成纤维细胞生长因子23在慢性肾脏疾病血磷代谢中的作用

 成纤维细胞生长因子23(FGF23)是近年来发现的由骨细胞产生的一种激素,主要作用是抑制肾小管磷重吸收和1,25(OH)₂D循环水平。慢性肾脏疾病(CKD)是世界范围内影响数百万人的公共卫生疾病。FGF23循环水平升高导致的血磷稳态失调是CKD早期和普遍的并发症。本文综述FGF23家族结构、FGF23在调节磷和维生素D代谢中的作用及其合成和分泌的调控。重点介绍FGF23在CKD中与血钙、血磷及甲状旁腺激素(PTH)的作用机制,以及FGF23在评估CKD进展、预测预后中的作用。分析表明,FGF23可能成为慢性肾脏疾病骨和矿物质代谢中的重要诊断标志和治疗对象。     

成纤维细胞生长因子9的研究进展

成纤维细胞生长因子9（fibroblast growth factor 9,FGF 9）最初发现于人类神经胶质瘤细胞,是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,广泛分布于人体各种组织中,是一个在胚胎发育过程中以及成年后许多生物学功能所需的有效促进有丝分裂和细胞生长的因子。本文综述了FGF 9的基因特点以及研究现状。     

重组人成纤维细胞生长因子21对胡萝卜遗传转化的研究

人成纤维细胞生长因子21(FGF21)是肝脏合成的一种可分泌多肽,对糖脂代谢的调控具有重要作用。以胡萝卜(Daucus carota L.)七寸人参品种为试验材料,用含重组人成纤维细胞生长因子21(rh FGF21)质粒p1390RⅡ的根癌农杆菌LBA4404对胡萝卜进行了遗传转化实验。PCR扩增和Western blot结果表明外源基因FGF21已成功转入胡萝卜基因组中。此研究为今后用胡萝卜产业化表达生产FGF21提供参考。     

山羊FGF5基因cDNA分子克隆及序列分析

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,首次从山羊脑组织总RNA中扩增出成纤维细胞生长因子5(FGF 5)基因的cDNA编码序列.通过对序列的分析表明,克隆的山羊FGF 5cDNA编码序列与其他动物的序列具有高度的同源性.与G enbank中人和小鼠序列比较,山羊与人和小鼠的FGF 5核苷酸序列的同源性分别为91%和87%.编码的氨基酸序列比较,山羊和人的相似性为87%,山羊与小鼠的相似性为83%.如FGF s家族的其他成员一样,山羊的FGF 5蛋白也有一信号肽序列.山羊FGF 5基因外显子在编码氨基酸时,对同义密码子的使用表现有强烈的偏好性.不同物种对同义密码子使用的偏倚程度与偏好类型各不相同,也具有种属特异性.山羊FGF 5基因所编码的蛋白质中,20种氨基酸的含量差异很大,极性氨基酸含量高于非极性氨基酸含量.     

高密度培养大肠杆菌表达人角质细胞生长因子

角质细胞生长因子(KGF)是成纤维生长因子家族(FGF)成员,与上皮细胞增殖、组织胚胎发育、创伤修复等过程密切相关.在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆KGF基因,并进行诱导表达条件的优化.使用合成培养基,应用底物反馈流加策略将糖浓度控制在较低水平,在发酵罐中高密度培养,细胞干质量浓度可以达到46 g/L.发酵罐培养的大肠杆菌在对数生长期经过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在可溶性和不溶性产物中都得到了具有免疫学活性的GST-KGF融合蛋白,经过ELISA检测,发酵液中可溶性表达的KGF产率达到108μg/L.该研究为利用原核表达系统生产活性KGF建立了优化工艺,有利于将大规模生产用于创伤修复的KGF.     

蛹虫草改善糖尿病的分子机制

糖尿病是一种以高血糖为特征的慢性代谢性疾病,其致病因素复杂、发病率高、并发症多发,已成为我国重大的公共卫生问题。天然降糖活性物质的挖掘为突破糖尿病治疗瓶颈提供了新视角。蛹虫草是东南亚传统的食药两用真菌,富含虫草素、腺苷和多糖等天然降糖活性成分。针对糖尿病的发病机制及治疗现状,梳理蛹虫草在改善和治疗糖尿病方面的研究进展,研究显示,蛹虫草具有提高胰腺分泌功能、改善胰岛素抵抗、促进葡萄糖转运与代谢、修复糖尿病肾病等生物学功能,为糖尿病治疗提供了安全而有效的入手点。以后将更加系统地明确蛹虫草降糖作用的长效性、稳定性及网络调控机制,为其在糖尿病治疗领域的深入应用提供理论支撑。     

单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)调控机制的研究进展

代谢是细胞和有机体最基本、最重要的活动之一.细胞和有机体通过感应系统实时监测代谢过程中的物质和能量状态,并不断地通过错综复杂的代谢调控途径来维持其稳态.代谢调控一旦出现紊乱,机体代谢就会发生异变,从而导致如糖尿病、肥胖、心血管疾病乃至肿瘤等多种人类重大疾病的发生,并影响发育、生长、繁殖、衰老等生命过程.单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)作为在代谢调控中起核心作用的激酶,自其被发现以来一直是研究的热点.对AMPK调控机制的深入研究为揭示代谢性疾病的发生和发展机制、探索其治疗和预防的策略提供了重要的新思路.围绕近年来国内外AMPK研究领域取得的进展,重点阐述AMPK在体内的激活机制以及本课题组在该领域中的一系列重要成果.     

SIRT1基因的代谢与病理调节机制研究

脱乙酰酶(Sirtuin)是一个高度保守的脱乙酰基酶家族,作为细胞传感器检测能源供应并调节代谢过程。SIRT1是体内调节新陈代谢过程的重要脱乙酰酶,位于细胞核和胞浆,通过对靶蛋白的脱乙酰基作用调节其功能,维持细胞能量稳态,进而调节机体代谢。SIRT1调节通路的缺陷会导致各种代谢紊乱,因此,通过基因或药物手段激活脱乙酰酶可调节机体代谢,从而防止肥胖病、2型糖尿病和非酒精性脂肪肝等代谢性疾病。     

乳铁蛋白对口腔癌细胞中VEGF和bFGF表达的影响

目的探讨乳铁蛋白对口腔癌细胞中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响.方法选用人口腔鳞癌细胞系CAL-27,分为0.006,0.013,0.025,0.050 g/L重组人乳铁蛋白实验组和空白对照组.应用RT-PCR法检测VEGF和b FGF mRNA表达水平;应用Western Blot法检测VEGF和b FGF蛋白表达水平.结果 CAL-27口腔癌细胞VEGF和b FGF mRNA均随着乳铁蛋白浓度增加表达量逐渐减少;0.050 g/L乳铁蛋白实验组VEGF和b FGF mRNA表达量明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).CAL-27口腔癌细胞VEGF和b FGF蛋白产物随着乳铁蛋白浓度增加表达量逐渐减少;0.050 g/L乳铁蛋白实验组VEGF,b FGF蛋白表达量明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).结论乳铁蛋白可有效抑制口腔癌细胞系CAL-27细胞中VEGF,b FGF的转录和表达,进而抑制血管生成,可作为乳铁蛋白抗口腔癌的机制之一.     

中西医结合治疗非胰岛素依赖型糖尿

糖尿病是一组常见的内分泌—代谢性疾病,也是一种慢性、进行性、综合性疾病,不论是胰岛素依赖型糖尿病（/DDM）,还是非胰岛素依赖型糖尿病（N/DDM）,在发病过程中都表现发病程长,合并症多,病理变化多,难以治愈等特点。本文通过对非胰岛素依赖型糖尿病人的病例分析来探讨中西医结合治疗非胰岛素依赖型糖尿。     

骨质疏松患者FGF23与Crosslaps血清浓度检测与分析

目的:探讨骨质疏松症(Osteoporosis,OP)患者外周血成纤维生长因子23(Fibrobalst growth factor-23,FGF23)、Ⅰ互型胶原交联C末端肽(Crosslaps)与25-(OH)D代谢水平与骨质疏松症的关系.方法:选择骨质疏松女性患者32名,年龄48~90岁(OP组),与21名健康人年龄31~50岁(对照组).采用酶联免疫吸附法检测外周血FGF23,Crosslaps及25-(OH)D水平.采用全自动血液生化分析仪检测血钙、血清无机磷、碱性磷酸酶(Alkaline phosphates,ALP)水平,并对OP患者25-(OH)D与FGF23、Crosslaps、血钙、血磷的相关性进行分析.对53名受试者进行骨密度(Bone mineral density,BMD)测量及医学影像学检测.采集OP患者及健康人股骨骨样进行石蜡包埋、切片、HE染色并观察,采用病理学图像分析系统进行形态计量学分析.结果:与对照组比较,OP组患者血清中FGF23、Crosslaps水平显著升高(P0.05);OP患者血清中25-(OH)D水平与FGF23相关系数为-0.012 2,与Crosslaps相关系数为-0.231 7;通过骨组织形态计量学分析,OP患者骨小梁平均厚度、骨小梁面积百分率较对照组显著减少(P0.05),OP组骨小梁间距较对照组显著增大(P0.05).OP患者左侧股骨颈(Femeralneck,FN),Ward's三角(Ward's)骨密度值与对照组均有显著减少(P0.05).通过影像学检测发现OP组X光片透光度有所增加,骨小梁变细,骨皮质变薄.结论:骨质疏松症患者血清中FGF23,Crosslaps因子水平与25-(OH)D水平存在一定相关性.提示其在骨代谢所引起的血清水平变化,以及三者之间的关系可为骨质疏松症的诊断和治疗提供参考.     

代谢组学方法在糖尿病肾病研究中的应用

糖尿病肾病作为糖尿病最严重的并发症之一.近年来其发病率持续上升,严重危害糖尿病人生命健康.目前用于诊断和治疗糖尿病肾病的常规方法效果并不理想,而代谢组学方法可一次性对待测样品中多种代谢产物进行定性、定量、高灵敏度分析.利用气相/液相色谱、质谱学方法、气质/液质联用,以及核磁共振等方法检测糖尿病肾病潜在生物标志物已成为目前该领域的研究热点,其结果对糖尿病肾病的早期诊断、致病机理研究、疾病有效治疗具有重要意义.本文从代谢组学常用分析工具、数据分析方法及其在糖尿病肾病研究中的应用三个方面进行综述,旨在阐述近几年代谢组学方法在糖尿病肾病研究中的应用进展.由于相关仪器设备本身分析能力的局限性及数据分析方法不全面,目前代谢组学方法距离临床应用仍有一定距离,但是随着分析技术的不断发展与完善,可以预见代谢组学策略终将可以被应用于糖尿病肾病以及其他疾病的早期诊断并指导相关疾病的治疗.     

基于肠道菌群探讨中医药防治糖尿病肾病的研究进展

糖尿病(DM)是危害人类健康的常见慢性代谢性疾病,其发病率呈逐年上升趋势.DM的主要特征为高血糖,目前临床上还没有根治性疗法.DM的形成、发展常常伴有心脏、肾脏、周围神经组织、眼底结构等并发损害,其中糖尿病肾病(DN)尤为突出,需进行及时治疗.近年研究表明,肠道菌群与DN的发生发展密切相关,而中医药在DN的诊疗中也发挥着积极作用.文章就中药单体、中药复方以及中成药干预肠道菌群治疗DN的研究现状作一综述,以期为DN的防治开启新的方向.     

FGF23通过FGFR4激活TGF-β通路促进心肌梗死后肾脏纤维化

目的 心肌梗死(心梗)常伴肾功能下降,然而其病理基础仍不清楚。本研究探讨成纤维生长因子23(FGF23)在心肌梗死小鼠肾脏纤维化进程中的作用,并阐明其作用机制。方法 通过外科手术结扎小鼠心脏前降支构建心肌梗死模型,利用小鼠心脏超声检测心功能变化,ELISA测定小鼠血浆FGF23水平,马松三色染色观察评估肾脏纤维化程度,免疫组化检测肾脏FGF23、成纤维细胞生长因子受体4 (FGFR4)和Klotho蛋白的变化,Western blotting检测小鼠肾脏组织和细胞中FGF23、FGFR4、Collagen I、Vimentin和TGF-β等蛋白的变化。结果 心肌梗死明显上调血浆和肾脏FGF23蛋白水平(P<0.05),心肌梗死后肾脏纤维化明显增加(P<0.05),肾脏FGF23、FGFR4、Collagen I、Vimentin和TGF-β蛋白水平显著上调(P<0.05)。然而,肾脏Klotho水平明显下调(P<0.05)。正常大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中得到了类似的结果,FGFR4抑制剂(BLU9931)可以降低纤维化相关蛋白的表达(P<0.0...     

融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测

目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b FGF.CCK-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性.     

幼鼠正畸牙移动中牙周组织内b-FGF的动态变化

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（b—FGF）在幼年Wistar大鼠牙周组织内的表达与分布及其在正畸牙移动中的作用。方法：建立幼年Wistar大鼠正畸牙移动的模型,在不同牵引时间段用4％中性甲醛行升主动脉灌注固定、取材、脱钙、制作石蜡标本。应用SP免疫组织化学法和图象分析仪进行半定量分析。结果：正常大鼠牙周组织中b—FGF表达较低。实验组在1d组张力侧的成牙骨质细胞b—FGF表达高于对照组,10、14d组张力侧的成纤维细胞、成骨细胞b—FGF阳性着色较正常对照组及压力侧表达有显著性差异。玻璃样变区无b—FGF表达。结论：b—FGF参与了正畸牙移动过程中牙周组织的改建。     

核受体Rev-erbs的能量稳态调控作用及其运动科学研究展望

 核受体Rev-erbs是能量稳态调控的核心转录调节因子,其表达受饮食、药物、运动等因素的影响;Rev-erbs参与糖脂代谢、胰岛素分泌、血糖稳态调节等多个生物学过程,是肥胖症、糖尿病等慢性代谢性疾病治疗的重要药物靶标,通过调节糖脂代谢通路中的靶分子,调控组织的能量稳态。运动干预刺激肝脏、骨骼肌等组织中Rev-erbs表达,调控糖脂代谢基因,维持细胞能量稳态,可能是慢性病运动干预的重要适应机制。简述了Rev-erbs的结构特点、表达调控因素与作用机制,分析了运动干预对Rev-erbs表达的影响与代谢调控机制,以及Rev-erbs在运动科学领域的国际前沿和发展趋势。     

纹状体神经干细胞的分离培养及其鉴定

胎脑内存在有能分化为神经元和神经胶质细胞的神经干细胞 .在表皮生长因子 (EGF)或碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)存在的条件下 ,从 14d胎鼠纹状体分离培养神经干细胞 ,并通过间接免疫荧光细胞化学法对其鉴定 ,发现大量呈 Nestin抗原阳性的干细胞团的形成 ,EGF和 b FGF对神经干细胞的增殖及分化能产生一定的影响 ,但它们对增殖及分化的影响是有差别的 .     

乳岩内消霜外用对大鼠乳腺癌癌前病变组织VEGF、FGF2表达的影响

目的:观察乳岩内消霜外用对大鼠乳腺癌癌前病变模型乳腺组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)表达的影响,探寻乳岩内消霜治疗乳腺癌癌前病变的机制.方法:36只雌性未孕SD大鼠,随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组及乳岩内消霜质量分数分别为4 000、2 000、1 000 mg/g组.采用二甲基苯并蔥(DMBA)联合雌、孕激素诱导癌前病变大鼠模型,对乳房外用药物干预,第10周处死动物,进行组织病理学检测,Western blotting及免疫组化法检测乳腺组织中VEGF、FGF2的表达.结果:各药物干预组乳腺组织VEGF、FGF2的表达均明显低于疾病模型组(P0.05);Western blotting检测乳岩内消霜质量分数4 000 mg/g组VEGF表达低于乳岩内消霜质量分数2 000和1 000 mg/g组(P0.05);免疫组化检测乳岩内消霜质量分数4 000mg/g组FGF2表达低于乳岩内消霜质量分数1 000 mg/g组(P0.05).结论:乳岩内消霜外用能够有效下调VEGF、FGF2在乳腺癌癌前病变大鼠乳腺组织中的表达,可能通过抑制血管生成因子表达而防治乳腺癌的有效机制,具有量效关系.     

妙手回春 春满人间——访兰大二院干部内科主任何继瑞

兰大二院干部内科是以糖尿病，老年内分泌及代谢性疾病及心脑血管病诊治为重点临床科室，到目前为止，有医生9名，护理人员11名，其中博士1名、硕士4名，中高职人员4名，中、初级人员5名。著名内分泌及代谢性疾病专家倪安民主任医师是我省第一位医学博士，在本专业领域具有很深的造诣，擅长于糖尿病及代谢性骨病的诊治；