野西瓜总生物碱诱导SGC-7901凋亡机制的研究

通过体外抗肿瘤实验探讨了野西瓜(C.S)总生物碱对诱导人胃癌SGC-7901细胞的抑制特点,并初步探讨了游离钙、活性氧水平的变化与野西瓜总生物碱诱导肿瘤细胞凋亡的关系.野西瓜总生物碱作用的实验组与阴性对照组相比实验组各时间段G1期细胞都多于阴性对照组,而实验组的S期细胞少于阴性对照组,即野西瓜总生物碱能够阻滞肿瘤细胞由G1期进入S期.野西瓜总生物碱给药24 h后,细胞出现凋亡,且作用较明显,与质量浓度有关.因此以上实验证明野西瓜总生物碱可引起SGC-7901细胞凋亡.75、150、300 μg/mL 的野西瓜中总生物碱作用于SGC-7901细胞24 h后,活性氧(ROS)水平明显上升.而不同质量浓度的野西瓜总生物碱作用于SGC-7901细胞24 h后,用荧光染料Flow-3/AM对细胞进行染色,经过激光共聚焦显微镜观察发现野西瓜总生物碱能提高肿瘤细胞内钙离子质量浓度,且呈一定的剂量依赖关系.通过流式细胞仪分析,野西瓜总生物碱能明显提高肿瘤细胞内活性氧的水平.所以体外实验证明了野西瓜总生物碱对SGC-7901细胞具有抗肿瘤活性.在作用机制方面,可能与其可通过提高肿瘤细胞内钙离子质量浓度和增加肿瘤细胞内活性氧的产生,进而启动细胞凋亡机制诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

细胞凋亡与坏死机制的研究

<正>细胞在一定的生理病理条件下或遭遇恶劣环境时,为了应对外界刺激维持自身稳态,会采用不同的细胞死亡方式应对环境变化,其中极为重要的2种细胞死亡方式——细胞凋亡和细胞坏死,细胞坏死会导致炎症反应,而凋亡不会,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor.TNF)是一类具有多种生物效应的细胞因子,能特异性地杀伤肿瘤细胞,诱导细胞凋亡.找到调控细胞凋亡和坏死之间转换的开关具有重大的理论和临床意义,我校韩家淮教授团队项目TNF诱导的细胞坏死分子机制的研究发现了细胞坏死与细     

局灶性脑缺血神经元凋亡和坏死的分析比较

凋亡在发育和生理性细胞死亡中起着重要的作用，然而，局灶性或全脑缺血后，神经元的死亡是通过坏死或是凋亡，一直存在争议。本研究采用全线法建立大脑中动脉缺血再灌流动物模型，成年雄性ＳＤ大鼠缺血０．５、１．５、３、６ｈｒ，再灌流２４ｈｒ后，用ＴＴＣ、组化染色和ＵＴＵＮＥＬ方法分别检测梗塞灶体积、细胞形态学改变和核ＤＮＡ降解。神经病学检查按ＺｅａＬｏｎｇａ的五分制评标准。结果发现除１例无神经缺陷、两例死于癫     

西兰花中ITCS诱导SGC-7901细胞凋亡作用机制

研究西兰花中异硫氰酸盐(isothiocyanates,ITCS)诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用及其机制.应用MTT法检测ITCS对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞仪检测活性氧、线粒体膜电位(Δψm)和细胞凋亡率.实验证明ITCS可明显抑制SGC-7901细胞增殖;不同质量浓度的ITCS作用于SGC-7901细胞24 h后,细胞内活性氧含量随给药剂量的增加而升高、线粒体膜电位依次降低.60、120、240μg/mL的ITCS作用于SGC-7901细胞48 h后可见细胞凋亡率分别为9.1%、20.1%和55.4%.ITCS可通过刺激SGC-7901细胞内活性氧的产生,损伤肿瘤细胞线粒体,使其膜电位下降最终引起SGC-7901细胞凋亡.     

患包涵体肝炎鸡血淋巴细胞凋亡、坏死的研究

运用流式细胞仪技术研究了鸡包涵体肝炎(inclusion body hepatitis,IBH)发病过程中血液淋巴细胞的凋亡、坏死变化情况.结果表明,攻毒组在攻毒后3~5d,淋巴细胞早期凋亡显著下降(P<0.05),7d明显升高(P<0.05),12d时淋巴细胞早期凋亡下降显著(P<0.05).攻毒组在攻毒后3~5d时,淋巴细胞坏死与对照组差异不显著(P>0.05),7~12d时显著低于对照(P<0.05),在25d时显著高于对照组(P<0.05).     

TNF与IFN协同诱导癌细胞凋亡机制的研究进展

综述了肿瘤坏死因子(TNF)与干扰素(IFN)协同诱导肿瘤细胞凋亡的机制.分别从受体、细胞周期、相关基因及凋亡途径4个方面进行阐述,以期为细胞因子的游离及固定药物的机制研究提供理论参考,并对肿瘤细胞因子治疗的临床用药有指导意义.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

为研究卵巢癌多药耐药机制和逆转耐药,探讨在低剂量顺铂存在下,人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对多药耐药人卵巢癌细胞的杀伤增效作用及其可能存在的分子病理机制。用顺铂为诱导剂,逐步建立多药耐药人卵巢癌细胞株SKOV3/cDDP。(此细胞株经免疫组化检测P-gp高表达)。TRAIL、顺铂或两药联用12h,24h,48h,采用MTT法测试细胞毒作用,Hochest33258染色荧光显微镜下观察细胞形态学改变,透射电镜下观察亚细胞结构形态,通过流式细胞术检测细胞凋亡比例,Western blot分别检测在联用TRAIL作用前后cFLIP蛋白的表达情况。结果显示:1)单用100ng/mL TRAIL只能杀伤4.67%±0.26%的SKOV3/cDDP细胞,IC50>1000ng/mL。顺铂对SKOV3/cDDP细胞的作用存在剂量依赖性细胞毒效应,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现;2)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用可杀死52.12%±2.84%的SKOV3/cDDP细胞。呈现出高效协同作用;3)流式细胞术分析、透射电镜观察及荧光显微镜证实其协同性杀伤作用主要通过促进诱导细胞凋亡实现;4)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用,可使细胞cFLIP蛋白的表达下调,促进了细胞凋亡的发生。结论:TRAIL与亚毒性浓度顺铂联用表现出对多药耐药人卵巢癌细胞的高效杀伤作用,这种作用可能主要由促进细胞凋亡介导实现,cFLIP蛋白的表达减少可能参与这一过程。     

SO_2诱导拟南芥保卫细胞凋亡

以拟南芥叶片下表皮为材料,研究了SO_2体内衍生物-亚硫酸钠和亚硫酸氢钠混合液(3:1,mmol·L~(-1)/mmol·L~(-1))对气孔保卫细胞的致死效应.结果表明,浓度1.0～5.0 mmol·L~(-1)的SO_2衍生物处理表皮3 h可引起保卫细胞死亡,死细胞出现核固缩、核断裂、凋亡小体等典型的核凋亡特征,且胁迫组细胞内活性氧和钙离子水平升高.蛋白酶抑制剂Z-Asp-CH_2-DCB和TLCK能减少SO_2衍生物诱导的细胞凋亡;过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸(AsA),及Ca~(2+)螯合剂乙二醇双四乙酸(EGTA)和Ca~(2+)通道抑制剂LaCl_3均可使SO_2衍生物诱发的细胞死亡率降低.0.1 mmol·L~(-1)的AsA或EGTA能降低胁迫组胞内的活性氧和Ca~(2+)水平,与死亡率降低相伴发生.以上结果表明,一定浓度的SO_2可诱导拟南芥保卫细胞凋亡,胁迫可能通过诱导活性氧产生、胞外钙内流,造成胞内Ca~(2+)浓度升高,引发细胞程序性死亡.     

槲皮素诱导膀胱癌细胞凋亡的机制研究

为了探讨槲皮素对膀胱癌细胞株生长的影响,运用细胞培养、光镜观察、MTT法测定细胞活性等方法,对比不同浓度槲皮素对膀胱癌细胞的生长抑制情况,为寻找新的膀胱癌细胞的治疗药物提供实验依据。结果表明高浓度的槲皮素对膀胱癌细胞具有明显的抑制作用。     

细菌内毒素诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨细菌内毒素对人肝癌细胞株7721的影响程度.方法:用含有细菌内毒素1000 EU/mL、500EU/mL、100 EU/mL、50 EU/mL、0EU/mL的DMEM细胞培养液来培养7721细胞,通过细胞计数来绘制细胞生长曲线,台盼蓝排除法测定细胞活率、用DNA梯形条带法及TUNEL原位法检测细胞凋亡情况.结果:细菌内毒素对肝癌细胞7721生长有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性.此种抑制是通过诱导细胞凋亡达到的,肿瘤坏死因子检测结果没有发现规律性.结论:内毒素在体外可以诱导肺腺癌细胞的凋亡,且存在明显的剂量关系,并且此凋亡不是依赖TNF-α途径发生的,为临床上诱导肿瘤细胞凋亡,从而为预防和治疗肿瘤提供了理论依据.     

R—藻红蛋白光动力杀伤的形态学机制研究

在荧光显微镜下观察新型光敏剂Ｒ藻红蛋白的荧光在肿瘤细胞中的分布,探讨以藻红蛋白为光敏药物的光动力损伤可能发生的细胞水平机制,以及培养液酸度和藻红蛋白浓度对其与细胞结合、进入及光动力杀伤的关系．结果表明在ｐＨ５ 时,藻红蛋白与瘤细胞有最好的结合．其结合部位随藻红蛋白浓度的增加,逐渐以分布在胞膜、胞浆和胞核为主,表现为一个动态进入细胞的过程．光动力杀伤作用与其进入细胞的数量成正相关,从形态学上证明了Ｒ藻红蛋白介导的光动力治疗作用与藻红蛋白进入瘤细胞状态紧密相关．     

Hydroxyl Radical Induced Apoptosis Is Closely Related to Changes in Cellular Energy／Redox Metabolism

IntroductionApoptosis,programmed cell death,is acomplicated process.In recent years,thebiochemical and molecular mechanisms ofapoptosis have been under intense scientificinvestigation[1] .Particularly,research has revealedthe execution pathways of apoptosis and its keycomponents,caspases,as well as a series ofregulators and cofactors.However,furtherresearch is needed on the initiation of apoptosis,namely how a cell is induced to die.This reporthighlights the energy redox metabolic aspects ofa…     

数字化可视人体(DVH)与光动力学疗法(PDT)

光动力学疗法(PDT)是一种正在发展中的激光医学技术,它在治疗人体的局部病变,特别是肿瘤方面,有着较为理想的效果。但是,由于人体自身及其病变的复杂性,PDT在医学中的应用仍然存在很大的局限性。可视人计划(VHP)的目标是要建立一个人体解剖的完整的图像和数据库,从而达到精确反映人体组织的目的,也为PDT的发展提供了新的契机。     

长波紫外光引起人红细胞自体荧光增强效应的研究

研究长波紫外光对红细胞的生物学效应之一——自荧光增强效应。用不同强度长波紫外光(365 nm)照射人红细胞,观察红细胞自体荧光变化。在实验中加入外源活性氧理论模拟非连续紫外光引起自荧光变化。结果随着照射强度的升高,红细胞自荧光作用逐渐加强;随着时间延长荧光逐渐减弱。连续紫外光照射下,起始自荧光增强速率是受到细胞内氧自由基浓度的影响;因此,在过程中紫外光的作用之一是生成大量活性氧,进一步影响自荧光增强的速率。在紫外线照射充氧自血回输疗法(UBIO疗法)过程中,对血液进行短时间的紫外光照射,必然会使红细胞中的血红素发生光解,并生成了一定量的活性氧自由基(ROS),再将红细胞回输人体后可能引起人体内的应激反应,从而激发清除这些产物的一系列反应,从而改善人体环境。     

光动力学疗法（PDT）中热疗辅助效果的探索

光动力学疗法(PDT)是一种正在发展中的激光医学技术,它在治疗人体的局部病变,特别是肿瘤方面,有着较为理想的效果.而在光动力治疗的同时,光纤头产生的热量又会对病变组织形成热疗的效果.研究了光纤头放置的位置对热疗辅助效果的影响,并给出了定量计算.     

Apoptosis of RKO induced by catechins and GA through Ca<Superscript>2+</Superscript> and LIP

The anti-tumor effects of catechins and gallic acid （GA） in-vitro was investigated in this paper. Fluo-3AM, Calcium-AM （Ca-AM）, 2＇, 7＇ -dichlorofluorescein-diacetate（DCFH-DA）, 4＇ ,6-dia- midino-2- phenylindole （DAPI） and Ca-AM plus colbat were used to characterize intracellular calcium, labile iron pool （LIP）, reac- tive oxygen species （ROS）, nuclei morphology and mitochondrial permeability transition pore （mPTP） opening, respectively. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to quanti- tare catechins and GA in the cultural medium. The results indi- cated that each of them showed dose response inhibition of cell growth, provoking nuclei condensation, intracellular calcium ele- vation, mPTP opening, LIP reduction, and cytochrome c （Cyt-C） to release into cytosol. The caspase inhibitors, 2-aminoethox- ydiphenol borate （APB） or Fe3＋ could inhibit lethal effects of GA and （-）-epigallocatechin （EGC）, but failed to affect （-）-epigalloca- techin gallate （EGCG） and （-）-epicatechin gallate （ECG）. Level of ROS presented negative growth while their concentration de- creased in the medium. In conclusion, our findings suggest that viability of RKO decreased because of their good correlation with elevation of calcium and loss of L1P and ROS in cytosol.     

光动力疗法中不同激光条件癌肿杀伤效果的比较

本文报告应用两种不同波长激光为PDT(光动疗法)的激光源,对小鼠移植肿瘤进行杀伤实验。结果表明:在相同光剂量下,HPD—氩离子泵浦的染料激光(波长6300A)对肿瘤杀伤的效果强于HPD—氩离子激光(波长5145A)(P<0.01);同一波长激光在光剂量相同时,采用不同的瞬间功率,对肿瘤杀伤的效果相同(P>0.20)。