白云鄂博稀土矿来源放线菌Actinorectispora metalli的次生代谢产物研究

对白云鄂博稀土矿来源放线菌Actinorectispora metalli KC 198~T的次生代谢产物进行研究,并测定其单体化合物的抗氧化活性.将放线菌A. metalli KC 198~Ti进行土豆液体培养基(PDB)发酵,然后采用乙酸乙酯萃取发酵产物;萃取物采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相RP-18柱色谱等方法,分离纯化次生代谢产物;单体化学成分通过核磁共振波谱与质谱表征,并结合文献数据对比,确定单体化合物的化学结构,单体化合物采用DPPH的方法测试其抗氧化活性.从乙酸乙酯及正丁醇部分共分离得到7个单体化学成分,依次确定为(1) 1,4-dimethoxy-2-hydroxynaphthalene-2-O-β-D-glucopyranoside、(2) 4-hydroxy-tetralone、(3)环(L-色氨酸-L-脯氨酸)、(4)尿嘧啶、(5)胸腺嘧啶、(6) β-adenosine、(7) 3-(2,3-dihydroxypropyl) indole.对分离的结构进行抗氧化活性筛选,结果表明以上单体化合物在50μmol/L的浓度下,均未显示出较明显的抗氧化活性.化合物1为...     

天然产物中化学成分提取的新方法--微波萃取法

自1986年Ganzler首先报道了微波用于天然产物中化学成分的提取后,微波萃取技术已成为近年来发展较快的一种新型提取技术,因它具有速度快、效率高、耗能少、时间短以及有利于环保等优点,目前广泛应用于食品、生物、制药、环境样品及天然产物提取等各领域中.文章从微波萃取的原理、特点、条件入手,对微波萃取技术在天然产物化学成分提取中的应用进行讨论.     

基于单菌多次级代谢产物策略的深海来源放线菌Streptomycessp.SCSIO 15079化学多样性研究

采用单菌多次级代谢产物(OSMAC)策略对1株深海放线菌Streptomyces sp.SCSIO 15079进行化学多样性研究。通过在不同盐度、pH值和发酵时长条件下对菌株进行培养调控并筛选出1种适宜发酵条件,分别进行摇床和发酵罐发酵。综合运用正相硅胶柱色谱、十八烷基硅烷(Octadecyl Silance, ODS)反相柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱(Sephadex LH-20)、半制备高效液相色谱(HPLC)等方法,对菌株摇床与发酵罐发酵产物中具有差异的化学成分进行导向分离与纯化,根据核磁数据和文献对比进行化合物结构鉴定。研究结果表明,将Streptomyces sp.SCSIO 15079菌种接种到不添加海盐、pH值为7.2的A培养基中,于28℃、180 r/min摇床发酵7 d,可获得更丰富的代谢产物;经分离鉴定,从摇床发酵产物中得到的9个与发酵罐发酵产物不一样的化合物且均为含氮类化合物,分别为吲哚甲醛(1)、3-羟基吲哚(2)、胸腺嘧啶(3)、尿嘧啶(4)、环-(脯氨酸-苯丙氨酸)二肽(5)、环-(亮氨酸-缬氨酸)二肽(6)、环-(丙氨酸-异亮氨酸)二肽(7)、环-(丙氨酸-缬...     

药用植物内生真菌分离及其次级代谢产物生物活性研究

为分离药用植物中内生真菌,从次级代谢产物中筛选对单胺氧化酶和乙酰胆碱酯酶有较高抑制率的提取物.用分块法分离5种植物,马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基纯化内生真菌,液体培养基发酵,用乙酸乙酯萃取菌液,甲醇提取菌丝体,用酶标法检测提取物对单胺氧化酶和乙酰胆碱酯酶的抑制率.共分离得到45株菌,制备了90种提取物,其中5株菌的菌液提取物对单胺氧化酶有不同程度的抑制率,露蕊乌头39(LRWT-39)的菌液提取物对单胺氧化酶的抑制率最高,所有提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制率不高.表明药用植物内生真菌中存在抗单胺氧化酶的活性成分,值得进一步研究.     

丙酮酸(盐)的液体发酵及其产物提取工艺优化的研究

采用TTC-CaCO3复合平板法筛选丙酮酸(盐)高产菌株,并采用正交实验优化丙酮酸(盐)的液体发酵条件及其产物提取工艺,结果表明:丙酮酸(盐)液体发酵培养的最优维生素组合为盐酸硫胺素0.015 mg/L,烟酸9 mg/L,生物素0.020 mg/L,盐酸吡哆醇0.35 mg/L;最优提取条件组合为:萃取剂种类为磷酸三正丁酯,发酵液与萃取液体积比为1:2,提取温度为20℃,其中萃取剂种类、发酵液与萃取液体积比对提取率的影响显著(P<0.05)丙酮酸(盐)发酵产物浓度及提取率均基本达到国内研究水平。     

内生细菌YBS106菌株发酵条件优化

对一把伞南星内生细菌YBS106发酵条件进行研究,确定其最佳发酵液培养基配方和最佳发酵条件。通过杯碟法测定YBS106发酵液对棉花枯萎病原菌的抑菌作用,研究了该菌株在不同培养基,不同生长条件下的代谢产物活性。菌株YBS106的最佳生长条件为:pH7.0,28℃,发酵72 h,接种量4%,揺床转速为200 r/min。在最佳培养条件下,该菌株对棉花枯萎病菌的抑菌率可达56%。     

QSE-HPLC快速测定动物源食品中硝基呋喃代谢产物

建立了快速溶剂萃取一高效液相色谱法(QAE-HPLC)快速测定动物源食品中硝基呋喃代谢产物含量的方法.优化了萃取溶剂、萃取温度、萃取压力、萃取时间等QSE萃取条件和HPLC分析条件.最佳萃取溶剂为体积比1:1的甲醇/三氯乙酸(0.68 mol/L),最佳萃取温度100℃,最佳萃取压力1.0×107Pa,最佳萃取时间10 min×3次.该方法简单、快速、高效,是硝基呋喃代谢产物快速检测的有效手段.     

固相微萃取-气质联用技术在天然产物挥发性成分分析中的应用

对固相微萃取-气质联用技术的原理、优点、萃取条件,及其在天然产物如水果蔬菜、香料、中草药、食品等挥发性成分分析中的应用进行了较为详细的阐述,综述文献47篇.     

枯草芽孢杆菌转化鱿鱼墨制备溶栓型发酵液

利用枯草芽孢杆菌发酵鱿鱼墨制备溶栓型发酵液,在发酵温度37℃和发酵培养基pH 7.2条件下,研究了枯草芽孢杆菌接种量、发酵时间、摇床转速、葡萄糖添加量和装液量对发酵产物的溶栓活性影响.在枯草芽孢杆菌接种量2.0％,发酵时间72 h,摇床转速160 r/min,葡萄糖添加量2.0％,鱿鱼墨发酵培养基装液量50 mL(100 mL锥形瓶)发酵条件下,鱿鱼墨枯草芽孢杆菌发酵液的溶栓活性与50.9 IU/mL尿激酶相当.     

一株野生艾草产红色素内生真菌发酵条件的研究

对野生艾草根块分离筛选得到的产红色素内生真菌WSB22进行了发酵条件的研究.利用单因素实验原理优化了菌株WSB22液态发酵培养基的营养组成成分,提高了红色素产量.结合单因素试验优化得到的数据,运用BoxBehnken试验设计原理,将发酵时间、果糖浓度和硝酸铵浓度用于设计三因素三水平实验,并通过响应面分析法对该菌液态发酵条件进行进一步优化,确定了发酵培养基的最佳发酵条件.结果表明,该菌株所产红色素在535 nm波长处有最大吸收峰.其最优发酵条件是:发酵时间为14 d、果糖浓度为29 g/L、硝酸铵浓度为52 g/L.在此条件下,红色素产量得到显著性提高.     

黑曲霉及其代谢产物对花岗岩风化作用的影响

【目的】为揭示微生物风化岩石的机理,促进土壤的形成和岩石边坡覆绿,改善生态环境,笔者研究了黑曲霉(Aspergillus niger)及代谢产物对花岗岩风化作用的影响。【方法】从花岗岩风化土壤中分离、纯化得到一株高效风化黑曲霉菌株,采用摇瓶实验和电镜分析,研究黑曲霉在发酵过程中产生代谢产物的种类及其对花岗岩中硅、铁、铝、钠等元素的浸出效果。【结果】在含有花岗岩粉的培养基中,黑曲霉发酵液中合成的6种有机酸(草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸)的含量在发酵初期逐渐升高,在发酵后期随着发酵时间的延长而逐渐降低;在不同发酵期合成的氨基酸种类不同。含花岗岩粉的培养基有利于黑曲霉大量合成多糖类物质。黑曲霉代谢产物摇瓶实验表明,有机酸、氨基酸、多糖等均可破坏岩石结构,并释放出硅、铁、铝、钠等元素。在岩石风化时,代谢产物具有协同作用,黑曲霉风化花岗岩效果最优,有机酸、氨基酸、多糖混合物浸出元素的效果又明显优于它们各自单独作用时的效果。【结论】黑曲霉及其代谢产物有机酸、氨基酸、多糖以及三者混合物都具有风化岩石的作用,且黑曲霉风化岩石的效果优于单一和混合代谢产物。     

谷氨酸发酵的研究(Ⅰ)——控制代谢产物提高产酸的初步探讨

本文分析了不同发酵条件下的发酵终期培养上清液中的有机酸、氨基酸等中间代谢产物,发现,生产大罐和麸皮添加量为1.2％以上的小型发酵摇瓶,能较大量地积累乳酸和琥珀酸;在氨基酸中除L-谷氨酸和丙氨酸外,缬氨酸的含量也大量积累,根据代谢转换发酵的规律,通过降低生物素用量,能使乳酸及琥珀酸含量明显下降;降低磷的用量,能使缬氨酸在图谱中逐渐消失,从综合实验中发现:在辽源味精厂的生产条件下,当基础培养基中的麸皮添加量为O.8％,降低磷,提高锰,补足钾的情况下,能显著地促进L-谷氨酸的积累,通常可将产酸率提高1％。 结果表明:发酵液中间代谢产物的分析在提高发酵产物的研究中,可以做为改变营养条件、促进产物积累的重要参考指标。     

无机离子对嗜盐放线菌株YIM 90615代谢产物多样性的影响

为了研究NaCl浓度、金属离子(Cr7+、Mg2+及K+)、氯化钪及卤素(I-、Br-及F-)对嗜盐放线菌株YIM 90615液体发酵过程中次级代谢产物多样性的影响,作者采用HPTLC(high performance thin layer chromatography)技术,结合紫外(254 nm)检测、碘及硫酸-茴香醛显色方法,对该菌代谢产物的HPTLC图谱进行了定性分析.结果显示,NaCl添加质量浓度为100 g/L时该菌株发酵效果最佳,有利于其代谢产物的多样性及量的积累;Cr7+和K+有利于其次生代谢产物的产生;1 g/L的氯化钪能增加其次生代谢产物的丰富性;F-对其次生代谢产物多样性有较好的促进作用.试验结果表明外源添加一定浓度和种类的盐离子有助于提升YIM 90615液体发酵过程中次生代谢产物多样性,为新型抗生素及其它有用化合物的产生创造合适条件,同时有助于嗜盐放线菌发酵培养基的筛选工作.     

胰蛋白酶水解酪蛋白所得产物抗菌活性的研究

利用胰蛋白酶水解酪蛋白,并对水解产物进行了分离,得到产物1、2、3,比较不同水解度条件下各种产物的抗菌活性;摸索培养基起始pH值、水解产物添加量对抗菌活性的影响.结果表明在37℃、底物浓度为10%时,三种水解产物的抗菌活性均随着水解度的增大而增大,并最终趋于平缓,产物3的抗菌活性最好;培养基起始pH值为8.0时,30 mL培养基中水解产物添加量达到2 mL时,水解产物的抗菌效果有较大提高.     

尾矿废弃地微生物天然产物研究进展

微生物新结构天然产物资源一直是天然有机领域的研究热点.但是,一些独特生态环境来源的微生物及其天然产物尚未引起广泛关注.作者就美国蒙大拿理工学院在柏克利露天矿坑湖丝状真菌代谢产物中分离得到的化合物,以及本实验室在云南个旧锡尾矿土壤微生物分离得到的化合物进行类型及活性的总结,并对尾矿废弃地微生物代谢产物研究进展及前景进行简要阐述,为寻求新结构天然产物资源提供参考.     

微生物转化法生产睾酮的发酵工艺改进

原发酵条件中的底物浓度过低,致使发酵液中的产物浓度不高,就提高底物浓度后的其它发酵条件进行了调整,通过正交实验,获得了最佳的发酵培养基配方,最后通过50 L放大发酵获得了成功,发酵液中产物浓度可达3 619 mg/L.     

合成气发酵梭菌C.autoethanogenum的生长特性与CO发酵性能

为探讨合成气发酵乙醇的新工艺,对梭菌C.autoethanogenum的生长特性及CO发酵性能进行了研究.考察了不同碳源对C.autoethanogenum生长的影响,发现木糖是其生长的最佳底物.对生长培养基进行了改良,使C.autoethanogenum的菌体质量浓度提高2倍以上,代谢产物以乙酸为主,只产生少量乙醇.利用1 L气体采样袋研究了C.autoethanogenum的CO发酵性能,在1.0 g/L酵母膏的发酵培养基中经过两次CO发酵后,乙醇质量浓度达3.464g/L,CO乙醇转化率达51.7%.研究表明:N2环境、180℃、4MPa下,20min高温液态水处理蔗渣得到的水解液可用于C.autoethanogenum的培养,培养液再进行CO发酵,经过一次发酵后得到的乙醇质量浓度为3.13g/L,CO乙醇转化率为46.9%,与之前两次发酵的结果接近,但是发酵时间大大缩短.     

5种培养基对蛋白核小球藻生长及其产物合成的影响

以蛋白核小球藻CP-FJ9为出发藻株，在异养培养条件下，采用SE、HA-SK、BG11、Basal和BBM 5种培养基分别对小球藻CP-FJ9进行培养.通过测定生物量、比生长速率及细胞内主要成分，比较5种培养基对小球藻CP-FJ9生长及其产物合成的影响.实验结果表明：Basal培养基更适合小球藻CP-FJ9快速培养，可获得最高生物量12.93 g·L^-1和最大比生长速率0.64 d^-1;而HA-SK培养基则更有利于蛋白质的合成，可获得最高蛋白质产量5.14 g·L^-1.另外，在10 L发酵罐中使用HA-SK培养基异养培养蛋白核小球藻CP-FJ9,经72 h发酵后，小球藻最终生物量为20.05 g·L^-1,蛋白质含量为49.06%.这表明，蛋白核小球藻CP-FJ9是一株有潜力用于开发富含蛋白质的藻种.     

乳酸菌发酵对半干罗非鱼挥发性成分的影响

采用顶空-固相微萃取( HS-SPME)技术,并结合气相色谱-质谱(GC-MS)技术对未发酵半干罗非鱼和经乳酸菌发酵半干罗非鱼中的挥发性物质进行研究,优化了固相微萃取的条件.结果显示:样品在50℃条件下,采用聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯(PDMS/DVB)涂层的萃取头萃取50 min,可得到较好谱图.通过气相色谱-质谱分...     

金霉素链霉菌发酵培养基的优化

金霉素链霉菌能产生四环素族抗生素,而抗生素是微生物的次级代谢产物,其产量与培养基的组成成份及培养条件密切相关.通过单因素试验考察金霉素链霉菌生长所需要的碳源和氮源,在此基础之上再通过4因素3水平正交试验对金霉素链霉菌发酵培养基进行优化筛选,其4因素分别为玉米淀粉、黄豆粉、硫酸铵、酵母粉的质量分数.试验结果表明,优化后得到的最佳培养基,用管碟法测得的试验菌种发酵液的生物效价达到183.2μg/mL.对正交结果进行极差分析得知,发酵培养基中酵母粉质量分数对试验菌种发酵产抗生素影响最大,其次为玉米淀粉,再次为黄豆粉,硫酸铵对抗生素产量影响最小.筛选得到的最佳发酵培养基组成为:玉米淀粉100.0 g/L,黄豆粉50.0 g/L,硫酸铵6.0 g/L,酵母粉4.0 g/L.