沙田柚花粉蛋白质双向电泳分析

比较分析沙田柚花粉不同发育时期和自交、异交花粉蛋白质的双向凝胶电泳图谱，随着花粉的发育，其蛋白质格局始终处于变化之中，单核期和双核期花粉中相对分子质量小的蛋白质明显增多，萌发的花粉中相对分子质量小的蛋白质亦较多，是与此时花粉生理活动旺盛有关，自交、异交花粉蛋白质格局无明显差别，但是发现异交粉管中一些蛋白质在自交花粉中缺失或含量较低，说明自交条件下花粉管一些蛋白质表达可能受到了抑制，该结果为“膜受体假说”提供了一个新的实验证据。     

适于双向电泳分析的银杏叶绿体蛋白质提取方法

【目的】获得银杏叶绿体蛋白质的提取方法,在蛋白质水平探讨银杏光合作用对环境的响应机制。【方法】建立一种适合银杏叶绿体蛋白双向电泳分离的实验体系,采用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,并与三氯乙酸(TCA)-丙酮沉降法进行对比分析。【结果】Percoll密度梯度离心法适用于银杏叶绿体的提取,提取的叶绿体平均完整率在85%左右。单向电泳结果显示,与TCA-丙酮沉降法相比,在用Tris-平衡酚抽提法分离的叶绿体蛋白质泳道中,低分子质量蛋白质条带更多、更清晰。进一步的双向电泳结果表明,用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,蛋白质产量更高,图谱清晰,所分离的蛋白点更多,形态更好,条纹影响相对较小。【结论】Tris-平衡酚抽提法可有效地提取高质量的叶绿体蛋白质并进行双向电泳,可用于银杏叶绿体的蛋白质组学分析。     

沙田柚自交、异交花柱蛋白质的双向电泳

比较分析了沙田柚自交授粉花柱和异交授粉花柱的双向凝胶电泳图谱,两者的蛋白质分布格局相似,具有重叠性,可分析出１００多种蛋白质,在自交花柱电泳图谱中发现３种特异蛋白质（Ａ,Ｂ,Ｃ）,Ａ蛋白质ＭｒＡ＝３２．０ｋｕ,ｐＩ＝７．２;Ｂ蛋白质ＭｒＢ＝２６．０ｋｕ,ｐＩ＝７．２;Ｃ蛋白质ＭｒＣ＝２５．０ｋｕ,ｐＩ＝６．５,这３种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关。     

双向电泳分析植物蛋白质的重演性、敏感性和清晰度

对双向电泳分析植物蛋白质的重演性、敏感性和清晰度进行了讨论,对蛋白质样品制备、电极缓冲液、染色时间和温度等可以影响实验结果的条件进行了详细的研究。     

甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化

为了建立适合甘蔗叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对甘蔗叶蛋白质的溶解方法、IEF电泳、上样量等关键步骤进行了优化.结果表明:裂解液中有2 mmol/L的硫脲才能更充分地溶解蛋白;上样量1.0 mg时得到质量较好的凝胶图谱;甘蔗叶片蛋白质主要分布在pH4～7范围.通过对甘蔗叶片蛋白双向电泳技术的优化,提高了双向电泳图谱分...     

人表皮组织蛋白质组双向电泳技术的建立

目的:建立和优化人表皮组织蛋白质组双向电泳技术,为后续的皮肤蛋白质组学研究奠定基础.方法:组织匀浆法制备表皮组织总蛋白,采用固相pH 梯度胶条进行双向电泳,凝胶银染后用PDQuest 7.4软件对电泳图谱进行分析.结果:人表皮组织蛋白质组在7cm pH 5～8 IPG胶条的最佳上样量为200 靏,平均蛋白斑点数为414±19,平均匹配斑点数为346±31,匹配率达83.6%.结论:通过优化双向电泳条件,获得了分辨率高、重复性好的人表皮组织蛋白质组双向电泳图谱.     

缺铁逆境胁迫下水稻叶蛋白质组的双向电泳分析

水稻幼苗经缺铁胁迫诱导处理1、3、5d后，用酚法和TCA／丙酮法提取叶的可溶性蛋白，进行双向电泳(2-DE)分析．结果显示：(1)三种缺铁胁迫的可溶性蛋白，在不同的pH范围中2-DE图谱上的比较．使用pH3～10宽范围、线性(L)的IPG胶条，经电泳分离后利用Z3图象分析软件，可在SDS-PAGE凝胶上检测到450个左右的蛋白点，酸性蛋白占89％．选用pH4～7窄范围、线性(L)的IPG胶条，经电泳后可在SDS-PAGE凝胶上检测到600个左右的蛋白点，其中缺铁诱导上调表达的有29个点，减弱表达的有1个点，诱导特异表达的有5个点．(2)不同方法提取可溶性蛋白的差异．酚法提取的蛋白再溶性好，纯度较高．TCA／丙酮法简单易操作，蛋白损耗少，在2-DE图象上．碱性端显示的蛋白点较多，但此法的缺点是再溶性差，对2-DE成功分离蛋白有影响．     

东亚飞蝗消化系统蛋白质组双向电泳的分析

为了优化东亚飞蝗消化系统双向电泳技术,建立东亚飞蝗消化系统蛋白表达图谱,探讨雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分的差异,利用pH值为3~10和pH值为4~7的胶条分别对雌、雄东亚飞蝗消化系统进行双向电泳分析,进行蛋白组学分析.研究结果发现:雌性东亚飞蝗消化系统蛋白种类多于雄性,雌性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中偏酸性蛋白数量与偏碱性蛋白相当,而雄性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中酸性蛋白多于碱性蛋白.在雌、雄东亚飞蝗消化系统相匹配蛋白中,含量差异达3倍以上的蛋白约占总匹配蛋白的50;.可见,雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分存在差异.     

华溪蟹主要组织蛋白质双向电泳技术体系的建立

为深入研究重金属胁迫下华溪蟹主要组织蛋白质的差异表达,对华溪蟹心脏及鳃总蛋白质的双向电泳技术体系进行了初步探讨.通过对样品处理方法、上样量大小以及双向电泳实验条件的比较选择,初步建立了适用于华溪蟹组织蛋白质组分析的双向电泳技术体系.结果表明:选取pH 3～10的24cmIPG胶条,上样量1.0mg,得到了较为理想的华溪蟹心脏及鳃双向电泳图谱;分离到的心脏蛋白质多集中于pH 5.5～9,而鳃蛋白质多集中于pH 4～7.     

Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice （Oryza sativa L. ） by Two-Dimensional Electrophoresis

For searching out male sterility-related proteins (polypeptides) in rice (Oryza sativa L.), we examined the difference of panicle protein (polypeptides) between hybrid rice (Wujin2A/R168, Wujin5A/R988) and their parents (male-sterile line Wujin2A, Wujin5A, and restorer line R168, R988) at the formation stage of pollen mother cell by two-dimensional electrophoresis (2-DE). The results revealed that the 2-DE polypeptide maps were similar among these experimental materials. A small group of polypeptides were disappeared in 2-DE polypeptide maps of male-sterile line (Wujin2A, Wujin5A) by comparing to restorer line (R168, R988) and the first filial (F₁) generation (Wujin2A/R168, Wujin5A/R988). The isoelectric points of these polypeptides were pI 5.8–6.5 molecular, weight 42.7×10³−66.2×10³. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China (30340079) and the Science and Technology Key Research Foundation of the Education Ministry of China (03109) Biography: HU Yao-jun (1960-), male Ph. D candidate, research direction: molecular cytogenetics.     

Comparison study on water use efficiency of wheat flag leaf

wild species and cultivars were planted under irrigated and dryland field condition. LCA\|3 model photosynthesis apparatus was employed to measure flag leaf WUE. The results show that WUE of diploid and tetraploid increases as the wild species became cultivated species. WUE of flag leaf increases as the chromosome ploid increases (2\%n\%→4\%n\%→6\%n\%) in the wheat evolution. Among modern cultivars, WUE of most irrigated varieties is higher than that of dryland varieties.     

利用双向电泳-质谱技术鉴定牦牛和犏牛睾丸中的差异表达蛋白质

比较了牦牛和犏牛睾丸组织中蛋白质的表达差异;应用双向电泳-质谱技术,对牦牛和犏牛的睾丸组织中差异蛋白质进行分离和鉴定;对获得的22个差异表达点进行质谱鉴定和数据库搜索,获得了19个蛋白质,其中有3种分子伴侣可能与犏牛雄性不育有关;研究结果表明,牦牛和犏牛睾丸组织中存在差异表达蛋白,并可利用双向凝胶电泳进行分离,为进一步分析犏牛雄性不育的原因提供了线索.     

小鼠肝组织可溶性蛋白质双向电泳条件的建立

研究的主要目的是建立小鼠肝组织可溶性蛋白质组的双向电泳技术,以等点聚焦为第一向,垂直SDS-PAGE为第二向进行双向电泳,并对样品处理方式、蛋白上样量、凝胶浓度和染色方法等关键因素和环节进行了比较研究,通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。采取的方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步实验打下良好基础。     

水稻光温敏不育系培矮64s二倍体与四倍体颖花性状和剑叶性状的比较

对水稻光温敏不育系培矮64s二倍体和四倍体的颖花和剑叶性状进行了比较研究。结果表明，培矮64s四倍体的颖壳长、颖壳宽、花药长、花药宽、柱头长、柱头宽和剑叶夹角等性状都较二倍体显增大；剑叶长和剑叶宽显减小。相关分析表明，倍性对性状间相关性的影响主要表现在量上，即影响相关性的程度，对相关性的性质影响较小。     

影响双向电泳分离效果的若干实验条件比较研究

对第一向为载体两性电解质pH梯度等电聚焦双向电泳(ISO-DALT)中若干影响分离效果的实验条件进行了研究.结果发现,琼脂糖和尿素的纯度明显影响分离效果;加丙烯酰胺或碘乙酰胺保护经二硫苏糖醇还原的样品中的巯基,可以显著减少假斑点;厚度较薄的分离胶的分离效果较好;以琼脂糖为两性电解质载体代替聚丙烯酰胺的第一向等电聚焦电泳使分子量105Da以上蛋白质得以分离.     

黒腹果蝇黑条体突变型蛋白质组分析中二维凝胶电泳技术的改进

用黒腹果蝇黑条体突变型为材料,介绍一种改进的蛋白质组分析中的二维凝胶电泳技术。该方法在电解质的配比以及银染过程等方面对传统的二维凝胶电泳技术加以了改进,不仅缩短了实验时间,减轻了实验工作量,而且得到了更好的实验效果;并且该方法对实验条件要求不高,在普通的实验室条件下即可被运用。     

中国两性生殖卤虫早期胚胎发育蛋白的双向电泳条件优化

采用双向电泳技术对中国卤虫胚胎发育到5 h时的蛋白组进行研究与分析.考察不同条件对双向电泳结果的影响,分别从上样量、染色方法、分离胶浓度等3方面进行研究.实验结果显示上样量为400 μg时图谱的斑点数较多;采用银染法所得实验结果优于考染;同时分离胶浓度为10%时所得蛋白斑点数较多.优化的实验条件为进一步研究中国卤虫蛋白组奠定基础.