酪氨酸酶催化的3,4二羟基苯基丙氨酸氧化反应的动力学分析

对酪氨酸酶催化的3，4二羟基苯基丙氨酸氧化反应进行了动力学分析．用L—DOPA和D—DOPA作为底物，对底物浓度和反应速度测量的结果用Lineweaver—Burk法作图，根据计算所得的米氏常数（Km）表明此酪氨酸酶对L—DOPA表现出更高的亲和性，而催化反应的效率也更高．     

酪氨酸酶催化氧化羟基吡啶类化合物的反应研究

研究酪氨酸酶催化 2 3_二羟基吡啶氧化反应条件 ,结果表明该催化反应的最适pH值为 8 5 ,最适温度是 4 5℃ ,Km 值为 0 32 2mmol L ,并发现当酶量较低时 ,该催化反应存在一个延迟期。研究还表明酪氨酸酶不能催化 2_羟基吡啶和 4_羟基吡啶的氧化反应。根据实验结果 ,探讨了酪氨酸酶催化 2 3_二羟基吡啶氧化反应的机制。     

酶解法制备乌鸡蛋白肽的动力学研究

以乌鸡蛋白为底物,研究了木瓜蛋白酶在酶解乌鸡蛋白制备乌鸡蛋白肽时的一级热失活、拟态条件下的米氏常数,建立了考虑底物反竞争性抑制和产物竞争性抑制等影响因素下的反应动力学模型,并根据实验结果求得在70℃下的酶催化水解反应动力学常数Kd为0.011 3min-1,Km为5.70×10-3mol/L,Kcat为1.589 8min-1,并得到了相应的水解度动力学模型和反应速度动力学模型.     

纤维素酶降解纤维素的最佳酸度和最佳温度的微量量热法研究

用微量热法测定了不同酸度和不同温度下纤维素酶降解纤维素的热功率-时间曲线，应用热动力学理论和对比进度法解析出反应的米氏常数(Km)和最大速率(Vmax)，并得出速率常数k2，建立速率常数与酸度和温度间的关系式，从而获得纤维素酶降解纤维素的最佳酸度和最佳温度。     

静磁场对猪胰脏脂肪酶催化活性和结构的影响研究

将来源于猪胰脏的脂肪酶置于0.45 T强度的静磁场中,在不同温度、不同p H值条件下测定脂肪酶的催化活性,并且对米氏常数、酶蛋白二次结构进行测定,探索低成本方法以提高生物酶的催化活性.实验发现,在磁场存在的情况下,磁化2 h后的脂肪酶的催化活性明显提高.脂肪酶的最佳反应温度和最佳p H值没有因为磁化处理而改变.米氏常数Km和酶促反应最大速度Vmax均发生变化,磁化处理后的酶催化效率高于空白对照组.脂肪酶的构象在经过磁场处理后发生明显变化.     

CTAB对血红蛋白仿过氧化物酶催化活性的影响

本文研究了表面活性剂介质存在下,血红蛋白作为过氧化物模拟酶,以邻苯二酚供氢体底物的催化特性和反应条件,并探讨了表面活性剂对酶催化反应的影响及可能机理,稳态速率法测定了米氏常数（Km）、米氏速率（Vm）及反应级数等动力学参数。试验表明本体系在阳离子表面活性剂CTAB存在和pH10.3的条件下形成的产物在258nm处有最大的吸收峰。     

用Asmus法测K_m值

在酶的动力学研究中,K_m能看作为表观电离常数,它在生物化学中是用米氏方程测定,只要酶和底物结合生成一个有色中间络合物,则K_m能用Asmus法测定,本文在酪氨酸酶催化多巴的反应中,用Asmus法计算K_m值,其结果与米氏方程式相一致。     

用Asmus法测K_m值

在酶的动力学研究中,K_m能看作为表观电离常数,它在生物化学中是用米氏方程测定,只要酶和底物结合生成一个有色中间络合物,则K_m能用Asmus法测定,本文在酪氨酸酶催化多巴的反应中,用Asmus法计算K_m值,其结果与米氏方程式相一致.     

肺炎衣原体中4-羟基苯甲酸脱羧酶的活性

来源于肺炎衣原体AR 39的蛋白质NP_444977其功能未知,但BLA ST分析表明此蛋白质可能具有4-羟基苯甲酸脱羧酶的活性。因此,在大肠杆菌BL 21(DE 3)中诱导表达此蛋白并进行纯化,从而完成酶促反应的分析。结果表明,该蛋白能够催化4-羟基苯甲酸转化为苯酚,证明此蛋白具有4-羟基苯甲酸脱羧酶的活性。金属离子M g2 、F e2 和C a2 能够增强酶活性,但Cu2 和Zn2 却对酶活无影响。酶促反应中最适的pH及温度分别为7.5和30℃。在最适的pH 7.5和30℃的条件下,蛋白质的米氏常数Km为40.1 mm o l/L。蛋白质还具有底物识别的特异性,能够催化3,4-二羟基苯甲酸转化为邻苯二酚,而不能催化2,4-二羟基苯甲酸转化为间苯二酚,这表明苯环上3′位的配基对酶活无影响。     

锌离子对酶法测定抑制作用的研究

基于乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的反应,在最佳酶反应条件下,研究了金属离子对酶催化的抑制作用.发现Zn2 对LDH的酶促反应有显著的抑制,抑制常数KQS为13mmol/L,属非竞争性抑制.根据在抑制剂作用下的米氏方程,可以利用酶法对锌离子进行定量测定.通过加入金属离子络合剂乙二胺四乙酸(EDTA)进行了干扰消除实验,结果表明:可有效消除一定浓度的Zn2 对LDH酶促反应测定底物的干扰.     

重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶催化不同肉桂酸衍生物的酶促动力学研究

4-香豆酸:辅酶A连接酶是杨树木质素合成途径的关键酶之一,催化维管植物木质素合成羟基肉桂酸及其衍生物辅酶A酯化合物的形成.对毛白杨的重组Pt4CL1蛋白的不同肉桂酸衍生物底物的酶促动力学进行了分析,Pt4CL1对肉桂酸、4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸具有催化活性,其中的4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸,Km(μM)值分别为55.02±3.5、52.94±6、44.62±4,Vmax(nM.S-1)值分别为4.23±0.27、4.12±0.11、2.16±0.07;4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kcat(S-1)值分别为44.73×10-3、43.57×10-3、7.61×10-3;对4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kenz(M-1.S-1)值分别为823、812.98、170.55.Pt4CL1对肉桂酸的催化能力很弱,而对芥子酸没有催化活性.结果表明,Pt4CL1对4-香豆酸的催化效率最高,对咖啡酸的催化效率略低于4-香豆酸,而对阿魏酸的催化效率最低,对咖啡酸的催化效率略有很高的转化效率.     

光对黄化玉米叶片PEP羧化酶活性和特性的调节

以玉米为材料，研究了光对其ＰＥＰ羧化酶活性和特定的调节．发现绿苗远比黄化苗中ＰＥＰ羧化酶活性高，光处理后黄化苗中ＰＥＰ羧化酶活性明显增高，这种增高能被环已酰亚胺所抑制，表明是酶蛋白合成致使酶活性增高的过程。绿苗和黄化苗ＰＥＰ羧化酶在Ｋｍ（ＰＥＰ）、Ｋｍ（Ｇ－６－Ｐ）、Ｖｍａｘ和Ｈｉｌｌ系数等动力学常数上存在差异；前者Ｋｍ（ＰＥＰ）、Ｋｍ（Ｇ－６－Ｐ）和Ｖｍａｘ比后者对应的三个动力学常数大，但Ｈｉｌｌ系数比后者小，说明绿苗和黄化营中的ＰＥＰ羧化酶不完全为同一种酶，而是互为同工酶．黄化苗经照光处理后，其ＰＥＰ羧化酶的动力学常数与绿苗．ＰＥＰ羧化酶的动力学常数趋于相同．这进一步证实光诱导黄化苗中合成了ＰＥＰ羧化酶。     

抗性小菜蛾乙酰胆碱酯酶对有机磷及氨基甲酸酯不敏感性研究

福州地区田间小莱蛾Plutella xylostessa L.已对水胺硫磷、克百威、敌敌畏和三唑磷产生高抗,抗性倍数分别为23.52、28.41、16.06和23.43倍.抗性小菜蛾幼虫体内AchE的Km和Vmax值分别为敏感185和0.63倍.水胺硫磷、甲基异柳磷、克百威、敌敌畏对敏感小菜蛾AchE的Ki值分别为抗性的58.75、30.33、198. 87和36.32倍.作者认为AchE对有机磷及氨基甲酸敏感性的降低应是小菜蛾对该类杀虫剂产生抗性的重要机制.     

微量量热法研究酸度和金属离子对淀粉酶催化作用的影响

利用热活性检测仪测定了在不同酸度和有抑制剂时淀粉在淀粉酶催化作用下的热功率-时间曲线.根椐酶催化反应动力学理论和对比进度法对实验结果进行处理,确定了酶催化反应的最适酸度,得到了有抑制剂(Li+,K+)时酶催化反应的表现米凯利斯常数（K′m）和最大速率（Vmax）. 定量比较了金属离子对酶催化反应的抑制效果.     

无机盐对葡萄叶CPOD活性的影响

研究了盐渍下华北葡萄叶过氧化物酶活性变化。分离纯化了一种带正电荷的过氧化物酶（ＣＰＯＤ）并研究了其部分特性。结果表明,在ＮａＣｌ 浓度大于１００ ｍ ｍｏｌ／Ｌ时,叶片过氧化物酶总活性下降,但ＮａＣｌ 浓度为１５０ ｍ ｍｏｌ／Ｌ时ＣＰＯＤ仍不受影响。该ＣＰＯＤ可用ＤＥＡＥ－ 纤维素柱和人造沸石柱纯化,其最适ｐＨ 为６．１４～６．４７,对蛋白的表观Ｖｍ ａｘ 为４ ０８２ Ｕ／ｍｇ,对Ｈ２ Ｏ２ 的表观Ｋｍ 为３．４９ ｍ ｍｏｌ／Ｌ。高浓度无机盐刺激纯ＣＰＯＤ 活性增加,推测该ＣＰＯＤ 可能在葡萄抗盐中有重要作用。     

含磺酸基共聚物水处理剂的合成工艺及性能

以水为溶剂,次亚磷酸钠-过硫酸钠为引发剂,丙烯酸（AA）和1-烯丙氧基-2-羟丙基磺酸钠（COPS-1）为单体合成了含磺酸基的水溶性缓蚀阻垢剂。在装有机械搅拌、回流冷凝管、恒压漏斗和温度计的四口烧瓶中,按一定配比加入次亚磷酸钠、少量助剂和蒸馏水,在一定温度和搅拌条件下,分别同时滴加过硫酸钠水溶液和COPS-1／AA（AA恒为0．4mol）混合水溶液,进行共聚反应。该文实验通过优选法,考察了该共聚物阻垢性能与单体配比、引发剂用量、反应温度和反应时间等之间的关系,寻出了最佳合成工艺条件,研究结果表明,该共聚物的阻垢分散性能明显。     

硫化剂对畜禽粪便中重金属存在形态的影响

基于Tessier五步提取法,通过摇瓶试验考察了硫化钠和乙硫氮两种硫化剂对畜禽粪便中Mn,Zn,Cu和Cr四种重金属存在形态的影响,并探索了硫化剂对重金属离子的固化能力.结果表明,硫化剂的添加能够明显降低畜禽粪便中可交换态和碳酸盐结合态重金属含量,在硫化剂用量为2 g/kg时,畜禽粪便中的重金属达到较好的钝化效果.同时,乙硫氮对四种重金属的钝化性能明显好于硫化钠,在弱酸性环境下仍能明显降低可交换态和碳酸盐结合态重金属含量,而硫化钠在中性和碱性环境下对重金属具有较强的钝化能力.分析化学和结构化学研究表明,硫化钠主要通过S2-或其水解产物与重金属发生反应生成难溶化合物而对重金属产生钝化性能;而乙硫氮主要与重金属离子形成稳定的四元螯合物对重金属产生钝化作用.     

降低方便面中钠含量的研究

实验以KCl取代NaCl,试图在不影响咸度的前提下,降低香辣排骨面料包中的钠含量。以产品的咸度、鲜度、排骨味、浓厚感为指标,对减钠前后的香辣排骨面进行感官品评分析。当NaCl的添加量降低为原添加量的57.3%时,香辣排骨面的钠含量可降低至NRV99%。添加30%~40%的KCl后,感官品评,咸度回升明显,但伴随有一定的金属味和苦味。     

水溶性固体阻垢剂的合成及阻垢性能研究

研究了丙烯酸—烯丙基磺酸钠(AA—SAS)二元共聚水溶性固体阻垢剂的合成工艺及对碳酸钙的阻垢效果。探讨了单体配比、引发剂用量与共聚物阻垢性能的关系,测定了共聚物在不同水质中的阻垢性能。结果表明,AA—SAS水溶性共聚物对CaCO3垢具有很好的防止效果。     

钠在铝液中的活度

以纯钠为参比电极,以含硅的铝-钠合金为待测电极,以Naβ-Al_2O_3固体材料为Na~ 离子导电的电解质,组成无迁移浓差电池,测量电池电动势后计算钠在电极合金中的活度。实验温度为1000K,钠在铝-钠合金中的含量从零至过饱和(约0.26wt-%Na)。结果表明,当钠含量极低时(1.04%Na以下),溶液的性质符合亨利定律,钠的活度系数略小于1;钠含量超过上述范围时,钠的活度系数即迅速增大,溶液呈强烈正偏差;当钠含量达到饱和时,钠的活度即为恒定。