有效微注射和移植受精卵建立转基因鼠

试验研究了转基因小鼠建立中的受精卵显微注射和移植，对获得受精卵、有效注射及移植易出现的问题和解决方法进行了讨论，对注射后的受精卵的移植加以改进，建立了人Ｇ－ＣＳＦ转基因小鼠模型．     

不同品系小鼠受精卵质量的比较及相关因素的研究

在转基因小鼠的建立过程中，获得高质量的受精卵是进行外源基因显微注射和受精卵移植的关键一步．本研究在使用昆明白小鼠进行获得受精卵建立转基因小鼠同时，比较了以前未曾报道过的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠用于转基因研究的可能性，并分析研究了受精卵质量与体重等性状的关系．     

乳腺生物反应器的研究现状

1980年Gordon将重组DNA采用显微注射方法导入小鼠受精卵,首次获得了带有外源基因的转基因小鼠,这是人类首次对哺乳动物进行人工改造的尝试。1982年Palmiter等将大鼠生产激素基因显微注射到小鼠受精卵中,首次获得了比普通小鼠大得多的“超级小鼠”,并提出可以从转基因动物中提纯有价值的药用蛋白。“超级小鼠”的诞生,说明了通过性细胞的基因操作可以有效地将外源基因导入哺乳类动物的基因组内,使其得以有效地表达,并产生相应的生理效应。这一结果的取得,标志     

翘嘴红鲔繁殖技术研究

通过试验研究了翘嘴红铂亲鱼培育、人工催产、受精卵孵化的技术。结果表明：天然水域捕捞的翘嘴红铂鱼种在池塘条件下，通过人工培育能够达到性成熟，其成熟系数为14．46，相对繁殖力为30．28。亲鱼采用一次性注射组合催产剂，自然产卵的方式，受精卵在孵化环道中完成胚胎发育孵化出苗，LRH-A2 1．2μg＋DOM5mg和LRH-A21.2μg＋HCG 1000 IU＋PG 0．8mg催产剂组合具有较高的催产率和受精率。     

环境激素遗传机制研究初探及展望

环境激素是由于人类的生活和生产活动而释放到周围环境中的各种化学合成物质，并对人体内和动物体内原本营造的正常激素功能施加影响，从而引起生物的内分泌干扰效应。环境激素具有很强的污染性，并能被积累于周围的环境中。本文综述了环境激素的相关遗传机制，并就今后关于环境激素方面的研究进行了简介。     

环境激素与环境风险评估

大量证据表明环境激素可以干扰人类生殖健康和其他动物的繁殖能力。目前有近70种人工化合物被认定具有激素活性，文章认为环境激素可以作用于多种靶细胞，有多种作用途径，包括雌激素的机制、作用、暴露途径和生物检测方法。另外讨论了环境激素风险评估。     

环境激素类物质污染的研究及展望

环境激素污染正严重威胁全球环境和人类健康,从环境激素的概念、种类及其危害出发,对国内外环境激素污染的研究进行了综述,并总结了防治环境激素污染的主要技术手段.     

关于小鼠显微注射体外受精及受精卵体外发育和移植的研究

用显微注射技术将精子(或精核)注入卵周隙(或卵细胞质)使卵受精,是近十年来生殖生物学基础研究的新途径,用此方法进行体外受精,可克服因免疫因素、精子寡少、精子弱动等因素造成的不孕症,九十年代初国外将此方法用于人类临床上已获得成功。本研究以昆明小白鼠为实验对象,通过精子显微注射方法完成体外受精,并对显微受精卵的存活率、受精卵体外培养的卵裂率、发育率及发育胚胎的移植进行了系统的研究,并获得由微注射精子体外受精卵发育而成的后代。     

饰纹姬蛙早期胚胎发育的研究

研究了饰纹姬蛙（Ｍｉｃｒｏｈｙｌａｏｒｎａｔａ）的早期胚胎发育．经雌雄成体腹腔注射ＬＲＨ－Ａ，促使其抱对、产卵．受精卵在水温２７±０．５℃的条件下进行培养．结果表明：在我国的蛙类中，饰纹姬蛙是早期胚胎发育最为迅速的种类之一；胚体纵轴伸长出现在原肠末期；在鳃循环期即可明显地观察到尾循环；出水孔的形成始于鳃盖完成时的腹中部，并逐渐移向腹后部．     

日本开发出可延长感染禽流感鸡寿命的化合物

日本研究人员最近开发出一种类型介于氨基酸和蛋白质之间的有机化合物。这种化合物是一种化合肽，可以使感染H5N1型禽流感鸡只的寿命延长。研究人员把10只刚感染H5N1型禽流感的鸡分成2个组，只给其中1个组（5只）注射他们开发的这种化合物，另一个组作为对照不注射化合物。     

家鸡生长激素释放激素受体(GHRHR)的蛋白表达与抗体制备

本研究采用RT-PCR等方法,构建编码家鸡两个GHRH受体(GHRHR1和GHRHR2)N-末端胞外结构域的原核表达载体,并在细菌中成功诱导其表达.利用离子亲和层析技术,纯化两受体的重组蛋白片段.在此基础上,利用重组蛋白在兔中制备了两受体的抗体,采用Western blot方法,初步验证这些抗体对垂体以及HEK293细胞中表达的家鸡GHRHR1和GHRHR2识别的有效性.     

珍珠鸟和家鸡甲状旁腺激素3型受体(PTH3R)的结构与表达图谱分析

本研究采用RT-PCR方法,首先克隆珍珠鸟和家鸡的PTH3R基因全长cDNA序列.结果显示,家鸡PTH3R(cPTH3R)cDNA全长1632bp,编码543个氨基酸,珍珠鸟PTH3R(zPTH3R-w)cDNA序列全长1563bp,编码520个氨基酸,其蛋白均含有信号肽序列、七次跨膜区等特征性结构.此外,在珍珠鸟中还发现一个新剪接变体zPTH3R-v1,其cDNA序列全长1468bp,编码488个氨基酸,其缺失第3外显子进而导致第1跨膜结构域缺失.利用生物信息学方法,我们还对珍珠鸟和家鸡PTH3R蛋白序列进行三维建模.采用RT-PCR方法,本研究也对珍珠鸟PTH3R基因进行组织表达分析.结果显示,zPTH3R及其剪切变体zPTH3R-v1在珍珠鸟脑及外周组织中广泛表达.     

鸡胚背根神经节的摘取方法及培养条件的改进优化

探讨摘取鸡胚DRG的有效方法,并对培养条件进行优化,为神经营养因子突起鉴定奠定基础。根据鸡胚DRG的生长状态和解剖特点,采用分部摘取法摘取鸡胚DRG,利用NGF对不同部位的DRG进行鉴定,同时通过不同血清浓度、不同培养基及不同观察时间鸡胚DRG神经突起的生长状态,对培养条件进行优化。结果显示分部摘取法摘取鸡胚DRG提高了实验的可操作性和可重复性;综荐骨部的鸡胚DRG为实验最佳取材部位;无血清RPMI-1640培养基为最适神经突起生长鉴定培养基。     

鸡舍小气候对养鸡业的影响

鸡对饲养环境要求较高，鸡舍小气候环境特别是温度，湿度，光照和舍内通风换气等条件对鸡的生产力影响很大，提出改善鸡舍小气候环境对提高养鸡生产经济效益应注意的问题。     

藏鸡FSHβ、POU1F1和FSHR的基因多态性及其与产蛋性能的关系

目的:通过研究藏鸡FSHβ、POU1F1和FSHR的基因多态性及其与产蛋性能的关系,在分子水平上分析其产蛋性能低下的原因,目的是筛选出高产基因型以帮助选育高产藏鸡,为保护纯种藏鸡、促进规模化养殖提供理论依据和指导.方法:以高产蛋量鸡品种罗曼鸡为对照,选择禽类繁殖调控轴上的促卵泡激素β亚基(FSHβ)、垂体特异性转录因子1(POU1F1)和促卵泡激素受体(FSHR)三个基因,克隆、分析这三个基因部分编码区(CDS区)单核苷酸序列多态性(SNP)及其与藏鸡产蛋量的相关性.结果:1.藏鸡与罗曼鸡FSHβ基因第2外显子和第3外显子种内、种间均不具有多态性,表现为单一基因型.2.POU1F1基因exon3,exon4和exon6在藏鸡和罗曼鸡种间存在SNP位点,具有各自独特的基因型.exon3上藏鸡为AA基因型,罗曼鸡为AB基因型;exon4上藏鸡为CC基因型,罗曼鸡为CD基因型;exon6上藏鸡为TT基因型,罗曼鸡为TW基因型.而该基因第5外显子序列在两物种的种内和种间均未表现出多态性.3.FSHR基因exon1和exon4在藏鸡和罗曼鸡种间存在SNP位点.exon1上藏鸡为EE基因型,罗曼鸡为EF基因型;exon4上藏鸡表现为3种基因型(GH,GI,HI),而在罗曼鸡上仅具有一种基因型(GH),且罗曼鸡的基因型与藏鸡种群内的一种相同.结论:1.FSHβ基因不具有多态性,与产蛋量间的关系有待进一步研究.2.POU1F1基因exon3,exon4和exon6具有多态性.此3个片段的核苷酸突变位点的等位基因频率和基因型频率在两个种群间呈极显著性差异(P0.01),这6个SNP与藏鸡产蛋量具有显著相关性.3.FSHR基因的exon1和exon4具有多态性.此2个片段的核苷酸突变位点的等位基因频率和基因型频率在两个种群间呈极显著性差异(P0.01),该基因的SNP与产蛋量具有显著相关性.     

珍珠鸟和家鸡甲状旁腺激素3型受体(PTH3R)的结构与表达图谱分析

甲状旁腺激素(PTH)与动物钙稳态调控和骨代谢平衡相关,其生理作用是通过甲状旁腺激素受体(PTHR)介导。甲状旁腺激素受体家族包括三个不同的亚型,其中甲状旁腺激素3型受体(PTH3R)在非哺乳类脊椎动物生长发育过程中起着重要作用,然而PTH3R在鸟类中的研究则相对较少。 本研究采用RT-PCR方法,首先克隆了珍珠鸟和家鸡的PTH3R基因全长cDNA序列。结果显示,家鸡PTH3R (cPTH3R) cDNA全长1632 bp,编码543个氨基酸,珍珠鸟PTH3R(zPTH3R-w) cDNA序列全长1563 bp,编码520个氨基酸,其蛋白均含有信号肽序列、七次跨膜区等特征性结构。此外,在珍珠鸟中还发现一个新剪接变体zPTH3R-v1,其cDNA序列全长1468 bp,编码488个氨基酸,其缺失了第3外显子进而导致第1跨膜结构域缺失。利用生物信息学方法,我们还对珍珠鸟和家鸡PTH3R蛋白序列进行三维建模。 采用RT-PCR方法,本研究也对珍珠鸟PTH3R基因进行组织表达分析。结果显示,zPTH3R及其剪切变体zPTH3R-v1在珍珠鸟脑及外周组织中广泛表达。珍珠鸟和家鸡PTH3R基因的成功克隆与结构解析,将为下一步开展PTH3R在鸟类中的功能研究奠定重要基础。     

B19 单倍型鸡 BNK 蛋白单克隆抗体的制备

摘要: 目的 体外构建稳定表达鸡自然杀伤细胞( Natural killer,NK) BNK 蛋白的细胞系,制备 BNK 蛋白的单克隆抗体,为鸡 BNK 蛋白及 NK 细胞的研究提供便利。方法 利用 BNK19 原核表达产物免疫 BALB/c 小鼠,体外稳定表达疫病敏感性 B19 单倍型鸡 BNK 蛋白( BNK19) 的真核细胞系筛选单克隆抗体。结果 用稳定表达 BNK 蛋白的真核细胞系筛选到 2 株 BNK19 特异性单克隆抗体。结论 获得的单克隆抗体经鉴定具有免疫学活性,为鸡 BNK 蛋白及 NK 细胞的作用机制研究提供了条件。