青海湖裸鲤的起源和花斑裸鲤的种群演化

通过线粒体Cytb基因全序列分析,探讨了青海湖裸鲤和花斑裸鲤的起源关系及其进化模式.系统发育分析进一步支持了青海湖裸鲤和花斑裸鲤3个mtDNA谱系的划分.形态上具有高鳃耙变异的个体未形成特有的进化枝,证明了第一鳃弓外鳃耙变异并不具有系统发育意义.对青海湖裸鲤和花斑裸鲤进化枝扩散模式的网络分析表明,黄河独有的单倍型A1是一个创立者单倍型,全部青海湖裸鲤的样品来自于它的辐射,而青海湖裸鲤可能仅仅起源于黄河花斑裸鲤两个主要支系中的一个.Fs检验和核苷酸不配对分析暗示了青海湖裸鲤和柴达木盆地花斑裸鲤在历史上经历过种群扩张事件.青海湖裸鲤谱系多样化发生在大约0.2734Ma前,并且在约0.0658Ma前发生了一次局部的种群扩张,而柴达木盆地花斑裸鲤可能在约0.0693Ma经历了一次严重的“瓶颈效应”.我们还发现种群扩张存在于主要由青海湖裸鲤组成的亚枝A1和由黄河花斑裸鲤独有的亚枝A21中,估算的最近共同祖先年龄(TMRCA)分别为(0.2308±0.01)Ma和(0.1319±0.015)Ma,这一估算与青海湖和黄河分离的“共和运动”地质年代大致相符.这些结果说明了晚更新世末青藏高原的强烈隆升对青海湖、黄河和柴达木盆地鱼类多样性演化及其生物地理学格局产生过重大影响.     

青海湖裸鲤神经系统的解剖

本文采取大体解剖和组织切片的方法,观察了青海湖裸鲤神经系统的外部形态和显微结构,现将结果综述于后:青海湖裸鲤的端脑发育较好,中脑背中线呈“八”字分开,部分小脑瓣显露在外,延髓分化成面叶和迷叶.嗅叶属于鲤型“嗅叶”.三叉神经和面神经融合成三叉面神经复合支.侧线神经单独起于小脑耳.迷走神经中有一咽支.     

青海湖裸鲤营养成分分析

对青海湖裸鲤成鱼、鱼苗、鱼卵的粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分、粗纤维、碳水化合物、氨基酸含量等进行了测定，结果：裸鲤成鱼、鱼苗、鱼卵干物质的粗蛋白含量分另为６５％、５７％和３８．７６％；粗脂肪含量分别为２５％、３１％和３．２４％。裸鲤成鱼氨基酸含量最高的为精氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸和赖氨酸。     

青海湖裸鲤和鲤鱼组织乳酸脱氢酶同工酶比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对青海湖裸鲤和鲤鱼的血清及组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了比较研究。结果表明，青海湖裸鲤的血清及组织LDH共表现出LDHF4、LDHA4、LDHA2B2、LDHB4和LDHE4 5种主要同工酶，而鲤鱼共表现出LDHF4、LDHA4、LDHA2B2和LDHB4 4种主要同工酶，并且LDH同工酶在种间和种内不同组织中均表现出分布特异性。     

青海湖裸鲤肌肉和鳃组织结构特征

利用常规组织学石蜡切片技术和HE染色,对青海湖裸鲤肌肉组织和鳃组织的组织学结构进行定性和定量的分析。结果表明:青海湖裸鲤肌纤维大小不等、形状不规则,其间含有一定的结缔组织、血管和神经等结构,肌纤维的直径和密度分别为104.37±3.57μm,41.67±1.25根/单位面积;鳃由鳃弓、鳃耙、鳃丝构成,其中鳃丝由许多的鳃小片组成,鳃丝长6.77±0.33 mm,鳃弓宽度403.42±54.35μm,鳃小片长度141.83±9.72μm,鳃丝宽度54.46±4.86μm,鳃丝间隔397.79±3.19μm。青海湖裸鲤肌肉和鳃的组织结构基本与普通鱼类相同,但在肌纤维直径和鳃内毛细血管等方面上仍表现出对其生活环境的适应性。     

聚维酮碘对青海湖裸鲤（♀）×花斑裸鲤（♂）杂交幼鱼的急性毒性和耗氧率影响

研究了聚维酮碘对青海湖裸鲤（♀）×花斑裸鲤（♂）杂交幼鱼（体长7~8 cm,体质量15.34 g±0.23 g）的急性毒性,并测定了不同浓度聚维酮碘对青海湖裸鲤（♀）×花斑裸鲤（♂）杂交幼鱼耗氧率的影响。结果表明：（1）在（19±1）℃水温条件下,聚维酮碘对青海湖裸鲤（♀）×花斑裸鲤（♂）杂交幼鱼的24、48、72和96 h的半致死浓度（LC₅₀）分别为3.37、3.15、2.75和2.51 μmol/L,安全浓度为0.84 μmol/L;（2）在安全浓度（0.84 μmol/L）和生产上使用浓度（0.22 μmol/L）下,青海湖裸鲤（♀）×花斑裸鲤（♂）杂交幼鱼的耗氧率分别为0.340和0.293 mg/（g·h）,窒息点分别为0.417和0.383 mg/L,均显著高于不用聚维酮碘时的耗氧率（0.243 mg/（g·h））和窒息点（0.363 mg/L）（P<0.05）。     

青海湖裸鲤肌肉营养成分和微量元素的分析

采用常规生化分析方法测定了20尾青海湖裸鲤肌肉营养成分,并首次对鱼肌肉中微量元素进行检测。结果显示：鱼肌肉中蛋白质含量为19.28%,脂肪为1.73%,灰分为1.25%,水分为78.38%。在测定的汞、砷、铜、锌、铅和镉6种微量元素中,汞的含量为0.123 4 mg/kg,砷为0.130 6 mg/kg,铜为0.255 mg/kg,锌为2.255 mg/kg,铅为3.485 mg/kg,镉为0.09 mg/kg。其中锌的含量超过国家食品规定标准将近7倍。     

青海湖裸鲤的种群结构和线粒体DNA变异

对青海湖裸鲤55个个体Cytb基因全序列进行了测定和分析,探讨了种群结构和群体遗传多样性。用MEGA2.1软件分析了碱基组成和序列变异;以黄河花斑裸鲤为外群,构建了单倍型的NJ树;用Arlequin Ver.2 000程序计算了群体内遗传变异值(Fst)。结果显示,青海湖裸鲤群体没有显著的种群结构,提示青海湖裸鲤群体内存在广泛的基因交流;种群的遗传多样性较低(π=0.7828±0.0532),青海湖裸鲤种群很可能在历史上遭受过严重的“瓶颈效应”。     

花斑裸鲤卵黄囊期仔鱼的发育观察

对花斑裸鲤卵黄囊期仔鱼的发育过程进行观察,结果表明:水温14-16℃,p H6.1-7.1,溶氧6.6-7.6 mg/L的条件下花斑裸鲤刚刚孵化的仔鱼全长8.02-8.31 mm,身体淡黄色,沉于水底,依靠卵黄囊提供能量;孵化后第4天,仔鱼背鳍原基开始分化,身体背部、肌节和卵黄囊之间出现大量点状黑色素斑;孵化后第6天仔鱼开始平游,并开口摄食,全长达到11.93-12.46 mm;第11天卵黄囊基本消失,仔鱼依靠外源性营养进行生长发育,全长达到14.41-15.02 mm。     

青海湖裸鲤油脂中脂肪酸初步分析

用乙醚－正乙烷混合溶剂提取青海湖裸鲤油脂;用氢氧化钾－甲醇酯交换法甲酯化,以毛细管气相色谱法测定脂肪酸组成,鉴定了１５种主要脂肪酸,其中以棕榈酸,棕榈油酸,油酸、α－亚麻酸,二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）为主。     

基于高通量测序的花斑裸鲤转录组及功能分析

为了获得花斑裸鲤丰富的转录组信息和功能基因,应用Illumina Hi SeqTM2500高通量测序技术对花斑裸鲤肝胰脏、肌肉、脑、和肾混合组织转录组进行测序,获得162 235条转录本,进一步拼接得到110 231条单基因序列(unigene),平均长度745 bp。利用生物信息学方法对所有unigenes与美国国立生物技术信息中心(NCBI)的非冗余蛋白质数据库(Nr)进行相似搜索(E-value≤10-5),结果共有34 532个unigenes(31.32%)与数据库中的已知基因同源。此外,GO功能注释将unigene分为生物过程、细胞组分和分子功能3大类56分支,依据KOG功能注释可分为26个功能组分,依据KEGG代谢通路分析可以分成5大类267小类。通过转录组测序数据及功能注释,进一步了解了更多花斑裸鲤的生物学特性、基因的分子功能、参与的生物过程、所处的代谢途径和信号通路。同时,获得了79条与天然免疫相关的同源序列。     

青海湖裸鲤、鲤鱼的血红蛋白的电泳研究

本文用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳方法,对鲤科（Ｃｙｐｉｉｎｉｄａｅ）２种鱼类：青海湖裸鲤（Ｇｙｍｎｏｃｙｐｒｉｓ Ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ）、鲤鱼（Ｃｙｐｉｉｎｕｓ Ｃａｒｐｉｗ Ｌｉｎａｅｕｓ）的血红蛋白进行了分析研究讨论了两者血红蛋白的种间差异以及它们各自的遗传特异性,以期积累生化遗传学资料,以便进上步在生化水平上为临别物种的牧民性和它们在进化上的亲缘关系提供佐证。结果显示：两种鱼类各自的血红蛋     

内蒙古鳅科部分鱼类嗅觉器官的比较解剖

本文根据历年来在内蒙古地区采到的鳅科鱼类标本,比较解剖了其嗅觉器官。结果表明,在属或种间具有一定的形态差别,可以做为分属或分种的辅助性状。另外,对其生态适应也作了初步探讨。     

青海湖裸鲤线粒体DNA细胞色素b基因序列分析

对青海湖裸鲤线粒体DNA细胞色素b基因进行了PCR扩增、克隆及其序列测定，其全序列长度为1140bp，其中T、C、A、G含量分别为355(31．1％)、296(26％)、305(26．8％)、184(16．1％)。GC含量为42．1％；分子量为349693u。     

青海湖裸鲤染色体核型及多倍性的初步研究

采用活体PHA-秋水仙素注射法研究了青海湖裸鲤的染色体核型，结果表明，青海湖裸鲤二倍体染色体数目为2n=92，核型式为：18m 18sm 16st 40t，NF=128。初步认为青海湖裸鲤可能是二倍化了的四倍体，源自某种适应青藏高原特殊生态环境的原始多巴类。     

青海湖封湖3年对裸鲤种群结构的影响初探

本文对青海湖裸鲤在封湖三年前后种群结构的变化进行了分析研究,肯定了封湖三年的成效,并指出封湖三年为期过短,尚不足以使裸鲤资源恢复到维持生态平衡的水平。     

Hg2＋对青海湖裸鲤肾脏组织的细胞毒性研究

为了解重金属Hg2＋对青海湖裸鲤肾脏组织的细胞毒性;以含有Hg2＋的浓度为0.0025、0.005、0.01、0.02mg/L的培养液培养裸鲤肾脏组织细胞;结果表明,0.005mg/L的Hg2＋浓度为裸鲤肾脏细胞毒性死亡的临界浓度,且裸鲤肾脏细胞的死亡率随Hg2＋的浓度的增加而增大,当培养基的Hg2＋浓度达到0.02mg/L时细胞全部死亡.     

青海湖裸鲤寄生湟鱼棘头虫的种群季节动态研究

以在青海湖收集的寄生于青海湖裸鲤的湟鱼棘头虫（Ｅｃｈｉｎｏｒｈｙｎｃｈｕｓ ｇｙｍｎｏｃｙｐｒｉｉ）４个季节的样本研究湟鱼棘头虫种群的季节动态,结果表明：种群的平均丰度,感染强度和感染率都没有明显季节变化。这与湟鱼棘头虫温度依赖死亡、中间宿主的季节数量动态,宿主食性的季改变有关。湟鱼棘头虫种群在宿主种群的分布在各季度中都是聚集性的,这与宿主食性的分化及第一中间宿主（钩虾）的分布不均匀性有关。雄虫体     

青海湖裸鲤肌间骨(Os.intermusculare)的初步观察

青海湖裸鲤俗称湟鱼,是青海湖水系的一种特有鱼类,也是青海湖中唯一的、产量极高的经济鱼类,在西北的鱼业中,占有重要的地位。近二十余年来,我国许多科学工作者对其展开了广泛的生物学研究,不仅在分类、生态、区系以及个体发育等方面已有一系列的研究报告发表,而且形态解剖方面的研究工作也有人正在进行。关于青海湖裸鲤肌间骨的研究尚属空白,我们对它进行了比较仔细的解剖观察。兹将工作方法和观察结果报告如下: