LPB—ELISA对新生牛血清中口蹄疫抗体的检测

口蹄疫是由于口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性和可快速远距离传播的动物疫病,被国际畜疫局(OIE)列为A类传染病之首.为了掌握新生牛血清中口蹄疫抗体的情况,从而为口蹄疫疫苗企业提供不含该抗体的优质新生牛血清.本试验采用液相阻断酶联免疫(LPB-ELISA)方法对20个批号新生牛血清样品中口蹄疫O型和亚洲I型抗体进行了检测,其中O型病毒抗原对照平均D492nm值50%值(临界值)为0.432;亚洲I型病毒抗原对照平均D492nm值50%(临界值)为0.897;20个新生牛血清样品亚洲I型和O型的D492nm值均大于临界值,表明各样品均显阴性,来自没有感染口蹄疫病毒或没有接种疫苗的动物.     

改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较

通过采用考马斯亮蓝法(Bradford)和改良Lowry法,对O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白浓度测定结果的比较表明,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量.     

琼脂微球偶联氨基化合物及其效果分析

琼脂微球表面偶联了氨基这一易被氧化的亲和性基团,制备了对口蹄疫病毒抗原的亲和作用。以琼脂微球为基质,通过正交试验筛选、凯氏定氮法测定,选取最优偶联条件下的琼脂微球介质,用其亲和吸附口蹄疫病毒灭活抗原,检测其亲和吸附效果。结果显示:琼脂微球15g,环氧氯丙烷15mL,3 M NaOH 30mL,40℃活化反应3.5h;6mL苯乙胺,2M NaOH 20mL,50℃偶联反应2.5h。该条件偶联后的含氮量是0.4486%,得到的该介质对口蹄疫灭活病毒抗原的层析效果和某生产疫苗的药厂的分离纯化效果相似,表明该自制介质对分离纯化口蹄疫灭活病毒抗原具有一定的应用潜力。     

抗FMDV基因疫苗的研究进展

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的猪、牛、羊等偶蹄动物一种高接触性传染病.口蹄疫一旦爆发和流行,会使家畜生产性能降低,给养殖户造成重大损失,给公共卫生造成重大的影响.随着弱毒苗禁用和灭活苗的减少使用,新型疫苗的研究成为热点.自1990年首次出现基因疫苗的研究报道之后,基因疫苗已经成为疫苗研究领域中的一大热点,因此该文对近年来国内外口蹄疫基因疫苗研究的主要进展进行综述.     

细胞凋亡与病毒感染

病毒感染细胞后通过其自身基因的表达或激活宿主细胞凋亡相关基因,启动或抑制细胞凋亡.研究病毒与细胞的相互关系,有助于深入理解病毒的致病机理,为病毒性疾病的预防、治疗和诊断提供相应对策.     

慢病毒介导的RNA干扰抑制白血病细胞增殖的应用

通过慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术,沉默成人T细胞白血病(ATL)中关键的病毒基因HBZ,并研究RNA干扰后对白血病细胞增殖的影响.首先根据HBZ基因序列设计RNA干扰片段,构建其慢病毒载体,并将其包装成病毒.然后用HBZ siRNA慢病毒感染白血病细胞株TL-Om1,通过RT-PCR和Western blot检测HBZ基因和蛋白表达情况,MTT技术检测沉默HBZ后TL-Om1细胞的增殖情况,利用RT-PCR检测病毒感染后下游生长相关基因的表达.实验结果表明:利用慢病毒介导的RNA干扰技术能有效降低HBZ的表达,进而抑制了白血病细胞的增殖;沉默HBZ后,细胞内E2F1,PCNA和Myc等下游生长相关基因的表达受到了明显抑制.这将为慢病毒介导的RNA干扰技术应用于临床治疗成人T细胞白血病提供重要的实验依据.     

BHK21细胞悬浮培养的驯化和质量评价

目的:将贴壁培养型BHK21细胞驯化成适合口蹄疫疫苗生产的无血清全悬浮培养型细胞.方法:引进贴壁培养型BHK21细胞,通过改变培养液和降低血清的方法进行悬浮培养的驯化,对驯化得到的悬浮培养型细胞进行生物学检定.结果:引进的BHK21细胞低血清驯化培养22代可悬浮生长,用无血清培养基培养10代后形态趋于稳定生长变快.贴壁和悬浮细胞均有致瘤性,对口蹄疫病毒敏感,适应生物反应器高密度培养,且没有外源物污染.结论:驯化的BHK21细胞可用于口蹄疫疫苗的研究和生产.     

猪口蹄疫的症状和防治方法

猪口蹄疫是一种人畜共患病。口蹄疫俗称"口疮"",蹄癀",是偶蹄兽发生的一种急性、热性、高度接触性传染病。其病原体是微核糖核酸病毒科中的口蹄疫病毒属,此病毒不怕干燥,怕热不怕冷,在低温下(-70℃)十分稳定,可存活10年,在37℃下,48小时内就可灭活,在80℃～120℃病毒则立即死亡。     

口蹄疫病毒持续感染的研究进展

口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)能引起偶蹄动物患一种名为口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)的高度接触性、发热性、急性的传染病.FMD的大规模爆发会导致整个国家或地区的动物和动物相关制品产量降低、贸易受限,造成巨大的经济损失.FMDV持续感染是造成FMDV容易蔓延并难以根除的重要原因.该文综述了FMDV持续感染期间病毒在体内的存在位置与感染特性,并以病毒与宿主细胞、宿主免疫系统之间的相互作用为重点,介绍了持续感染相关机制研究进展,总结了疫情防控相关策略,以期为解决FMDV持续感染问题提供参考.     

含T细胞表位和B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应

用FMDV疫苗免疫接种是预防口蹄疫的主要手段之一 .研制既含B细胞表位又含T细胞表位的基因工程疫苗对口蹄疫的防治具有更强的保护能力 .用化学方法合成O型口蹄疫病毒 (FMDV)外壳蛋白VP1中 2 1～ 40位肽段的T细胞表位基因 ,与 1 41～ 1 60肽段的B细胞表位基因串联后 ,与 β 半乳糖苷酶基因相连 ,构建成一重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达出融合蛋白疫苗 .动物实验表明 ,该疫苗不仅能诱导豚鼠产生滴度很高的中和抗体 ,而且产生大量对病毒专一性T细胞 ,与不含 2 1～ 40肽段的疫苗相比 ,用该疫苗免疫的豚鼠血单个核细胞对FMDV的反应性提高 7倍以上 ,并能抵抗病毒攻击 .说明该疫苗可同时激活体液免疫及细胞免疫反应 ,有较强的保护作用 .     

科技掠影

·什么是口蹄疫? 口蹄疫是在牛、羊和猪等偶蹄类动物中传播的一种急性病毒传染病,传染性极强。国际上把口蹄疫作为重点防范的牲畜传染病之一。 ·患口蹄疫的家畜病发症状是什么?     

甲病毒诊断方法的研究进展

甲病毒是一类以蚊虫等吸血节肢动物为传播媒介,引起人畜疾病的重要病原体.随着全球气候和生态环境的改变,近几年许多甲病毒病呈现渐盛的状况.据病毒种类和宿主不同,引起疾病的症状也不同,一些发热原因不明的患者也往往与该类病毒感染有关,因此对甲病毒感染的早期诊断技术研究具有重要的意义.目前,甲病毒的诊断主要依靠病毒分离、血清学和分子生物学等诊断方法,文章就近年来国内外甲病毒诊断方法的最新研究进展作一综述.     

口蹄疫疫苗

<正> 1、口蹄疫的现状和予防注射本病由口蹄疫病毒引起,主要是偶蹄动物的急性、热性传染病。在家畜传染病予防法上为法定传染病。死亡率虽低,但传染力极强,随风能很快传播,易感动物种类很多,加上病毒有多种型及亚型,一旦传入不易扑灭,所以在国际上也视为重要的疫病。口蹄疫病发生于世界各地,现在亚州、非州、南美、欧州各国也都可见到流行。     

Linux环境下ELF文件型病毒的分析

分析了Linux系统下ELF文件格式病毒感染的机制.通过实现一个病毒原型,研究了ELF文件型病毒感染和传播的关键技术.最后,提出了对这一类病毒检测与防范的方法及策略.     

《分子病毒学原理》

本书以简明、清晰、图文并茂的风格论述现代病毒学．内容包括：病毒基础知识、病毒颗粒形态、病毒基因组、病毒复制、基因表达、病毒感染、病理机制、亚病毒介质等．书后附有词汇和缩写、亚病毒感染剂的分类、病毒学历史等．     

家畜口蹄疫新型疫苗研制与生产工艺创新2014年度报告

<正>在研制的口蹄疫新型疫苗有10多种,分别是纳米微球黏膜免疫疫苗,表位肽疫苗、口蹄疫O型复合表位蛋白疫苗、A型重组毒株(Re-A/WH/2009)的口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型三价灭活疫苗、猪口蹄疫O型广谱基因工程病毒灭活疫苗、口蹄疫O型标记疫苗、猪O型Mya98毒株空衣壳疫苗、猪口蹄疫O型合成肽疫苗(多肽2600+2700+2800)、牛口蹄疫(O型、Asia1型)二价合成肽疫苗、以及口蹄疫病毒活载体疫苗。其中取得突破性进展的有5种,牛口蹄疫(O型、Asia1型)二价合成肽疫苗PD50值大于6.0,免疫持续期为6个月,保存期为12个月,已完成所有实验室研究和临床试验,申请了新兽药注册并已通过初审;猪口蹄疫O型合成肽疫苗(多肽2600+2700+2800)PD50值大于6.0,免疫持续期为6个月,保存期为12个月,已完成所有实验室研究和临床试验,现已申请新兽药注册并通过复核试验和复审;含A型重组毒株(Re-A/WH/2009)的口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型三价灭活疫苗PD50值大于6.0,免疫持续期为6个月,保存期为12个月,获得了农业部新兽药注册证书,实现了产业化;猪口蹄疫O型广谱基因工程病毒灭活疫苗已申报农业部临床试验批文;口蹄疫O型标记疫苗已完成疫苗质量研究,并已申请新兽药注册。其他疫苗研究也均取得了程度不等的进展。利用反向遗传操作技术平台,获得基因工程修饰病毒疫苗株5株:(1)r V-STN-5;(2)9O/r V-1;(3)Re-A/WH/2009;(4)Re-Mya/98/BY/2010;(5)Re-Asia1/HN/2006。利用基因克隆、重组等技术,获得其他基因工程修饰病毒9株,分别为:(1)表达O型FMDV不同亚型主要免疫原性基因的重组伪狂犬病毒1株;(2)共表达O-A-Asia1型FMDV主要免疫原性基因的重组伪狂犬病毒1株;(3)表达FMDV免疫原性基因的杆状病毒2株;(4)表达猪源IFN-α/IFN-γ和A型FMDV P1基因的重组杆状病毒3株;(5)表达口蹄疫和小反刍兽疫病毒主要保护性抗原基因的重组羊痘病毒2株。成功研制Cp G-IFN、Cp G-IL4以及多磷腈和Cp G DNA等生物复合佐剂3种,纳米乳油佐剂、纳米粒IL-2佐剂以及多孔硅和上转换荧光纳米材料的载药系统等纳米复合佐剂材料4种,以及IL-2、IL-4和IFN-γ等多种哺乳动物细胞表达质粒和多糖类免疫增强剂4种。     

计算机病毒探讨和对它的防范措施

计算机已普及应用于人们的工作、学习和生活各个领域.人们正确掌握了计算机病毒的特点和表现形式,且了解了计算机被病毒感染后的症状反映,就可以从某种角度来采取对病毒的扼制并可以全面地采取防范措施.     

一类具有慢型病毒感染率的病毒动力学模型的稳定性

基于基本病毒动力学模型,构建了一类具有慢型病毒感染项的病毒动力学模型,并研究了病毒消亡平衡点和病毒幸存平衡点的全局稳定性,数值模拟验证了该理论的正确性.     

什么是口蹄疫

口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是一种以病毒为载体、来势凶猛、传播性极强的疾病,被国际兽疫局列为A类家畜传染病之首.     

MS2介导的口蹄疫类病毒颗粒疫苗的研究

研究表明,口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的VP1蛋白含有关键的抗原决定簇.根据O/HL-JOC12/03猪源FMDV毒株VP1上第141～160位氨基酸序列设计引物,利用重叠延伸PCR(SOE PCR)技术将该序列插入在大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体MS2外壳蛋白基因的特定位点.然后连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组表达质粒28a-CP-VP1,转化BL21(DE3),ITPG诱导表达得到融合表达的CP-VP1.透射电子显微镜下观察融合蛋白CP-VP1成类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)状.间接ELISA实验证实该蛋白能够特异地结合豚鼠抗O型FM-DV的阳性血清,30μg的CP-VP1的VLPs蛋白免疫小鼠后可以诱导其产生高效价的特异抗体.故该口蹄疫病毒抗原决定簇展示在噬菌体MS2上表面的VLPs蛋白具有开发成口蹄疫疫苗的前景.