中国流行的马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）株系鉴定及其…

从河北、内蒙古、山西、黑龙江、福建等省区采集虎头、克疫、紫花白、同薯８号、克新１号、克新４号和克新６号、燕子以及米拉等不同栽培品种感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯样品中，制备ＰＳＴＶｄ粗提取物，以加拿大ＰＳＴＶｄ强毒株系（Ｓ－ＰＳＴＶｄ）和强毒株素（Ｍ－ＰＳＴＶｄ）作对照，采用往返式聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ｒ－ＰＡＧＥ）进行株系鉴定。结果表明，感染中国不同马铃薯品种ＰＳＴＶｄ的电泳迁移率均与加拿大Ｍ－ＰＳＴＶｄ     

用长臂光敏生物素标记的cDNA探针核酸斑点杂交检测马铃薯纺锤块茎类病毒

用长臂光敏生物素标记含有马铃薯纺锤块茎类病毒（Ｐｏｔａｔｏｓｐｉｎｄｌｅｔｕｂｅｒｖｉｒｏｉｄ，ＰＳＴＶｄ）双拷贝ｃＤＮＡ的重组质粒ｐＳＴ－Ｂ１４，制备成光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针，用核酸斑点杂交检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片和块茎提取物均出现较强的阳性杂交信号，而健康马铃薯为阴性．试验结果表明：光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片汁液最高稀释度为１１２８     

黑龙江省马铃薯纺锤块茎病的研究

利用在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒(pstvd)的纯毒源,在防虫的网棚(网绷纱要求100目)中,利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵,将毒源中加入0.1m磷酸缓冲液后将其研碎,接种在克新二号、克新三号、克新四号的植株上。该实验进行两次接种,第一次接种10天后,进行第二次接种,根据植株的外观表现——健康株、健康株生长势低于前者、轻束顶症株、重束顶症株。来判定接种纺锤块茎症毒后植株的发病情况,根据小区测产对比总结出马铃薯纺锤块茎类病毒对马铃薯产量影响的程度。使克新12号品种的减产率从27.20%~61.80%;使克新14号品种的减产率从17.40%~57.40%。     

生物素标记的PSTV互补DNA探针分子杂交的研究

用~(32)P标记的互补DNA探针进行分子杂交是基因重组和分子克隆中常用技术,然而由于~(32)P的半衰期短,从而为供应和保存带来不便,致使这一技术的应用受到一定限制。近年来国内外均十分重视研究应用非同位素标记DNA探针的技术。我们用Biotin—11—dUTP(Bethesda Research Laboratories)以缺口平移(Nick translation)标记了pST-B14和pST-B5 DNA中的PSTV cDNA插入顺序,制备出生物素标记的DNA     

中国流行的马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）株系鉴定及其对产量的影响

从河北、内蒙古、山西、黑龙江、福建等省区采集虎头、克疫、紫花白、同薯８号、克新１号、克新４号和克新６号、燕子以及米拉等不同栽培品种感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯样品中，制备ＰＳＴＶｄ粗提取物，以加拿大ＰＳＴＶｄ强毒株系（Ｓ－ＰＳＴＶｄ）和弱毒株系（Ｍ－ＰＳＴＶｄ）作对照，采用往返式聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ｒ－ＰＡＧＥ）进行株系鉴定．结果表明，感染中国不同马铃薯品种ＰＳＴＶｄ的电泳迁移率均与加拿大Ｍ－ＰＳＴＶｄ的迁移率相同．初步表明侵染中国马铃薯的ＰＳＴＶｄ主要是Ｍ－ＰＳＴＶｄ．用ＰＳＴＶｄ虎头分离物，采用针刺块茎幼芽和叶片摩擦接种方法，分别接种到无ＰＳＴＶｄ的健康虎头和克皮上．检测结果表明，在初感染和续发感染植株中，ＰＳＴＶｄ浓度分布有共同的规律，从顶部叶片、中部叶片到基部叶片中ＰＳＴＶｄ浓度依次逐渐减少．ＰＳＴＶｄ接种明显抑制了植株生长，并造成较大的产量损失．由不同品种初感植株收获的块茎，均有很高的ＰＳＴＶｄ感染率．     

一种适合本科教学实验的探针标记方法

分子杂交技术是分子生物学和基因工程研究、教学中常用的实验技术。常规方法存在成本高、效率低、安全性低等不足,需要发展高效、快速、低成本、安全、简捷的适合本科生教学的分子杂交方法。文章结合教学和科研实践,提出利用普通的Taq酶进行PCR探针标记的改进方法,结果发现该方法简便、效率高和成本低,非常适合本科生基因工程实验教学。     

核酸分子杂交检测黄瓜花叶病毒

为检测黄瓜花叶病毒的存在,应用Northernblot,将提取的黄瓜花叶病毒RNA样品,经甲醛变性凝胶电泳分离,使RNA解离成单链,然后用上行毛细管转移法,将凝胶上的单链RNA片段转移到尼龙膜上.经适当洗涤、干燥后,在烤箱中80℃保温2h,用于杂交.以带有黄瓜花叶病毒目的片段的细菌质粒制备DNA探针,用放射性同位素32P标记探针DNA,100℃变性处理用于杂交的探针,然后进行杂交.结果表明,在杂交膜上显示与特异性探针结合的阳性RNA条带,检测到了黄瓜花叶病毒的存在.     

Detection of PSTVd with a New Nonradioactive Method──Digoxigenin Labeled cDNA Probe

使用非放射性标记ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的１１－ｄＵＴＰ取代３２Ｐ标记的ｄＡＴＰ或ｄＣＴＰ进行核酸斑点杂交检测马铃薯纺锤块茎类病毒（ＰＳＴＶｄ）．结果表明，ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记具有灵敏度高，操作简单快捷，无放射性污染等优点．可检出含有ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片汁液最大稀释度及含有ＰＳＴＶｄ全序列的质粒ＤＮＡ的最小量分别为１３００和１０ｐｇ．同时该探针也用于检测了不同马铃薯品种及ＴＰＳ亲本中的ＰＳＴＶｄ感染情况，结果显示，其中一些品种及ＴＰＳ亲本已不同程度的被ＰＳＴＶｄ感染．     

应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒

用非放射性的Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的１１－ｄＵＴＰ取代３２Ｐ标记的ｄＡＴＰ或ｄＣＴＰ，标记克隆的ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１０．５ｋｂｃＤＮＡ，制备成探针．通过核酸斑点杂交对粗提取的ＢＢＴＶ，ＢＢＴＶ－ＤＮＡ，感染ＢＢＴＶ的香蕉植物的拟茎，球茎处的组织，新生叶片以及成熟后的叶片进行了检测．结果表明：ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１ｃＤＮＡ探针特异性强，不与ＣＭＶ—ＲＮＡ、无毒香蕉组培苗提取的核酸发生杂交反应；仅与粗提ＢＢＴＶ、ＢＢＴＶ－ＤＮＡ、ＢＢＴＶ侵染的香蕉组织的核酸提取物发生杂交反应．此探针灵敏度高，可检出含有ＢＢＴＶｃＤＮＡ－１０．５ｋｂ的质粒ＤＮＡ的最小量为１０ｐｇ；测定感病香蕉植株的拟茎汁液的最高稀释度可达１∶１２８，相当于０．４ｍｇ病蕉组织中的病毒含量．测定同一病株不同部位的结果表明，ＢＢＴＶ在植物体内的分布不均匀，拟茎处组织中病毒含量最高，球茎处的组织以及新生叶片中的病毒含量次之，成熟后的叶片中的病毒含量最低     

放线菌F401菌株杀虫活性研究

从江苏茅山地区竹林土壤中分离筛选到一株具有杀虫活性的放线菌F401号菌株。在扫描电镜下,该菌株的孢子丝呈紧密和松敞的小螺旋形,孢子椭圆形及圆柱形,表面光滑。气生菌丝灰褐色,菌落薄绒状,基内菌丝无色,不产生可溶性色素。摇瓶发酵菌丝抽提物稀释后对桑蚕(Bombyxmori)、大叶黄杨尺蠖(Abraxasmiranda)、褐刺蛾(Setorapostornata)及松褐天牛(Monochamusalternatus)等昆虫进行测试,均具有较强的杀虫活性。试验研究表明,此菌株是一种具有杀虫活性的链霉菌(Streptomicessp.)。     

基于nRF401芯片的温度无线数据采集系统设计

介绍了基于nRF401芯片的温度无线数据采集系统的设计.给出了无线数据采集系统的硬件具体电路及通信协议的具体格式,上位机采用查询的方式对多个测温点进行查询.系统具有数据传输速度快、可靠性高、功能易扩展等特点,适用于多种工业领域.     

用荧光原位杂交技术检测性染色体异常

用性染色体探针分别对９例性染色体异常患者和１名性别不明患儿进行了荧光原位杂交，结果表明，２个病列的杂交结果与原诊断核型不符，性别不明患儿的核型为４６，ＸＹ，结合中期及间期杂交结果，ＦＩＳＨ的应用价值进行了评估。     

我国铁路线路工务检测现状及探讨

介绍了我国铁路线路工务检测的现状,对目前采用的检测方法和检测技术,即静态检测、动态检测及其他检测进行了归类和总结。     

贝类产品中软骨藻酸的HPLC检测方法

建立了高效液相色谱测定贝类产品中软骨藻酸的检测方法,具体过程为:样品先经甲醇浸提后,再用甲醇-水(V（甲醇）∶V（水）=1∶1）提取2次,合并提取液后用Zorbax SB300-C18柱(2.1 mm×250 mm,5 μm)进行分离,以乙腈-0.2%磷酸水溶液（含0.1%三乙胺）（V（乙腈）∶V（磷酸水溶液）=12∶88）为流动相于室温下等度洗脱,流速为0.25 mL/min,进样量20 μL,检测波长为242 nm.结果表明,在建立的提取方法和色谱条件下,软骨藻酸从复杂的样品基体中被分离出来,在0.02~1.0 mg/L质量浓度范围内具有良好的线性关系（r＞0.999）,样品的平均加标回收率为108%,测量方法的RSD为3.5%（n=6）,检出限为23.5 ng/g.所建立的检测方法可适用于对贝类产品中软骨藻酸的快速检测.     

地高辛标记cRNA探针原位杂交检测大鼠脑NMDAR—L mRNA

采用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｎ Ｄｉｇ）标记神经递质受体ＮＭＤＡＲ－Ｌ ｃＲＮＡ探针技术进行原位杂交，研究了Ｗｉｓｔａｒ新生大鼠脑神经细胞ＮＭＤＡＲ－Ｌ的基因表达。光学显微镜观察结果显示，大脑皮层、海马等区有明显的ＮＭＤＡＲ－Ｌ ｍＲＮＡ表达，胞浆着蓝色，胞核不着色，背景浅谈，反差显著。实验结果表明地高辛标记ｃＲＮＡ探针能快速、准确地检测出ＮＭＤＡＲ－Ｌ ｍＲＮＡ，为进一步研究这一拟受体在脑中表达和分