L-半胱氨酸对酪氨酸酶的抑制酪氨酸酶催化动力学

L-半胱氨酸对酪氨酸酶活性有抑制作用,随着L-半胱氨酸浓度的增加而酶活不断受到抑制,并且延滞时间也相应延长。相对稳态酶活力则随着L-半胱氨酸浓度的增大而下降。同时,对酪氨酸酶催化反应的影响及作用动力学机理进行了研究,分析延滞时间产生的根本原因,提出了酪氨酸酶的单酚酶将醌转化为多巴黑色素的非酶反应偶联的反应机理,研究其对酪氨酸酶催化反应的影响及作用动力学机理,为酪氨酸酶抑制剂的设计提供分子模板。     

紫外可见分光光度法表征L-半胱氨酸对酪氨酸酶的作用机理

本实验采用紫外可见分光光度法,研究了L-半胱氨酸对酪氨酸酶的作用机理.     

光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟离体水解酶系的影响

研究了典型光活化毒素α—T对棉铃虫和亚洲玉米螟羧酸酯酶(CarE)、酸性磷酸酶(AP)、碱性磷酸配酶(ALP)等水解酶离体活性的影响．结果表明，高浓度α—T可使棉铃虫CarE、ALP和亚洲玉米螟ALP活性降低，诱导棉铃虫AP活性升高，但不影响亚洲玉米螟CarE、AP活性．光照下高浓度α—T对两种昆虫CarE、AP、ALP离体活性均有抑制作用。     

L-半胱氨酸作为化妆品美白添加剂的作用机理

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是黑色素形成的关键酶,其抑制剂的研究是当前美白添加剂研究的热点.研究了L-半胱氨酸(L-Cys)对蘑菇酪氨酸酶和小鼠B16黑色素瘤细胞粗提的酪氨酸酶的抑制效应,实验结果表明,L-Cys对2种来源的酪氨酸酶有较强的抑制作用,其半效抑制浓度分别为1.75,15 μmol/L.对小鼠B16黑色素瘤细胞粗提的酪氨酸酶的抑制主要表现为显著延长酶促反应的迟滞时间,同时显著降低酶的活力.进一步对L-Cys在细胞毒性方面进行了研究,结果表明,在200 μmol/L浓度下,L-Cys对小鼠黑素瘤细胞B16的生长未显示出明显影响,对细胞状态、代谢MTT的能力、细胞增殖率等均无影响,无明显细胞毒性,是一种有潜力的增白剂,为L-Cys作为美白添加剂提供了依据.     

烯啶虫胺对棉铃虫神经细胞钠、钙通道的影响

利用全细胞膜片钳技术检测了新型杀虫剂烯啶虫胺(Nitenpyram)对急性离体培养的棉铃虫Helicoverpaarmigera(Hübner)中枢神经细胞电压门控钠和钙通道的影响.结果表明:烯啶虫胺对棉铃虫神经元TTX敏感型钠通道和L-型钙通道的峰值电流有显著抑制作用;药物作用后,钠及L-型钙通道的激活曲线均左移,钠通道半数激活电压向超极化方向移动约3 mV,钙通道半数激活电压向超极化方向移动约7 mV,均具有统计学差异;烯啶虫胺对钠和L-型钙通道的失活也有影响,使半数失活电压均向超极化方向移动,钠通道的V0.5偏移约2 mV,钙通道的V0.5偏移约5 mV,均具有显著性差异. 另外,烯啶虫胺可显著增大钠通道和L-型钙通道的窗口电流. 最终确认烯啶虫胺对棉铃虫幼虫中枢神经元TTX敏感钠通道和L-型钙通道的峰值电流及通道的激活和失活都有影响,使钠、钙通道窗口电流增大,棉铃虫中枢神经细胞的钠、钙通道为烯啶虫胺的潜在作用靶标.     

常压微波合成L-2-邻羟苯基-噻唑烷-4-甲酸

以乙醇和水为介质,在常压微波反应条件下用L-半胱氨酸与邻-羟基苯甲醛合成L-2-邻羟苯基-噻唑烷-4-甲酸.讨论了微波功率和反应时间对产率的影响.实验表明微波技术可用于光学活性物质的合成,并显示出微波合成的简便、安全、快速、产率高的特点.     

10种杀虫剂对小菜蛾绒茧蜂的选择毒力研究

通过10种杀虫剂对小菜蛾幼虫和小菜蛾绒茧蜂成虫的室内毒力测定试验,结果表明∶印楝素、阿维菌素、功高、锐劲特和除尽对小菜蛾具有较高的毒力,其中印楝素的毒力最高,其LC50值为1.82mg·L-1。阿维菌素对小菜蛾绒茧蜂的毒力最低,其LC50值为114.42mg·L-1。印楝素、阿维菌素、锐劲特、除尽等4种杀虫剂对小菜蛾绒茧蜂的选择指数均大于1,对天敌较为安全。     

高山花椰菜多酚氧化酶活性影响因素的研究

研究了几种还原剂对高山花椰菜多酚氧化酶(PPO)活性的影响.结果表明:150 mg/L的L-半胱氨酸、200 mg/L的抗坏血酸、150mg/L的亚硫酸钠可分别抑制PPO活性的91.7%、79.2%和83.2%,其中L-半胱氨酸是对PPO抑制效果最好的还原剂,L-半胱氨酸的添加量应以500mg/L为宜.     

一种用昆虫病毒研发高效安全的新型生物农药正在全面推广——中国科学院广谱高效昆虫杆状病毒杀虫剂的研制和应用

传统观点认为,一种昆虫病毒只能防控一种害虫,广谱甘蓝夜蛾核型多角体病毒(Mb MNPV)杀虫剂的开发改变了这一传统观念。该体病毒杀虫剂可防治32种以上鳞翅目害虫,尤其对我国重要抗性农业害虫小菜蛾、地老虎、甜菜夜蛾、棉铃虫、烟青虫、甘蓝夜蛾、粘虫等有很好的防控效果。中国科学院武汉病毒研究所研制出一种广谱昆虫杆状病毒生物杀虫剂,并已建成全球最大的千吨级昆虫病毒杀虫剂生产线,年产制剂超过600吨。在全国21个省(市、区)大面积推广应用,控制抗性小菜蛾、棉铃虫、甜菜夜蛾等重要农业害虫,年应用面积超过600万亩,已成为目前国内外年产量和年应用面积最大的昆虫病毒生物杀虫剂。     

砂仁提取物对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制效应

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是生物体合成色素的主要酶.以地道阳春砂仁(Amomum)果实为材料,经过超声提取、萃取、树脂AB-8分离纯化,得到对蘑菇酪氨酸酶活力有显著抑制作用的砂仁30％(体积分数)乙醇提取物.研究该提取物对蘑菇酪氨酸酶的效应,结果表明,砂仁果实乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力都有明显的抑制作用.对单酚酶的作用,当质量浓度达到10.5 μg/mL时,可使单酚酶的稳定态活性酶活力下降40％,迟滞时间延长了3.12倍;对二酚酶活力的抑制作用也呈现浓度依赖性关系,其半抑制率浓度(IC50)为64 μg/mL,抑制作用属于可逆效应,抑制类型为混合型,抑制常数KI和KIS分别为41.85和98.51 μg/mL.这些数据为新型的酪氨酸酶的开发和寻找新型的食品保鲜剂和杀虫剂提供基础.     

清香木提取物抗氧化能力和酪氨酸酶活性抑制能力的研究

清香木(Pistacia weinmannifolia)是漆树科(Anacardiaceae)黄连木属(Pistacia)中的一种集绿化、药用、抑菌和美容等效用为一体的多效植物.研究通过水提法、醇提法提取清香木叶中有效成分,测定其中的多酚和黄酮含量、体外抗氧化能力(包括DPPH、ABTS~+和羟自由基清除能力)、及酪氨酸酶抑制能力.结果表明,水提液中多酚和黄酮质量比(干重,DW)分别为42.67 mg/g和18.69 mg/g,明显高于醇提液;体外抗氧化能力分析结果表明,水提液清除DPPH、ABTS~+和羟自由基IC50分别为7.95、11.71、3.26 mg/mL,清除能力远高于醇提液;酶促动力学实验证明,清香木水提液对酪氨酸酶活性有明显的抑制作用,并且随着浓度升高其抑制作用愈显著,当质量浓度达到0.2 mg/mL时,抑制率可高达80%;进一步相关性分析表明,清香木多酚和黄酮含量与DPPH、ABTS~+和羟自由基、酪氨酸酶活性抑制IC50值都具有显著的负相关性.综上,可以认为清香木叶提取物中含有丰富的多酚和黄酮类活性物质,可有效清除自由基,抑制酪氨酸酶活性.     

一种新型铜离子-席夫碱印迹膜的制备与电化学性质研究

以L-半胱氨酸和香草醛为原料合成了一种新的席夫碱(Schiff-base),用红外光谱对席夫碱进行了表征.将金电极置于席夫碱和铜离子的乙醇水溶液中,用自组装方法在金电极上制备了铜离子席夫碱印迹膜,该印迹膜是一种新型的铜离子电化学传感器.用循环伏安法和交流阻抗法研究了印迹膜电极的电化学行为,用差示脉冲伏安法研究了铜离子在该电极上的响应,实验表明铜离子在3×10-6～5×10-5 mol·L-1浓度区间内与峰电流呈线性关系,其相关系数为0.997 2,检出限为1×10-7 mol·L-1.该印迹电极可用于铜离子的电化学测定.     

薇甘菊对昆虫和病原菌生物活性的初步研究

研究了薇甘菊Mikania micrantha H.B.K.的乙醇、丙酮提取物对菜青虫Pieris rapae和小菜蛾Plutellaxylostella幼虫的生物活性,结果表明,提取物对菜青虫和小菜蛾幼虫具有较强的毒杀和拒食作用.质量浓度为500 mg·L-1的乙醇提取物对1～2龄的菜青虫的毒杀作用达到80%,LC50=293.4 mg·L-1对2～3龄小菜蛾幼虫的毒杀作用达到70%以上,LC50=343.5 mg·L-1.相同质量浓度的丙酮提取物对2种幼虫的毒杀作用略低于乙醇提取物.质量浓度为125 mg·L-1的乙醇、丙酮提取物对2种幼虫均具有拒食作用,前者拒食率分别为97.4%和70.4%,后者提取物的拒食率分别为96.5%和98.3%.薇甘菊(干样/培养基)0.02 g/mL的甲醇、丙酮提取物对辣椒疫霉Phytophthora capsili、玉米大斑病菌Exserohilum turcicum菌丝的抑制率均为100%.     

Determination of L-cysteine in Microbial Conversion Liquor by Spectrophotometry with 5, 5'-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid)

以5,5’-二硫硝基苯甲酸(DTNB)分光光度法测定微生物法转化液中的L-半胱氨酸,测定波长为412 nm,L-半胱氨酸在5～40 μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(R2＞0.999 3),高、中、低浓度水平的L-半胱氨酸加标回收率为99.2％～102.5％,RSD为2.3％.该法准确、简单、快速,可以用于对微生物转化进行实时检测.     

木葡糖酸醋杆菌趋化性的初步研究

采用毛细管法研究了木葡糖酸醋杆菌(Gluconacetobacter xylinum)的趋化性反应,结果显示pH、趋化时间、温度、氨基酸、碳源、酸和重金属离子对木葡糖酸醋杆菌趋化性反应有影响.木葡糖酸醋杆菌在温度25～30,℃,pH为5时趋化性反应最高;最佳趋化时间为60,min;在7种氨基酸中L–亮氨酸、L–丙氨酸、L–甘氨酸、L–甲硫氨酸对木葡糖酸醋杆菌的趋化性反应有促进作用;6种碳源中,葡萄糖对趋化性有促进作用,蔗糖、乳糖、麦芽糖、半乳糖、甘油对趋化性反应有抑制作用;4种酸中柠檬酸对趋化性反应有显著的抑制作用;Sn2+、Mn2+、Pb2+、Cr2+、Co2+离子都对趋化性反应有抑制作用.     

L-半胱氨酸修饰银电极用于测定食品包装塑料中的锡

采用自组装方法,通过L-半胱氨酸分子中的硫与银基底较强的亲和性,L-半胱氨酸在电极表面吸附并定向排列形成单分子层,得到L-半胱氨酸修饰银电极.循环伏安实验表明银电极表面自组装上L-半胱氨酸后,灵敏度明显提高,在0.2 mol/L HAc-NaAc(pH=5.0)缓冲溶液中研究Sn(Ⅱ)的伏安特性,由于Sn(Ⅱ)与电极表面L-半胱氨酸的吸附富集作用,在-37.5 mV产生一个灵敏的还原峰,其峰电流与Sn(Ⅱ)浓度成线性关系,线性范围为5.0×10-10～1.0×10-6mol/L,检测下限可达1.0×10-10mol/L.测定食品包装塑料中的锡,获得与原子吸收法一致结果.     

微生物法制备L一半胱氨酸分离提纯的方法

采用微生物法制备L-半胱氨酸,产物浓度低、易氧化和被脱巯基酶进一步分解,L-半胱氨酸的分离提纯难度较大,是制约产品收率提高的控制步骤.目前多采用将L-半胱氨酸氧化为L-胱氨酸,分离后再电解还原的氧化法和离子交换法,离子交换法以其简洁的工艺成为今后的研究方向.     

5,5′-二硫硝基苯甲酸分光光度法测定微生物酶法转化液中的L-半胱氨酸

以5,5′-二硫硝基苯甲酸(DTNB)分光光度法测定微生物法转化液中的L-半胱氨酸,测定波长为412 nm,L-半胱氨酸在5～40μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(R2>0.999 3),高、中、低浓度水平的L-半胱氨酸加标回收率为99.2%～102.5%,RSD为2.3%.该法准确、简单、快速,可以用于对微生物转化进行实时检测.     

灰绿曲霉对绞股蓝皂苷的微生物转化及其生物活性

以福建绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb)Makino]为材料,经乙醇提取和正丁醇萃取获得绞股蓝皂苷,利用灰绿曲霉(Aspergullus glaucus)微生物转化绞股蓝皂苷,通过测定绞股蓝皂苷和灰绿曲霉转化产物的抗癌、抗酪氨酸酶和抗氧化活性,比较绞股蓝皂苷经微生物转化修饰前后生物活性的差异.结果表明:灰绿曲霉转化产物对肝癌细胞SMMC7721有体外抑制作用,半抑制质量浓度(IC50)为91.66μg/m L,而绞股蓝皂苷抗癌效果不强;绞股蓝皂苷对蘑菇酪氨酸酶活力具有较强的抑制作用,IC50为0.14 mg/m L,其抑制作用属于可逆抑制,抑制类型为混合型抑制作用,而灰绿曲霉转化产物抗蘑菇酪氨酸酶活性较弱;绞股蓝皂苷和灰绿曲霉转化产物分别在0.2和2 mg/m L质量浓度下对DNA氧化损伤有保护作用.研究结果说明绞股蓝皂苷经微生物修饰后,抗癌效果增强,对蘑菇酪氨酸酶抑制作用和DNA氧化损伤保护作用减弱.该研究结果可为利用微生物转化法筛选抗癌绞股蓝皂苷奠定基础.     

多壁碳纳米管修饰玻碳电极测定L-半胱氨酸

将多壁碳纳米管滴涂于玻碳电极表面,制作多壁碳纳米管修饰玻碳电极(MWNTs/GCE),研究L-半胱氨酸(Cys)在此修饰电极上的电化学行为,并建立一种电化学检测L-半胱氨酸的新方法.在最佳实验条件下,L-半胱氨酸在2.0 × 10-6～1.0×10-4 mol/L浓度范围内与峰电流呈良好线性关系.其回归方程为Ip(μA...