三苯基锡对热带爪蟾胚胎的早期发育毒性

有机锡的外暴露能引起脊椎动物胚胎的独特畸形,但通过母体传递引起的内暴露毒性还缺乏研究.本文通过显微注射的方式研究了三苯基锡(TPT)、过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)的激动剂罗格列酮(Rosi)和抑制剂T0070907(C_(12)H_8ClN_3O_3)对热带爪蟾胚胎的发育毒性.将3种化合物注入S1一S2期的胚胎后,胚胎的存活率显著下降,其中5 ng TPT,80 ng Rosi和10 ng T0070907注射组存活率分别为46.9%、42.7%和54.2%.胚胎的体长也受到不同程度的影响,5 ng TPT,80 ng Rosi和20 ng T0070907注射组与对照相比体长分别减少了27%、22%和57%.3种化合物还引起了多样的畸形效应,尤其是头部变小及眼睛畸形.说明PPARγ在热带爪蟾早期胚胎的发育特别是头、眼发育中扮演非常重要的角色.TPT与相近剂量T0070907引起的畸形非常相似,说明TPT的致畸机制可能与PPARγ存在某种关系.另一方面,利用整胚原位杂交检测了注射TPT后S20及S25期胚胎的头、眼部标志基因的空间表达,结果表明bf1、en2、krox20及pax6的表达信号均随TPT剂量增大而逐渐变弱且区域变小,定量PCR进一步验证了TPT能在神经胚及早期尾牙期之前影响胚胎头、眼标志基因的表达.研究结果表明,TPT的内暴露对脊椎动物胚胎具有较强的致畸效应和神经毒性.     

鸡胚复方制剂对小鼠游泳时间及脾脏指数的影响

实验以45～60d龄小白鼠为研究对象,用鸡胚尿囊液、枸杞、维生素C配制成的鸡胚复方制剂灌胃10d后,测定游泳时间和脾脏指数.结果表明,鸡胚尿囊液配合枸杞或维生素C后可极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)提高小白鼠的脾脏指数;鸡胚尿囊液配合枸杞和维生素C可极显著(P<0.01)延长小白鼠的游泳时间.     

刘荣秀首创鸡疡胚期非注射免疫法

“鸟类卵黄囊造血期血细胞薄生及免疫功能研究",在沈阳农业大学刘荣秀副教授主持下取得大突破。在世界上首创了方法简便、成本低廉的鸡疡胚期非注射免疫法,将为鸡疡的有效予防开辟新途径,并将为我国养禽业的发展和繁荣带来福音。刘荣秀首创鸡疡胚期非注射免疫法~~     

电针对多囊卵巢综合征模型系统的调控

通过母体高雄环境建立子代雌性大鼠高雄激素血症和胰岛素抵抗模型,探讨针刺对孕期高雄化大鼠的治疗效果以及针刺调节卵巢局部胰岛素信号传导关键分子磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)和丝裂原激活蛋白激酶(MAPK),明确针刺治疗胰岛素抵抗的分子机制。在Wistar雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮,连续3d。以其所生雌鼠作为实验对象,观察其体重及动情周期,检测血清性激素,17-羟孕酮(17-OHP)、雄烯二酮(A2)及OGTT试验测血糖、胰岛素水平,然后给予针刺治疗,观察其对生殖与代谢功能的影响。运用免疫组化及蛋白印迹方法,检测骨骼肌和卵巢组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI-3K85)、葡萄糖转运蛋白-4(GLUT4)、细胞外信号激酶-1(ERK-1)和17羟化酶(CYP17)蛋白表达。结果显示:①模型鼠无排卵,高雄、糖耐量减低,胰岛素抵抗;②针刺可以恢复动情周期,降低体重,降低LH、17-OHP、A2、T水平,升高E2水平;降低OGTT试验1h血糖水平,降低空腹和1h胰岛素水平,降低HOMA指数;③骨骼肌和卵巢局部产生胰岛素抵抗后,相应的IRS-1、IRS-2、PI-3K85和GLUT4的蛋白表达下降,ERK-1、CYP17的表达升高;针刺能逆转蛋白的异常表达。由此得出以下结论:①孕期注射丙酸睾丸酮,所生子代雌鼠有生殖和代谢异常,符合PCOS患者临床特征;②针刺能够降低雄激素,降低血糖,提高胰岛素敏感性,降低体重;③针刺能够调节模型动物骨骼肌和卵巢局部胰岛素信号传导蛋白表达和卵巢局部雄激素合成酶表达。     

Formestane和17-βestradiol诱导鸡、鹌鹑胚胎性反转的研究

为了研究芳香化酶抑制剂(Formestane)和17β-雌二醇(17-βestradiol)对鸡和鹌鹑胚胎性分化的影响,试验根据家禽性别分化的机理,利用100μg/mL的Formestane和50μg/mL的17-βestradiol,通过胚蛋注射的方法对3日龄的鸡胚和2日龄的鹌鹑胚进行处理,观察Formestane和17-βestradiol对鹌鹑性别分化的影响。结果表明,注射Formestane和17-βestradiol的鸡胚和鹌鹑胚都发生了性反转。     

锰对大鼠行为致畸的影响

为研究大鼠孕期染锰后其后代行为畸胎学的作用 ,对 4组受孕大鼠腹腔注射氯化锰 ,每次剂量分别为0 ,7.5,1 5,3 0 mg/ kg,待其自然分娩后 ,观察其子代生长发育及行为状态。结果表明 ,大鼠孕期染锰 ,可引起其子代生长发育及行为功能部分指标延迟 ,锰具有行为致畸作用     

双酚A对鸡胚中枢免疫器官发育影响的形态学观察

为进一步研究双酚A(BPA)的毒性作用,本试验对9日龄AA鸡胚和SPF鸡胚尿囊腔注射双酚A,待鸡胚孵化至22日龄,取鸡胚法氏囊和胸腺进行下述各项指标测定和形态学观察。结果显示,与对照组相比较,试验组鸡胚孵出率显著降低,法氏囊指数明显变小(p<0.05);染毒组法氏囊淋巴滤泡个数显著少于对照组(p<0.01),胸腺皮质、髓质厚度极显著小于对照组(p<0.01);光镜观察发现,双酚A染毒组法氏囊淋巴滤泡和胸腺髓质中的髓细胞明显多于对照组,扫描电镜下可见细胞间隙明显增大,显现针孔样结构。研究结果表明,双酚A对AA鸡胚和SPF鸡胚中枢免疫器官有毒性作用,对鸡胚法氏囊和胸腺的发育有显著的抑制作用。     

鸡胚对小鼠抗衰老和抗疲劳的作用

以小白鼠为研究对象 ,分别进行了鸡胚在小鼠抗衰老和抗疲劳方面作用的实验 .实验结果证明 ,用 10d龄鸡胚物质灌服小鼠 4 2d后 ,小鼠血浆SOD含量明显升高 ,浆MDA水平显著降低 (P <0 .0 1) ,从而证明鸡胚对小鼠有显著的抗衰老作用 .游泳实验证明 ,用 10d龄鸡胚物质给小鼠灌服 10d后 ,游泳持续时间较对照组显著提高 (P <0 .0 1) .     

紫外线处理不同发育时期的金鱼幼胚产生的生理效应

采用紫外线(UV)来处理4-8细胞期、多细胞期、原肠期和心脏搏动期四个时期的金鱼幼胚,研究紫外线对金鱼幼胚发育的影响．结果发现：(1)对多细胞期以前的金鱼幼胚进行UV辐射,整体上可以提高孵化率．且低剂量时对金鱼幼胚并无明显伤害,但如果剂量过高,便会出现大量畸形鱼,成活率明显下降．(2)对原肠期以后的幼胚进行照射,随着剂量的增加,致畸率急剧上升,同时孵化率和鱼苗的成活率都迅速下降．这说明紫外线对此时的幼胚主要表现的是损伤作用．     

人用单克隆抗体某些鼠源性病毒探针的初步建立和应用

本文报导了用光敏生物素标记的鼠肝炎(MHV)、鼠痘(Ectro)全基因组核酸探针来检测人用单克隆抗体鼠源性病毒的初步应用。同时用间接免疫荧光(IFA),鸡胚绒毛尿囊膜感染试验(CAM),病理包涵体检查。结果是探针法与IFA法均能检测MHV。Ectro通过上述试验均为阴性。     

鸡胚蛋营养成份的测试报道

<正> 喜蛋(孵化21天未出壳的死鸡胚)可作为“中医秘方”治疗体亏、贫血、性机能失调等疾病。在古医书中早有记载、施佩璜等曾报道,鸡胚蛋(孵化12～15天的活鸡胚)对“白血球降低病”患者具有显著的升高白血球的作用,继而又证明鸡胚肝中提取的RNA对“升白模型的小白鼠”有升白作用。但对于鸡胚蛋中所含成分的研究,目前还少有详细报道。为此,作者认为有必要进行这方面的测试工作,为进一步探索鸡     

抗白血病转移药物筛选模型的实验研究

构建抗白血病转移药物筛选模型.K562细胞转染GFP质粒后,经筛选,将稳定高表达GFP的K562细胞注射到鸡胚里,孵化后观察K562细胞在鸡胚中转移情况.在其脑部、胸骨及心脏可看到明显的荧光,最频繁发生的部位是脑部.成功构建含GFP的白血病鸡胚模型,并验证了虎眼万年青皂甙（OSW-1）和链激酶（SK）联合用药的抗转移效果.     

促性腺激素与性腺激素对母鸡产蛋性能作用的试验

选择180只,34周龄“京白823”母鸡,采用孕酮、孕酮+PMSG处理,以探讨提高鸡产蛋率的激素处理途径。试验结果,孕酮在每日每天0.02—0.05毫克时,可明显提高鸡产蛋率(P<0.01)。注射PMSG后,母鸡产蛋量明显增多,但多次重复处理可造成“钝化”现象。     

敌枯双(Bis-A-TDA)对果蝇(Drosophila melanogaster)的胚胎毒性及烟酰胺的解毒作用

将野生型果蝇分别培养于含0,10,100,150,200,25O,35O,500,700,1000ppm敌枯双的果蝇培养基上,在25℃交配、产卵6d.子代成蝇羽化后,每天检查其外部畸形并计数.解毒试验组加烟酰胺(NA)、敌枯双(Bis-A-TDA)各200ppm于培养基中.实验结果表明:(1)敌枯双对果蝇的胚胎毒性随剂量增加而上升.(2)烟酰胺能部分解除敌枯双对果蝇的胚胎毒性.(3)低剂量敌枯双(10—100ppm)处理,能增加子代成蝇的羽化数,有促进作用.     

视黄酸对热带爪蟾胚胎致畸效应的表型特征

取典型的胚胎致畸剂——全反式视黄酸对热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎进行24,36和48 h暴露.结果表明,2,10和50 μg·L^-1视黄酸暴露对胚胎的存活率没有影响,对胚胎的生长和发育却有明显的抑制作用,并导致所有胚胎出现畸形现象,说明视黄酸对热带爪蟾胚胎具有极强的致畸性,同时显示了热带爪蟾胚胎对视黄酸的敏感性.视黄酸主要引起胚胎脑部缩小、眼睛色素减少、围心腔水肿和尾巴弯曲等多种畸形类型. 24,36和48 h后,暴露组脑部畸形指数和眼睛畸形指数较对照组均有明显增加,并表现出较好的浓度-效应关系,而时间-效应关系不明显,表明视黄酸对脑和眼部的影响主要发生在暴露的前24小时;48 h后尾部的畸形指数相对于24 h有明显的升高.将视黄酸导致的胚胎畸形类型与污染物三丁基锡对比,表明视黄酸致畸特征图谱在三丁基锡致畸机制的研究中有重要的参考价值.由此可见,有可能将FETAX实验发展为一种基于致畸机制的发育毒性检测方法.     

微注射MT-hGH融合基因后小鼠原核卵体外发育和移植的研究

将MT-hGH(小鼠金属巯因启动子--人生长激素基因)融合基因,用微注射的方法注入昆明白小鼠原核卵的雄原核中,观察注射外源基因对原核卵的存活,卵裂及2细胞胚胎体外发育的影响。实验结果表明,昆明白小鼠原核卵在雄原核内注射2p1 MT-hGH基因悬液后存活率为86.71％,其存活率与只穿刺雄原核不注射:注射培养液;注射TE缓衡液后存活率相近(分别为84.94％,84.4％和86.42％)。基因注射后原核卵存活率降低主要由注射针机械刺激引起的。原核卵在注射MT-hGH基因后注射胚卵裂率显著降低,以培养24h统计。注射培养液组活胚卵裂率为93.98％,丽注射基因组仅为87.96％(P<0.01)。注射MT-hGH基因组在体外培养条件下,2细胞到胚泡的发育率为40.66％,而注射培养液的对照组为64.09％(P<0.05)。注射基因组胚胎发育速度延缓,部分胚胎延缓12h。将基因注射后的原核卵经体外培养形成的198枚2细胞胚。45枚桑椹胚和161枚胚泡,移植给54只假孕受体,其中16只受体妊娠,产仔49只。目前存活25只。85日龄时。有6只小鼠体重为对照组平均体重的1.207～1.353倍,生长速度较快。经检测其中有5只呈阳性反应为转基因小鼠。     

慢性呼吸道疾病的致病原,大鼠纤毛相关呼吸道杆菌,一种新认识的病原菌的分离,培养和特征

<正> 把患有慢性呼吸道疾病(CRD)的实验大鼠的支气管擦洗物,接种到鸡胚尿囊内进行纯培养,分离出一种革兰氏阴性的丝状杆菌。它不能在无细胞培养基上生长。在间隔为1周的20次连续传代中,没有鸡胚死亡。将传到第十代的鸡胚尿囊液,给8—12周令的剖腹取胎后养在屏障系统内的SD大鼠鼻腔接种,这种杆菌可重新从鸡胚中分离出来。在研究过程中,被接种的大鼠放在Horsfall单位中,使之保持无其它已知的呼吸道病原,如霉形体和鼠病毒。这种杆菌生长在     

小鼠精子微注射受精卵的体外发育与移植的研究

用显微注射方法,将精子注入小鼠卵母细胞卵周隙中,使精卵体外受精获得受精卵。并对精子注射后卵母细胞的成活率、受精率和受精卵的发育率以及移植后受胎率等方面进行了系统的研究,结果表明:卵子存活率为75.36％(1309/1737),其中264枚卵裂,受精率为20·17％(264/1309),卵裂卵经体外培养后有192枚发育到桑椹胚及胚泡期,发育率为72.73％(192/264)。将其中73枚(桑椹胚10枚,肛泡63枚)胚胎移植到10只假孕受体子宫中,一只受体妊娠产仔9只,仔鼠发育正常。     

鸡胚对小鼠生长和免疫力的影响

实验以 3 0龄小白鼠为研究对象 ,分别采用鸡胚尿囊液和生理盐水 (对照 )灌胃 3 0d .结果证明 ,鸡胚尿囊液具有明显的促进生长作用 ( p <0 .0 1) ,促进生长效果达 12 .1% .鸡胚尿囊液和胚体混悬液对小鼠具有很好的提升作用 .试验证明 :鸡胚尿囊液和胚体混悬液不仅可以增加小鼠吞噬细胞数量 ,提高其吞噬能力 ( 0 .4mL/ (只·日 )灌胃时 ,p <0 .0 1) ,而且可以提高T淋巴细胞的数量 ( 0 .2mL/只 ,0 .4mL/ (只·日 )灌胃时 ,p <0 .0 1) .就提高小鼠免疫能力而言 ,以 10d龄的鸡胚尿囊液和胚体悬液 ,剂量为0 .4mL/ (只·日 )效果最好 .有关鸡胚尿囊液在功效学方面的作用 ,有待进一步研究 .     

鸟类胚胎消化道原基细胞分化的研究

本文用不同发育时期鹌鹑胚与鸡胚的种间移植实验结果表明,相当于鸡胚H.＆ H.17—23期的鹌鹑胚后肠原基尚不具备自主分化的潜能,只能并入寄主大肠发育,但不同区域的消化道中胚层间质细胞对内胚层细胞具有不同的诱导能力.相当于鸡胚H.＆ H.28—23期的鹌鹑胚后肠原基已具有自主分化的潜能,在寄主鸡胚体腔内能定向发育成鹌鹑大肠.本文还对移植系统中消化道原基细胞的分化进行了分析.