王瓜根抗癌糖蛋白的生理生化特征及其对肺腺癌细胞杀伤作用初步研究

经电泳分析,王瓜根活性蛋白可分为两种:其一是酸性蛋白,具细胞毒作用,等电点测定 P~I 为3.2,PAGE 电泳测定分子量为6.76×10~4道尔顿;其二是碱性蛋白,等电点为9.3,PAGE 电泳测定分子量为1.58×10~4道尔顿;微具细胞毒作用。王瓜根活性蛋白属糖蛋白,经纸层析和薄层硅胶 H 层析证实含半乳糖和木糖。扫描电镜观察和光镜连续观察,显示酸性蛋白对肺腺癌细胞的体外培齐有杀伤作用,当培养液含120μg/ml 时杀伤率达58%,对正常肺细胞作用弱;碱性蛋白对肺腺癌细胞杀伤作用较差,在同样剂量时只有47.6%杀伤率。新鲜王瓜根原汁有很强的杀伤肺腺癌细胞作用,剂量在26g/ml 时,杀伤率达60%;当提高到105g/ml 时,杀伤率达74%。试验结果提示:王瓜根活性抗癌物质,除指三萜—葫芦素之外,可能还存在另一种活性物质。这种活性抗癌物质对肺腺癌细胞表面微绒毛无作用,经处理24小时后,癌细胞开始变形,表现为不同程度内陷,32小时癌细胞膜开始溶解,48小时癌细胞溶成团块。     

红芪水提物抗炎作用的动物实验研究

探讨红芪水提取物（Radix hedysari water extract, RHWE）对小白鼠的体外抗炎活性。选取体重20~28 g SPF级Balb/c小白鼠100只,通过小白鼠腹股沟棉球肉芽肿增生抑制试验和二甲苯致小白鼠急性耳肿胀试验检测红芪提取物抗炎效果,将小白鼠急性耳肿胀试验打下的耳片制作石蜡切片,观察其形态学变化。红芪提取物高、中、低浓度组对小白鼠腹股沟棉球肉芽肿增生抑制率分别是18.63%、15.69%和6.87%;红芪提取物高、中、低浓度组对小白鼠急性耳肿胀抑制率分别是27.90%、5.58%和2.05%;病理切片观察显示,红芪提取物低浓度组和阴性对照组弹性软骨和皮肤层之间空隙明显,真皮层内组织结构散布存在,中高浓度组耳组织相对完整,未见明显炎症反应。研究表明,红芪提取物具有一定的抗炎活性,且其抗炎活性在一定范围内与浓度呈正相关。     

米非司酮对JAR细胞凋亡的诱导作用

米非司酮是一类抗孕激素和抗糖皮质激素药物,在临床被广泛用于早孕的终止．发现米非司酮能抑制人滋养层瘤细胞（ＪＡＲ）的生长．药物处理使细胞形态出现典型的凋亡特征．被处理细胞的ＤＮＡ经琼脂糖电泳呈凋亡细胞特有的云梯状条带．原位凋亡检测也证实了凋亡细胞的存在．临床样品分析证明,米非司酮药物流产的人绒毛组织也发生了明显的细胞凋亡．说明米非司酮诱导流产的机制除了对子宫蜕膜的作用外,还可能与诱导滋养层细胞凋亡有关     

S100A10基因在小鼠子宫中的表达及性激素对其表达的调节

S100A10是S100钙结合蛋白家族成员之一,是一种钙依赖性的信号通路的介导分子,近年来有研究表明,它在胚胎植入位点有明显的高表达.文中采用半定量RT-PCR和原位杂交方法,研究了S100A10基因在小鼠中的组织特异性表达,在妊娠初始期胚胎植入位点、妊娠期子宫和正常动情周期子宫中的表达及其受性类固醇激素的调节.观察发现:S100A10基因在小鼠多种组织中都有表达,在卵巢、子宫、睾丸及附睾等一些生殖器官中表达水平尤为高;在妊娠第4天,子宫中S100A10基因表达明显上调,且在子宫内膜植入位点处有非常显著的高表达,其mRNA分布于对系膜侧的腔上皮细胞和功能层的基质细胞,且基质细胞中的信号强于腔上皮细胞,而非植入位点呈现极其微弱的表达;从妊娠第5天直到分娩第1天子宫内都维持恒定的S100A10表达;正常动情周期中,S100A10基因在动情前期和动情期子宫中表达明显上调;卵巢切除模型显示雌激素显著上调S100A10基因的表达,孕激素下调其表达.以上结果提示S100A10可能具有抑制胚胎植入位点腔上皮细胞的过度凋亡和促进基质细胞的增殖与蜕膜化的作用以及参与子宫应激反应过程.     

S100A10基因在小鼠子宫中的表达及性激素对其表达的调节

S100A10是S100钙结合蛋白家族成员之一，是一种钙依赖性的信号通路的介导分子，近年来有研究表明，它在胚胎植入位点有明显的高表达.文中采用半定量RTPCR和原位杂交方法，研究了S100A10基因在小鼠中的组织特异性表达，在妊娠初始期胚胎植入位点、妊娠期子宫和正常动情周期子宫中的表达及其受性类固醇激素的调节.观察发现：S100A10基因在小鼠多种组织中都有表达，在卵巢、子宫、睾丸及附睾等一些生殖器官中表达水平尤为高；在妊娠第4天，子宫中S100A10基因表达明显上调，且在子宫内膜植入位点处有非常显著的高表达，其mRNA分布于对系膜侧的腔上皮细胞和功能层的基质细胞，且基质细胞中的信号强于腔上皮细胞，而非植入位点呈现极其微弱的表达；从妊娠第5天直到分娩第1天子宫内都维持恒定的S100A10表达；正常动情周期中，S100A10基因在动情前期和动情期子宫中表达明显上调；卵巢切除模型显示雌激素显著上调S100A10基因的表达，孕激素下调其表达.以上结果提示S100A10可能具有抑制胚胎植入位点腔上皮细胞的过度凋亡和促进基质细胞的增殖与蜕膜化的作用以及参与子宫应激反应过程.     

假单胞菌中抗汞质粒pBH33的分离与鉴定

从污染环境中分离出一株抗100μM HgCl_2的假单胞菌B-33.经试验证实,假单胞菌B-33具有汞盐抗性质粒,定名为pBH33质粒,其分子量约为7.24×10~6道尔顿.     

猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)有效抗原的分离纯化及其免疫学性质

一、用0。05M、PH7.5磷酸缓冲液抽提 C43—5猪丹毒菌株丙酮粉,用 DEAE—纤维素柱层析分离抽提液,得到 A、B 两个峰。二、将 A、B 两峰的冻干粉用去离子水配成一定浓度后,分别同马抗猪丹毒高度免疫血清起反应,结果均有沉淀线出现,表明 A、B 两峰所包含的组分具有血清学活性。但用小白鼠作保护性试验,组分 A 无免疫原性,对小白鼠的保护率为零,面组分 B 有免疫原性,对小白鼠的保护率为100%。三、用 Sephadex G—100层析组分 B,在层离曲线上出现Ⅰ、Ⅱ两峰,两峰所包含的组分具有血清学活性。用主动免疫法对小白鼠作免疫原性检定,结果峰Ⅰ组分的保护率为90%,峰Ⅱ组分的保护率为零。四、用圆盘电泳分析,峰Ⅰ呈三条区带,峰Ⅱ呈两条区带。峰Ⅱ两条区带的电泳迁移率与峰Ⅰ三条区带中的两条相同。峰Ⅰ中有一条迁率较慢的为峰Ⅱ所没有。五、实验结果证明固体培养的 C43—5猪丹毒杆菌的有效抗原存在于 SephadexG—200分子筛层析的Ⅰ峰,即圆盘电泳中泳动较慢的大分子组分.其分子量大于200,000。     

乌梅中化合物V对鸡大肠杆菌的体内和体外杀灭作用研究

通过现代色谱方法应用硅胶、SephadexLH-20凝胶等材料分离了乌梅活性成分;应用波谱方法解析化合物结构,以体外试管倍比稀释法测最小抑菌浓度、体内试验评价防治鸡大肠杆菌病的潜在价值,对乌梅中提取化合物V的抗鸡大肠杆菌活性进行了初步评价。结果表明,以抗大肠杆菌活性为导向,从中药乌梅中分离得到一个单体成分,3-羟基-3-羧基戊二酸二甲酯(化合物V),体外试验显示化合物V的最小抑菌浓度为3.125mg/mL;体内试验显示肉鸡人工感染大肠杆菌后,胶膏、化合物V组、硫酸新霉素组、阴性感染对照组成活率分别为40%,60%,60%和20%;剖检后无菌取肝脏组织培养,以上各测试组大肠杆菌检出率分别为100%,80%,100%和100%。由此得出结论:通过体内、体外试验证明化合物V对肉鸡大肠杆菌病具有一定的预防效果。     

黑豆中抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定

利用硫酸铵分级沉降、亲和色谱Affi-gel和离子交换色谱SP-Toyopearl从黑豆种子中分离出一种抗菌蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白迁移率与分子量对数的关系,计算出该抗菌蛋白的分子量为93.3 kDa,还原和非还原状态下均显示单一区带,说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白.抑菌试验结果表明,此纯化的蛋白对植物致病菌瓜果腐霉病菌、棉花枯萎病菌、苹果轮纹病菌、葡萄灰霉病菌和菜豆根腐病菌等5种真菌的生长具有不同的抑制作用.     

野生山葡多酚对高脂血症小鼠脂代谢的影响及抗氧化作用研究

目的研究野生山葡多酚对脂代谢的影响及抗脂质过氧化作用.方法观察不同浓度野生山葡多酚对高脂血症小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及脂质过氧化(LPO)水平的影响.结果野生山葡多酚200 mg/(kg·d-1)×56 d组小鼠血清TG,TC,LPO含量明显低于高脂饲料组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),而野生山葡多酚100 mg/(kg·d-1)×56 d组小鼠血清HDL-C含量显著高于高脂饲料组(P＜0.01),动脉硬化指标(AI)显著低于高脂饲料组(P＜0.01).结论野生山葡多酚具有显著降低血脂含量和抗脂质过氧化作用.提示野生山葡多酚具有防治动脉硬化作用.     

衣物柔顺剂对孕鼠和胎鼠的毒性

探讨衣物柔顺剂对孕鼠受孕及其胎鼠的发育的影响。以灌胃的方式给予在孕期雌性小鼠不同剂量的衣物柔顺剂稀释液(1000,500,100mg/kg)。观察孕鼠受孕及胚胎发育情况。结果发现,在试验期间,小鼠的体重随着衣物柔顺剂剂量增加有降低的趋势。高剂量组、中剂量组的活胎率低于对照组。实验组胎鼠的身长、尾长和体重等发育指标均有显著的降低。结果表明衣物柔顺剂对孕鼠受孕及胎鼠的发育具有毒性。     

聚天冬氨酸钙的毒性及血清半衰期初探

目的:对聚天冬氨酸钙进行初步毒理生物利用度的检测.方法:通过灌胃造成急性毒性确定半数致死量(LD50),并对小鼠蓄积毒性、骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验和血清半衰期进行了研究.结果:受试物对小鼠的LD50大于5 000 mg/kg,属于无毒.以蓄积毒性剂量500 mg/kg连续灌胃给药20 d后,小鼠的体重和心、肝、脾、肺、肾、肠胃等器官在形状、大小、颜色等指标上与阴性组对照无明显差异.分别以500、800、1 000 mg/kg的剂量对小鼠连续灌胃2 d,PCE微核率分别为4.8±0.87‰、5.4±0.99‰、5.6±1.05‰,与阴性对照组比较无显著性差异.相同剂量灌胃后小鼠血清中药峰值出现时间为120、140和150 min,血清半衰期时间分别为:160、200和220 min,长于天冬氨酸钙的药峰值时间(20、30和40 min)和半衰期(均为50 min).结论:聚天冬氨酸钙属于无毒,其吸收和代谢相对缓慢,药效持续时间较长.     

三甲胺(TMA)的毒性研究

用大鼠和小鼠以霍恩法测定了三甲胺的急性经口LD50,并以蓄积系数法测定其对小鼠的K值。观察并记录了急性中毒的症状。最后,以小鼠骨髓细胞染色体畸变分析法检测了单独摄入三甲胺和同时摄入亚硝酸钠的致突性。结果是大鼠经口LD50.1236mg/kg(雌),797mg/kg雄);小鼠经口LD50.908mg/kg(雌),704mg/kg(雄)。蓄积系数K>5(指标为小鼠死亡率)。小鼠骨髓细胞染色体畸变分析阴性。     

小白鼠动情周期及妊娠早期（1—6天）子宫雌激素受体含量的变化

本文实验初步证明,妊娠D_1天的小鼠子宫ER。含量稍高(142.4±42.1 fmol mg蛋白)。D、降至117.7±45.4fmol/mg蛋白。D_3和D_4分别上升到158.9±40.3fmol/mg蛋白及162.1±34.8fmol/mg蛋白.D_5降为137.7±52.7fmol/mg蛋白(P<0.01)。D_6急增至182.4±44.9fmol/mg蛋白(P<0.01),达到妊娠D_1～D_6的峰值,在动情周期中,前期ER(?)含量为188.6±49.2fmol/mg蛋白,动情期则降至109.7±47.1fmol/mg蛋白(P<0.01)。后期较低(106.6±28.4fmol/mg蛋白),间期又回升到163.5±41.2fmol/mg蛋白,反映了ER_c的规律性变化是受内源性雌激素周期性地调控的,妊娠D_1的小鼠子宫湿重较高(126.7±56.8mg).此后D_2～D_4呈下降趋势。D_5极显著地上升至138.0±29.4mg。D_6又急下降(P<0.01)。在动情周期中,小鼠子宫湿重从前期的67.6±36.5mg上升至动情期的124.2±72.4mg。后期降为74.1±57.3mg。间期则降至最低水平。     

聚焦声束超声终止猴早孕对生殖生理的影响

为了研究聚焦声束超声终止猴早孕后对猴生殖生理的影响 ,选择 5只早孕恒河猴经聚焦声束超声终止早孕后 ,观察月经恢复情况和性皮肤的情况 ,于月经复潮后两个周期用彩色多普勒超声检测子宫的大小、形状 ,以及邻近脏器有无损伤。结果发现 ,早孕恒河猴经聚焦声束超声终止早孕后 4 0d左右月经复潮 ,经量及经期长均属正常。彩色多普勒超声显示子宫大小、形态正常 ,子宫内膜线清晰可见 ,邻近脏器未见明显损伤。我们认为 ,聚焦声束超声终止猴早孕是安全的 ,对其生殖生理无影响 ,具有潜在的临床应用前聚焦声束超声终止猴早孕对生殖生理的影响@杜永洪…     

硝酸钐对雄性小鼠的急性毒性及精子质量的影响

通过灌胃口服方式,研究了硝酸钐对雄性小鼠的半数致死量(LD50),并探讨了不同染毒剂量下存活小鼠的脏器系数、精子质量的变化.结果表明:硝酸钐对雄性小鼠的LD50为3 393.56 mg/kg,LD50的95%可信限为3 175.50～3 626.60 mg/kg;小鼠染毒后体质量增加缓慢,肾脏脏器系数明显地低于对照组(P＜0.05);2 880.00mg/kg剂量组小鼠的脾脏脏器系数与对照组相比极显著增加(P＜0.01),且小鼠精子活力明显降低(P＜0.05).提示硝酸钐对雄性小鼠的毒性较低,但染毒后部分脏器有急性损伤,而且会降低小鼠的精子质量.     

盐酸洛美沙星盐水注射液急性毒性试验研究

目的：研究盐酸洛美沙星的急性毒性。方法：参照药理实验方法学的方法测定其ＬＤ５０,１００只昆明小鼠随机分为５组尾静脉注射给药,观测４８小时内每组小鼠死亡数。结果：盐酸洛美沙星雌性小鼠组,ＬＤ５０＝２５５．３ｍｇ／ｋｇ;雄性小鼠ＬＤ５０＝２５１．２ｍｇ／ｋｇ,与盐酸洛美沙星葡萄糖注射液相比（ＬＤ５０＝２６１．２ｍｇ／ｋｇ）无明显差异。结论：盐酸洛美沙星盐水注射液与其葡萄糖液类似。     

苦楝和杉木的种间化感作用研究

摘要：采用正交试验方法和超临界流体萃取法,研究了苦楝叶提取物对杉木的化感作用。生物检测结果显示,与酒精对照相比：萃取参数1、4和7等条件苦楝叶提取物对杉木种子绝对发芽率、绝对发芽势、胚根长、胚轴长、鲜重和干重等发芽指标均表现出不同程度的促进作用,萃取参数2和3等条件苦楝叶提取对除胚根和胚轴外的各发芽指标起促进作用,萃取参数5条件苦楝叶提取物对除鲜重和干重外的各发芽指标起促进作用,萃取参数6条件苦楝叶提取物对除胚根和鲜重外的各发芽指标起促进作用,而萃取参数8条件苦楝叶提取物仅对绝对发芽势起促进作用。同一参数条件三种浓度相比：萃取参数1、4、5和7条件下以100mg/kg浓度苦楝叶提取物处理的对杉木种子各发芽指标促进作用最明显,接着为50mg/kg或200mg/kg浓度处理的;萃取参数2和3条件下以200mg/kg浓度提取物处理的促进作用最强,接着为50mg/kg或100mg/kg浓度处理的。     

苦楝和杉木的种间化感作用研究

mg/kg浓度苦楝叶提取物处理的对杉木种子各发芽指标促进作用最明显,接着为50 mg/kg或200 mg/kg浓度处理的;萃取参数2和3条件下以200 mg/kg浓度提取物处理的促进作用最强,接着为50 mg/kg或100 mg/kg浓度处理的.     

大麻药生品和三种炮制品的急性毒性比较

为评价大麻药不同炮制品对小鼠的急性毒性反应,采用经典的急性毒性实验方法测定了生品、麸制品、姜制品和酒制品的小鼠口服半数致死量(LD50),观察小鼠急性毒性症状,记录其死亡率和体重变化.结果表明:大麻药生品和3种炮制品的LD50由大到小顺序为姜制品>麸制品>生品>酒制品,LD50值分别为17.93,16.77,12.11,9.45 g·kg-1.怠动、腹泻、心跳加速,唾液分泌增加是主要的急毒症状.故不同的炮制方法对大麻药的毒性影响较大,其毒性成分与中毒机理尚待进一步研究.