猴副流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为对易感动物以及相关生物材料和生物制品进行猴副流感病毒(SV5)的快速病原检测,根据SV5病毒SH基因序列,设计了1对引物,建立了检测SV5的RT-PCR方法,通过优化确定了RT-PCR体系的最佳工作条件。核酸序列分析显示,所扩增片段与GenBank数据库中报道的SV5病毒株WR-21005序列同源性达到97%,证明该方法特异。敏感性分析显示,该方法可检测的最小RNA浓度为2.1 ng/μL,能检出的最小病毒滴度为3.98CCID50/0.1 mL。初步将该方法运用于猴、地鼠、常用传代细胞和猴源生物制品的检测,在所检测的样品中均未检出猴副流感病毒核酸序列。结果表明,所建立的RT-PCR方法可用于猴副流感病毒(SV5)的诊断和分子流行病学调查。     

猴空泡病毒(SV40)PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立检测实验猴及生物制品中猴空泡病毒(SV40)的PCR方法。方法根据SV40-776株设计合成三对引物对现有毒株进行PCR扩增并克隆测序。用这三对引物对56份猴肾、肺、脾及10批脊髓灰质炎疫苗进行检测。结果三对引物均扩增出目的片段;56份猴脏器和10批疫苗SV40检测均为阴性。结论56只恒河猴和10批疫苗中未检测到SV40,所设计的三对引物检测结果准确,均可用于检测。     

猴B病毒研究进展

人类和其它灵长类动物种系发生关系密切 ,二者在生理和生化方面非常相似 ,这对生物医学研究非常有益。因此继续研究控制和根除非人灵长类动物中潜在危险性致病因子是生物医学界的共同使命。这些努力不仅有利于保证使用这些珍贵动物或其组织进行研究的人员的健康和安全 ,而且还保证了持续获得这些独特资源用于未来生物医学的研究。本文将对猴群中广泛存在 ,对人类健康威胁很大的Ｂ病毒研究进展情况做一概述。猴是Ｂ病毒的自然宿主 ,感染率可达1 0 % -60 % ,多数情况下呈良性经过 ,仅在口腔粘膜或 /和生殖器粘膜出现疱疹和溃疡 ,之后病毒可长…     

猴泡沫病毒研究进展

猴泡沫病毒(Simina Foamy Viruses,SFV)的主要传染源为大猩猩、非洲大狒狒、长尾猴,主要存在于非洲,美洲和亚洲[1],在经常接触非人灵长类(non-human primates,NHPs)人群中的传播时有发生.SFV通过体液进行传播,可以遗传给后代.     

流感病毒快速诊断的研究进展

临床对流感病毒的有效控制与治疗在于实验室的快速与准确的诊断，快速诊断可使9％一38％的流感被有效地控制、目前对流感病毒的诊断方法很多，特别是应用分子生物学手段进行流感病毒的快速诊断．同时从分子生物学角度了解流感病毒抗原变异的机制及流感病毒生态学特点．     

普通棉耳狨猴中乙型流感病毒的分离和鉴定

乙型流感病毒是引起人类局部流行性感冒的重要病原体，其起源和自然储存宿主目前仍不清楚。1999年夏季在某动物中心饲养的普通棉耳绒猴（Callithrix jacchus）群体中爆发了以呼吸道症状为主的急性传染病，死亡比率高达1／3。通过对死亡狨猴肺组织匀浆接种鸡胚和MDCK细胞的分离培养，分离出病毒。双份血清的红细胞凝集抑制试验证实，此分离株为此次狨猴群体感染流行的病原体。通过甲型和乙型流感病毒标准血清鉴定，证实该分离株为乙型流感病毒，命名为B/marmoset/China/1/99。     

猴艾滋病动物模型研究进展

简述艾滋病动物模型的研究概况,并着重论述了猴艾滋病动物模型研究进展。从病源学角度分析了猴艾滋病病毒的分离、生活史以及其生物学特性,另一方面,也论述了猴艾滋病的发生,临床表现及其对免疫系统的影响。而且还讨论了猴艾滋病与人类艾滋病的关系及建立猴艾滋病动物模型的意义。     

猕猴肉瘤病毒SV40 T-ag-C 基因克隆及序列分析

摘要: 目的对来源于一株自然感染猕猴肉瘤病毒SV40 的猴肾细胞培养物进行大T 抗原C-羧基端( T-ag-C) 基因 克隆及核苷酸序列分析。方法采用PCR 法分别从一株自然感染SV40 病毒的猴肾细胞培养物和SV40776 标准 株接种的vero 细胞培养物提取的总DNA 中扩增出441bp 的SV40 大T 抗原C-羧基端( T-ag-C) 基因片段,分别将其 克隆到PMD18-T 载体中,转化至JM109 感受态大肠杆菌细胞后,挑取阳性克隆进行测序鉴定,并对获得的目的基 因核苷酸序列进行序列分析及同源性分析。结果来源于猴肾细胞培养物的SV40 大T 抗原片段与本实验室来源 于云南野生猴群的猕猴外周血所得到的SV40 大T 抗原片段同源性为97. 31% ,与GenBank 中登录号为NC _ 001669. 1 序列进行比对,同源性为96. 33% ; 与SV40-776 标准株接种的vero 细胞培养物所扩增的大T 抗原片段同 源性为97. 55% 。结论对大T 抗原基因克隆和序列分析是了解和掌握SV40 病毒分子流行病学及其变异趋势的 重要手段。     

清开灵雾化与静滴给药对副流感病毒感染的疗效观察

目的:观察清开灵不同给药方式对呼吸道副流感病毒的疗效。方法:将100例20～67岁呼吸道副流感病毒感染患者分两组。治疗组40例,采用清开灵超声雾化吸入治疗;对照组60例,采用清开灵静脉点滴。结果:经统计学分析显示:治疗组平均疗效明显高于对照组。结论:清开灵用于治疗由副流感病毒引起的呼吸道感染,雾化吸入给药方式优于静脉给药。     

人副流感病毒入侵宿主细胞的分子机制

综述了3型副流感病毒结合和进入宿主细胞的过程,重点讨论了受体结合分子血球凝集素-神经氨酶蛋白如何引发病毒与宿主细胞膜的融合过程,从分子水平上认识病毒入侵细胞的各个步骤,为进一步阻断病毒感染提供靶标。     

禽流感病毒H_5N_1动物致病模型的研究

1997年5月香港暴发H5N1高致病性禽流感,并首次出现高致病性禽流感感染人类并造成死亡,其中18人感染6人死亡。2003年2月底荷兰发生H7N7禽流感,感染人达80名,感染者出现结膜炎等症状,并有1例死亡。2003年12月10日韩国暴发了H5N1高致病性禽流感。随后在2003年12月至2004年2月期间,日本、印尼、老挝、巴基斯坦、     

HCV非结构基因NS5分子生物学研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因5(NSS)区是RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)及一种磷蛋白的编码区,与HCV的复制、致病及抗药性关系密切。就HCV NS5区有关的分子生物学研究进展进行了综述。     

猿猴空泡病毒40病毒样颗粒的制备及纯化

本研究将猿猴空泡病毒40(Simian virus 40,SV40)的主要衣壳蛋白VP1通过Bac-toBac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中大量表达,并自我装配成形态结构及免疫原性均与天然病毒粒子相同或相似的SV40病毒样颗粒(SV40virus-like particles,SV40VLPs),经表达条件优化及分子筛纯化,成功制备出高纯度的VLPs.聚丙烯酰胺凝胶电泳结果可见大小约为46kDa的VP1特异性条带.间接免疫荧光试验(IFA)证实VP1蛋白能够与异硫氰酸荧光素标记的羊抗鼠抗体发生反应,出现明显的特异性绿色荧光,具有良好的抗原性.纯化产物在透射电镜下可见直径约45nm的病毒样颗粒,显示出成功组装了SV40VLPs,免疫印迹试验证明VLPs能够与人抗SV40阳性血清发生反应,具有良好的抗原性.     

丙型肝炎病毒DNA免疫研究进展

DNA免疫是近年发展起来的一种新型免疫技术。由于其具有显的优越性,特别适用于具有高度变异性的丙型肝炎病毒(HCV)疫苗的研制。对丙型肝炎病毒DNA免疫的研究证明,确可诱生较高水平的体液及细胞免疫应答。     

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。     

非洲猪瘟病毒及其分子检测技术研究进展

由于非洲猪瘟病毒(ASFV)的感染机制极为复杂,基因型多,尚未研制出有效的疫苗进行防控,早期的ASFV检测是ASF防控的重点.对ASFV分子检测技术研究进展进行综述,分析常规PCR、荧光定量PCR、数字PCR、LAMP、RRA检测技术的研究进展和优缺点,为更好地开展ASFV快速检测技术研究提供参考.     

小反刍兽疫病毒蛋白及其功能研究进展

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种烈性传染病,呈高发病率和高死亡率,给小反刍动物的养殖及国家的经济贸易带来巨大的经济损失.目前,该病在我国已经发生,应引起重视.介绍了小反刍兽疫病?　 毒的蛋白及其功能等方面的研究进展.     

生物酶法合成1,5-戊二胺的研究进展

随着经济的飞速发展,全球每年对聚酰胺、聚氨酯等多聚物产品的需求量呈现逐年增长的趋势。1,5-戊二胺是合成聚酰胺等多聚物的重要单体,生物法合成1,5-戊二胺是一种具有潜在竞争力的绿色环保、资源可持续利用的方法。本文将从代谢途径中的关键酶,大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌以及甲醇芽孢杆菌中戊二胺代谢途径工程改造的最新研究进展4个方面进行综述,并对其前景进行展望。