑制神经元的发育,促进凋亡,给予外源性抗体后,减弱其生物学作用,神经元发育抑制因素减弱,存活细胞数、突起数增多。     

Epo/Epo-receptor系统在神经系统作用的研究

促红细胞生成素(Epo)不仅影响红系细胞,而且是一种多功能的营养因子.在神经发育过程中Epo及其受体的表达显著改变.脑缺血时,Epo的生成量成倍增加,发挥抗炎、增强NO扩血管的作用,并促进血管新生,在缺血部位建立侧枝循环,有助于改善局部缺血状况,对神经元起保护作用.此外Epo还能促进神经元增生.     

基于场耦合的神经网络放电特性影响因素

神经网络放电特性是决定脑电位变化规律的重要因素.除化学突触作用,磁耦合对其他神经元放电特性的影响成为了近年的研究热点.然而,目前的研究只考虑放电神经元膜电流在空间产生的磁耦合,没有考虑其电学自突触电流产生的磁场作用.基于场耦合理论,充分考虑放电神经元的电学自突触电流对空间磁场的作用,根据神经元Hindmarsh-Rose(H-R)等效模型,构建仅含磁耦合作用的链式神经网络模型.通过模型研究刺激频率、距离权重、场耦合强度和电学自突触增益等因素变化对神经网络放电特性的影响规律.结果表明:①随着刺激频率从零开始增加,神经网络的放电状态呈现从"抑制"到"放电"再到"抑制"的"窗口"变化特性;②神经元网络的同步程度均随磁耦合强度和距离权重的增加而增强;③无论正、负反馈,放电神经元的电学自突触作用均能改变神经元网络的放电特性,其中正反馈的影响更显著;④电学自突触增益大于零时,同步程度随增益增大而提高.研究结果进一步表明磁耦合是实现神经元之间信号传递的一个重要方式,其中电学自突触电流的磁耦合作用不可忽视.说明神经突触的化学作用如果失效,由放电神经元膜电流和其电自学突触电流共同产生的磁场也可能引起其他神经元膜电位超过阈值而放电.     

SHANK2基因表达下调对诱导多能干细胞来源神经发育模型早期发育的影响

目的:探索SHANK2基因表达下调对诱导性多能干细胞神经发育模型的早期影响.方法:体外建立人诱导多能干细胞来源的神经发育模型,构建携带靶向敲减SHANK2基因表达信息shRNA的慢病毒,在发育起点感染细胞模型.在发育第3、6、9、12、15天分别固定细胞,荧光显微镜拍照,动态监测继发于SHANK2表达下调的胞体面积、突起长度与分支、生长锥面积等神经元形态发育变化.结果:体外成功建立人诱导多能干细胞来源的神经发育模型.与sh Control组相比,在发育不同时间点shSHANK2组神经元分支个数减少、突起长度减小,shSHANK2组神经元胞体面积、生长锥面积均有所减小.结论:SHANK2基因敲减导致早期神经元形态发育异常,可能是SHANK2导致自闭症谱系障碍的潜在致病机制之一.     

浅析褪黑素对锰致鼠肝脑毒性拮抗作用的效应指标

锰是人体内必需的微量元素之一,但过量摄入,则会对脑、肝、肺等产生有害影响。锰可穿透血脑屏障,蓄积在组织内,早期主要表现为神经行为功能的改变,慢性锰中毒以锥体外系神经障碍为主,并伴有精神症状。同时,对肝脏、心血管系统、生殖系统等也有一定的损害。谷氨酸（glutamatic acid,Glu）是中枢神经系统内含量最多的非特异性兴奋性氨基酸,可激活N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA）受体,最终导致不可逆性的退变而死亡。褪黑素主要是松果体分泌的一种吲哚胺类激素,近年来研究发现它能直接中和羟基自由机基和过氧化自由基,还能通过激活谷胱甘肽过氧化物酶,抑制一氧化氮合酶的活性,间接起到抗氧化的作用。     

新生期注射谷氨酸单钠对大鼠脑区损伤程度的比？…

比较观察了在新生期腹腔内注射不同剂量谷氨酸单钠后，成年大鼠１６个脑区的神经元损伤程度。发现大多数脑区的神经元显著减少，但有的脑区对谷氨酸单钠的神经毒性具有一定保护作用。     

CNTF抑制外周神经损伤后运动神经元的凋亡

研究成年大鼠坐骨神经切断后睫状神经因子 (CNTF)对运动神经元的神经保护作用以及cas pase - 3mRNA与运动神经元凋亡的关系。方法取成年SD大鼠 32只随机分为CNTF组和生理盐水(NS)组。切断大鼠右侧坐骨神经后硅胶管套接神经近端 ,将CNTF和生理盐水分别注入管中。于术后 2 ,5 ,1 0 ,2 0d取L 4～ 6脊髓作原位杂交和TUNEL标记检测 ,切片作HE染色计算脊髓内神经元的数目。结果与NS组相比 ,CNTF组的神经元数目有明显的改善 ,caspase - 3mRNA的表达明显下降。结论CNTF具有抑制运动神经元的凋亡的作用 ,其作用可能是由caspase - 3介导的     

新生期注射谷氨酸单钠对大鼠脑区损伤程度的比较观察

比较观察了在新生期腹腔内注射不同剂量谷氨酸单钠后,成年大鼠16个脑区的神经元损伤程度．发现大多数脑区的神经元显著减少,但有的脑区对谷氨酸单钠的神经毒性具有一定保护作用．     

尼莫地平和银杏叶提取物对谷氨酸神经毒性的对抗作用：形态学观察

用形态学的方法观察了尼莫地平和银杏叶提取物（含黄酮甙类２４％和内酯３．４％）对谷氨酸神经毒性的影响。结果发现谷氨酸导致新生小鼠下丘脑弓状核变性、坏死，钙通道拮抗剂尼莫地平及血小板激活因子受体拮抗剂银杏叶提取物均可剂量依赖性地抑制谷氨酸引起的神经元损伤。结果提示钙离子超载及血小板激活因子的激活与谷氨酸的神经毒性作用有关     

人源诱导多能干细胞分化神经元的发育动力分析

目的:建立人诱导多能干细胞(iPSC)神经发育模型,探究不同发育时期神经元胞体和突起的动力规律.方法:采用正常人iPSC神经发育模型,将iPSC诱导成神经前体细胞(NPC),再分化为神经元,取贴壁分化到第5天的神经元(早期)和贴壁分化到第15天的神经元(中晚期),对两组神经元胞体和突起进行5 h动态追踪.结果:在神经发...     

基于TMAES对GrC神经元放电活动影响的仿真

经颅磁声电刺激（TMAES）是一种新型无创的脑神经调控技术,具有良好的应用前景.该技术利用静磁场和超声波共同作用所产生的磁声电效应,在神经组织中产生感应电流,进而对神经组织实施刺激.作者基于小脑颗粒细胞模型（GrC模型）,建立了突触连接GrC模型,对TMAES刺激下突触连接GrC模型的动作电位进行仿真,分析了动作电位的传播方向.在TMAES神经元的不同突触连接方式下,对比了兴奋性与抑制性对神经元放电的影响.通过改变抑制点的位置分析了抑制作用在TMAES下对神经元放电模式的影响.仿真结果显示,经颅磁声电刺激对GrC模型神经元放电节律具有重要影响.实现了两个神经元突触连接模型在TMAES下的仿真,对进一步发掘和研究神经元的传导及连接模式具有重要意义.     

侧脑室注射腺苷对家兔尾核痛神经元自发放电活动的影响

采用侧脑室给药法及常规神经元放电引导法,研究了腺苷(Ado)对家兔尾核痛神经元自发放电的影响及其可能机制.结果表明Ado能不同程度的抑制尾核痛神经元自发放电活动,且呈明显的剂量依赖性.其作用机理可能与Ado和其A1受体结合后,间接激活ATP敏感性K 通道,引起尾核痛神经元细胞膜超极化有关.     

出生前后DEHP暴露对小鼠神经行为的影响

研究了增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(di-(2-ethyl hexyl)phthalate,DEHP)围生期母体暴露对青春期(6周龄)和成年后部(12周龄)子代小鼠行为的影响.母鼠从妊娠第7天至断乳前(产后21 d)灌胃染毒DEHP(10,50和200 mg/(kg·d)),同时设空白对照组及溶媒对照组.出生后第6和第12周时分别检测仔鼠的活动性、焦虑、空间记忆等行为.结果显示:DEHP暴露显著抑制了青春期雌、雄仔鼠的活动性,增加了其焦虑状态,且加剧的焦虑状态可延续到成年后的雌鼠;损伤青春期雄鼠的空间学习记忆能力,但对青春期雌鼠和成年后雌、雄仔鼠的空间记忆能力没有影响.以上结果提示,发育期DEHP暴露性别特异性地影响仔鼠的多种神经行为,青春期的情感和记忆能力更容易受影响.     

兔SAH后脑组织超微结构病理变化的实验研究

目的 探讨蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑组织超微结构的特征与动态变化,以及这种改变在延迟性神经功能障碍(delayed neurolgical deficit,DND)中所起到的作用及病理机制.方法 对日本长耳白兔采用枕大池二次注血法制做SAH模型.动物随机分为SAH组20只、盐水对照组15只、穿刺对照组和正常组各5只,于造模后1 h,3 d,5 d,7 d,10 d灌注固定,留取延髓组织标本,在光镜和电镜下动态观察延髓组织的病理和超微结构改变.结果 SAH实验组标本肉眼可见广泛的SAH.光镜下从1 h开始就可见神经纤维结构的少量断裂;从第3 d开始可见明显的神经元结构改变,可有变形的神经元细胞、神经胶质细胞大量增生,并在某些部位聚集,神经纤维断裂,大量空泡形成.电镜下超微结构中可见SAH实验组的神经元肿胀,核变形,染色质不均匀、边集、浓缩、核膜皱缩及核溶解,细胞器的变化表现为线粒体肿胀,嵴紊乱或消失,胞质内空泡形成,内质网扩张,高尔基体扩张.神经胶质细胞肿胀,髓鞘可见松解或溶解,神经微丝减少或消失;偶可见胶质细胞吞噬的凋亡小体.电镜下病理结构的动态变化与光镜的动态变化在时相上是一致的.结论 SAH后脑组织超微结构会发生损害,并在病程发展中呈明显的动态改变;SAH后神经细胞结构的改变,或细胞凋亡所导致的迟发性神经元死亡可能在DND的发生机制中起重要的作用.     

褪黑素对致痫大鼠海马Bcl-2、Caspase-3表达的影响

探讨褪黑素干预急性癫痫脑损伤对大鼠海马CA3区神经元Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白的表达影响及其保护大脑损伤的作用机制.将SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和治疗组,建立急性癫痫模型.治疗组用褪黑素干预,采用免疫组化法测定褪黑素干预大鼠癫痫脑损伤后7 d对海马CA3区神经元Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白表达的变化.在模型组损伤7 d后,治疗组大鼠海马神经元CA3区内Bcl-2蛋白阳性神经元数较模型组明显增多,IOD值相比模型组亦升高,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组CA3区神经元内Caspase-3蛋白表达阳性神经元数较模型组明显减少,IOD值相比模型组降低,差异有统计学意义(P＜0.05);模型组Bcl-2、Caspase-3阳性细胞数的表达呈显著性负相关(r=-0.876,P＜0.01).MLT能上调 Bcl-2蛋白和下调Caspase-3蛋白表达,褪黑素可能通过抑制癫痫脑损伤后细胞凋亡机制,对其发挥保护作用.