C57BL/6J胚胎冷冻小鼠的遗传监测和分析研究

目的用生化标记和微卫星检测法观察近交系C57BL/6J小鼠胚胎冷冻后的遗传质量是否发生改变。方法采用国标(GB/T 14927.1-2008)生化标记基因检测法对4只玻璃化冷冻、解冻移植后获得的C57BL/6J F1代小鼠的13个生化位点进行预检测,再根据微卫星DNA多态性的遗传监测方法进行多态性分析。结果4只玻璃化冷冻后移植获得的C57BL/6 F1代小鼠的遗传概貌与国标(GB/T 14927.1-2008)中的14个生化位点完全一致;并与本文作者已建立"几种常用近交系小鼠微卫星DNA多态性的分析研究"的遗传监测结果完全相符。结论玻璃化冷冻法(EFS40,straw)对C57BL/6J冷冻胚胎小鼠的遗传物质并未造成影响,其遗传特性保持稳定,是可行的小鼠胚胎冷冻方法。     

社群巢对C57BL/6 J小鼠社会识别的影响

为了探讨社群巢这种早期环境富集方式对动物社会识别的影响,我们收集标准巢和社群巢的 C57BL/6 J子二代动物各30只,以Habituation/Dishabituation模型进行四次的习惯化实验和第五次的去习惯化实验并比较分析。结果表明,无论在标准巢还是社群巢条件下,雌、雄小鼠均表现出社会识别能力;与标准巢条件下的社会识别相比,社群巢条件下C57BL/6 J小鼠的社会识别能力并未有显著增强。我们推断,社群巢这种早期环境富集方式不能使动物的社会识别能力发生显著性变化的原因可能是社会识别作为动物的一项最基本能力,后天环境对其的影响甚小。另外,关于社群巢的研究也有益于探讨动物其它更高层次的社会行为。     

不同处理方式对4个来源C57BL/6J小鼠血糖变化的影响

分别以普通饲料+STZ,普通饲料+柠檬酸对照,高脂饲料+STZ和高脂饲料+柠檬酸对照4种方式处理购自北京、南京和上海共4个生产单位的雄性C57BL/6J(B6)小鼠.分别于注射(STZ或柠檬酸对照)前和注射后3周连续测定非空腹血糖浓度.结果显示虽然高脂饲料联合注射STZ的方法可以较好模拟2型糖尿病血糖变化,但是B6小鼠的遗传背景(来源)也是影响模型成败的关键因素之一.     

饲养环境对C57BL/6J近交系小鼠免疫特性的影响

对普通级和清洁级C5 7BL 6J近交系小鼠的免疫指标CD4 + 、CD8+ 、CD3+ 、CD19+ 进行了测定 ,结果表明 :清洁级与普通级小鼠的CD8+ 、CD4 + CD8+ 指标差异显著 ,并且清洁级小鼠的CD4 + CD8+ 值低于普通级小鼠。为研究清洁级实验动物的特性提供基础数据     

不同年龄C57BL/6J小鼠耳蜗毛细胞形态学变化的实验研究

目的通过不同年龄C57BL/6J小鼠耳蜗毛细胞形态学观察,探讨其毛细胞损失随年龄变化的趋势。方法选择C57BL/6J小鼠24只,分别于2月龄、4月龄、7月龄随机各选取8只动物处死取耳蜗,苏木精-伊红染色,制作耳蜗基底膜铺片,显微镜下观察耳蜗毛细胞的形态变化。结果C57BL/6J小鼠随着月龄的递增耳蜗毛细胞损伤呈加重的趋势:2月龄小鼠未见明显耳蜗毛细胞丢失;4月龄小鼠开始出现耳蜗外毛细胞损害,其损坏部位仅局限在耳蜗底回的起始端;7月龄小鼠耳蜗毛细胞损害比4月龄加重。这种随着年龄增长而发生的耳蜗损害遵循着从底回逐渐向顶回发展的规律,同时外毛细胞的损害比同区域的内毛细胞严重。结论C57BL/6J小鼠耳蜗毛细胞变化规律符合老年性耳聋特点,可以作为研究老年性耳聋的动物模型。     

“保肺泰”对C57BL／6J荷瘤小鼠及化疗荷瘤小鼠NK细胞活性 …

以Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞株接种Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ纯系小鼠造成荷瘤模型,观察中药复方保肺泰对荷瘤小鼠及其化疗后ＮＫ细胞活性的影响。结果显示,保肺泰组与荷瘤对照组比较、保肺泰＋化疗组与化疗组比较,ＮＫ细胞活性均有明显升高（Ｐ〈０．０５）。提示保肺泰可通过提高机体的免疫力增强抗肿瘤效果。     

用大鼠心肌条件培养基建立来源于C57BL/6J小鼠的ES细胞系

报道一种新的建立C57BL/6J小鼠ES细胞系的方法。采用大鼠心肌条件培养基,在不使用饲养层细胞和白血病抑制因子(LIF)的情况下,从C57BL/6J品系小鼠中建成1个ES细胞系即MESPU 41,成系率为1.0%。MESPU 41细胞为XX型,核型正常率高达89%,表现出XX型ES细胞系少有的稳定性。进行体内分化实验时MESPU 41细胞能发生广泛分化形成畸胎瘤。嵌合体制作实验证实MESPU 41细胞具有嵌合能力,能参与胚胎的发育。采用RT-PCR方法,检测出大鼠心肌细胞有LIF mRNA的表达,这可能与其条件培养基保持ES细胞未分化状态并使X染色体稳定有关。同时,还对大鼠心肌细胞进行了永生化的尝试,共得到了4个永生化克隆,这将进一步简化ES细胞建系和培养工作,为进一步研究ES细胞在体外培养过程中的稳定性开创了新的起点。     

ApoE基因敲除小鼠和C57BL/6J小鼠血脂及主动脉组织病理学的对比观察

目的高脂饲养的雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化模型的建立。方法选取8周龄雄性ApoE-/-小鼠,以C57BL/6J小鼠为对照组,高脂饲养8周后测定血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度胆固醇脂蛋白、低密度胆固醇脂蛋白含量;小鼠心脏主动脉根部石蜡切片,常规HE染色,观察和测量动脉粥样硬化斑块的组织学特点及病变面积。结果ApoE-/-小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量显著高于同年龄同性别C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL/6J小鼠;高脂饲养下16周龄ApoE-/-小鼠主动脉根部切面可见明显的脂质斑块。结论在该浓度的高脂饲料饲养条件下,ApoE-/-小鼠在16周龄已形成脂质斑块,是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。     

“保肺泰”对C_(57)BL/_6J荷瘤小鼠及化疗荷瘤小鼠NK细胞活性的影响

以Lewis肺癌细胞株接种C57BL/6J纯系小鼠造成荷瘤模型,观察中药复方保肺泰对荷瘤小鼠及其化疗后NK细胞活性的影响。结果显示,保肺泰组与荷瘤对照组比较、保肺泰 化疗组与化疗组比较,NK细胞活性均有明显升高(P<0.05)。提示保肺泰可能通过提高机体的免疫力增强抗肿瘤效果。     

外源褪黑素对羔羊卵母细胞成熟及卵丘扩展相关基因表达的影响

目的 本研究旨在探究在羔羊卵母细胞体外成熟培养过程中,添加外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎发育质量以及卵丘扩展相关基因表达的影响.方法 在成熟培养液中添加不同浓度(0,10,25和50μg/L)的褪黑激素,研究外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚DNA核碎片化的影响,通过DCFH-DA染色检测卵母细胞中活性氧...     

mSdr9c7基因在C57BL/6J小鼠不同组织中表达水平的研究

为探讨mSdr9c7基因在C57BL/6J雄性成年小鼠各组织中的表达情况,进一步研究mSdr9c7基因的功能,本文筛选适于实时荧光定量PCR法检测mSdr9c7基因表达水平的引物(正向引物序列为F:GGCCTGGACGTCAAGTTTCT,反向引物序列为R:TTCTAGAGGCCCCAGCAGAT),以5只18周龄C5...     

烟碱对MPTP引起的C57BL/6小鼠黑质纹状体多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)可引起实验动物产生类似帕金森氏病的症状和病理改变。本实验拟观察烟碱(Nicotine,Nic)对MPTP引起的小鼠黑质纹状体多巴胺能神经元损伤的预防和治疗作用。方法:C57BL/6小鼠分为2批。第1批注射MPTP后给予烟碱治疗(Nic0.1,0.5,1.0mg.kg-1,tid),第2批于注射MPTP前1d开始给予烟碱(bid)。连续用药15d后用荧光分光光度法测定纹状体的多巴胺(DA)含量。结果:与MPTP对照组比较,不同剂量Nic治疗组小鼠纹状体DA含量明显提高(P<0.05);于注射MPTP前1d开始给予烟碱的小鼠,其纹状体DA含量则显著提高,接近正常对照组的水平(90.69%～91.44%)。结论:实验结果提示烟碱对MPTP所致的神经损伤具有预防和治疗效果。     

长期高脂饮食对C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的影响

笔者运用基因芯片技术研究长期高脂饮食对C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的影响,探究长期高脂饮食导致小鼠冠心病发生的分子机制.选用12只4周龄C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常饮食组(C)和高脂饮食组(H)各6只,分别喂饲标准饲料和高脂饲料16周.随后提取每组小鼠骨骼肌组织进行基因芯片分析并对数据进行统计.C与H组共708个差异表达基因,其中表达上调基因417个,表达下调基因289个.疾病(Disease)分析结果显示4个与心血管疾病密切相关的基因分别为APOC3,APOD,ADM,PTGIS.2个与冠心病密切相关基因分别为MGP,APOC3.长期高脂饮食可以引起C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的显著变化.     

黑枸杞花青素对C57BL/6小鼠血糖、血脂及脂肪细胞形态的影响

为研究黑枸杞花青素对小鼠血糖、血脂及脂肪细胞形态的影响,本试验将8周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组、花青素组和吡格列酮组,灌胃给药8周后,对小鼠的体质量、肝脏系数、Lee's指数、血糖、血脂和脂肪细胞形态进行测定。结果表明:黑枸杞花青素能有效地降低小鼠体质量、肝脏系数及Lee's指数,改善血糖及胰岛素耐受,降低小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的含量,提高血清中高密度脂蛋白含量,同时黑枸杞花青素能够减少小鼠腹股沟白色脂肪细胞中脂滴的大小。因此,通过分析可以得出黑枸杞花青素能够降低C57BL/6小鼠血糖、血脂水平,减少脂质积累。     

钻井液浸泡时间对返排效果的影响模拟研究

室内钻井液动态损害评价实验往往在较短时间内完成,与现场实际钻井过程不符。利用高温高压动态损害评价仪,模拟现场实际钻井过程,将被钻井液损害后的岩芯浸泡在钻井液滤液中一定时间后取出返排,评价不同浸泡时间对返排效果的影响程度。实验结果表明:随着钻井液滤液浸泡时间的增加,油基钻井液体系的返排恢复率变化不大,水基聚合醇体系的返排恢复率有下降的趋势;短时间浸泡时变化不大,长时间浸泡后返排效果明显变差;无固相体系的总体趋势是增加的。钻井液滤液浸泡时间对返排效果的影响主要与钻井液性质、储层特征、储层损害机理等因素有关。     

LY354740改善氯胺酮暴露引起青春期C57BL/6小鼠的空间学习记忆功能损害与焦虑

目的:评价LY354740预先给药对氯胺酮暴露致青春期C57BL/6小鼠的空间学习记忆功能损害及焦虑水平改变的改善作用.方法:健康雌性SPF级C57BL/6小鼠39只,6～8周龄,体质量(20±5)g,随机分成氯胺酮组(K组)、LY354740预处理组(L组)及空白对照组(C组)等3组(n=13).K组和L组均腹腔注射质量分数为30 mg/kg氯胺酮,每隔30 min重复注射1次,每天注射氯胺酮3次,L组注射氯胺酮前30 min注射质量分数为10 mg/kg LY354740,C组注射等量生理盐水.第1天注射结束30 min后取新鲜海马组织测定谷氨酸质量分数(n=3).连续注射2周后进行行为学实验检测(n=10),包括旷场实验和Morris水迷宫.结果:与C组比较,K组谷氨酸明显上升(P0.01),旷场试验中心区活动时间缩短(P0.01),进入中心区频次减少(P0.01),在水迷宫测试中定位航行测试逃避潜伏期延长(P0.01),空间探索测试到达原平台潜伏期延长(P0.01)和穿越原平台频次减少(P0.05);与K组比较,L组旷场中心区停留时间延长(P0.05),在水迷宫测试中定位航行测试逃避潜伏期缩短(P0.05),空间探索测试到达原平台潜伏期缩短(P0.01).结论:LY354740预先给药可以抑制氯胺酮诱发的海马谷氨酸增加,改善氯胺酮暴露所致青春期C57BL/6小鼠的空间学习记忆功能损害及焦虑水平上升.     

静脉血细胞悬液放置时间对小鼠血常规测定的影响

目的 观察静脉血细胞悬液放置时间对小鼠血常规测定的影响。方法 随机选取成年ICR小鼠、C57BL/6 J小鼠各20只,采集定量静脉血液加到定量血细胞分析用稀释液中混匀,制成静脉血细胞悬液,于0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h在MEK-6410C全自动血细胞分析仪上采用微量血测定法测定血常规。结果 ICR小鼠和C57BL/6 J小鼠血常规数据变化趋势基本一致。与0 min相比,RBC在2 h、4 h、6 h和8 h均显著降低(P0.05)。结论 微量血测定法测定小鼠血常规时,尽可能在制成静脉血细胞悬液后即刻完成。RBC总数在1 h内测定,与RBC相关的HCT和MCV指标测定不宜超过30 min,PLT测定在2 h完成,与PLT相关的PCT和MPV测定应在1 h内,WBC总数及HGB含量较稳定,可在8 h内完成。     

DAP 玻璃化冷冻液对小鼠2-细胞胚胎的冷冻保存

摘要: 目的探索和优化小鼠2-细胞胚胎冷冻效果,建立小鼠胚胎冷冻保存技术以及超低温保存模型动物胚胎实验室所需的相关技术。方法选择3 个品系( C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － ) SPF 级4 周龄雌性小鼠,运用超数排卵、体外受精、玻璃化冷冻法,以及二细胞期胚胎复苏、体外培养等技术方法,观察上述实验效果。结果C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － 3 个品系小鼠超数排卵平均值分别为42. 98 个/只、27. 93 个/只、23. 11 个/只,体外受精2-细胞期胚胎率分别为68. 79%、32. 70%、23. 08 %,胚胎冷冻复苏后胚胎回收率72. 77%、80. 87%、83. 33%,存活率分别为56. 92%、54. 84%、70%,存活胚胎体外培养发育到囊胚比率分别为72. 37%、60. 78%、25%。结论选择4 周龄小鼠,按预定相同的技术方法做超数排卵、体外受精、胚胎冻存、胚胎复苏,呈现出较好效果,C57BL/6 小鼠优于基因工程小鼠,基本建立起小鼠2-细胞胚胎冷冻保存技术。     

苦瓜提取物对高脂肪喂食诱导的肥胖和胰岛抵抗C57BL/6j小鼠保护作用研究（英文）

通过高脂肪喂食诱导的C57BL/6j小鼠动物模型研究苦瓜提取物对肥胖和胰岛抵抗的保护作用。小鼠喂养2周后成功建立肥胖小鼠模型,随机分为正常对照组,肥胖小鼠模型组和不同浓度的苦瓜提取物灌胃组,灌胃质量分数分别为13.5、27和54 g/kg。以10周为期,每天以同等体积流质灌胃两次,其中,正常对照组和模型组用w=0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,药物组用不同浓度的苦瓜提取物灌胃。记录小鼠每日食物摄入量和每周体质量。同时测定内脏白色脂肪组织质量、血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖和胰岛素水平,最后根据HOMA法计算胰岛素抵抗指数,HE染色确定附睾白色脂肪组织的脂肪细胞是否肥大。结果显示,54 g/kg苦瓜提取物组对小鼠摄食无影响,但小鼠体质量、附睾和内脏白色脂肪组织总质量减少,该剂量的苦瓜提取物显著抑制被提升的血清TG、LDL-C、葡萄糖、胰岛素浓度和胰岛素抵抗指数;而27 g/kg苦瓜提取物则显著降低TG浓度;13.5、27和54 g/kg苦瓜提取物分别显著升高HDL-C水平;苦瓜提取物能剂量依赖性地减轻高脂饮食诱导的脂肪细胞肥大。     

金雀异黄素对小鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖、迁移和黏附的影响

利用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法、细胞划痕实验和细胞黏附实验等研究了金雀异黄素对小鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖、迁移以及与血管内皮细胞黏附的影响;利用免疫荧光实验观察了金雀异黄素对B16BL6细胞中微管和肌动蛋白分布的影响.结果表明,与对照组相比,金雀异黄素可以抑制B16BL6细胞的增殖、迁移和与血管内皮细胞的黏附,影响B16BL6细胞中肌动蛋白的组装,但不影响细胞中微管的组装.这些结果提示,金雀异黄素抑制B16BL6细胞的增殖、迁移和与血管内皮细胞的黏附可能是通过诱导细胞中肌动蛋白的重排来实现的.