41份有芒小麦HMW-GS组成分析

采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯凝胶电泳法,分析了41份有芒小麦的高分子量麦谷蛋白亚基组成.结果表明,在供试材料中共检测到16种Glu-1位点的等位变异,其中Glu-A1位点上有3种亚基变异类型,分别为Null,1,2*,优质亚基为1,2*,Null出现频率为70.73%,2*占17.07%,1占12.20%;Glu-B1位点有6种等位变异,存在的优质亚基为7+8/14+15/17+18,7+8亚基出现的频率最高,为56.10%,其它亚基类型频率依次为:17+18(17.07%)、7+9(14.63%)、13+16(7.32%)、8和14+15(2.44%);Glu-D1位点有7种类型,仅有一个优质亚基为5+10,2+12亚基出现的频率最高,为65.85%,5+10占21.95%,其次2、10、Dy10w、2+Dy10w、Dy10w+12均为2.44%;这16种变异共形成了17种亚基组合类型,其中Null/7+8/2+12组合类型出现的频率最高,占43.90%,其次为2*/7+9/5+10和N/17+18/2+12分别占9.76%,7.32%,剩余亚基组合类型频率均小于5%.该项研究结果揭示的部分有芒小麦的高分子量麦谷蛋白亚基及其组合类型对小麦品质遗传改良育种具有潜在的利用价值.     

超大穗小麦高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分析了超大穗小麦高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)组成及其F1代的遗传多样性。结果表明,9份超大穗小麦中共检测到7种类型的高分子量麦谷蛋白亚基,在Glu-A1位点,出现了两种亚基,null和1亚基,Glu-D1位点只有2 12一种亚基,而Glu-B1位点上亚基类型最丰富,有4种类型,尤其出现了两种新型的复合亚基组合形式7 9 8和7 9 14 15。遗传分析表明,在超大穗小麦与普通小麦杂交后代F1中,双亲的高分子量麦谷蛋白亚基呈显性遗传,且显母性遗传倾向。     

野生二粒小麦高分子量谷蛋白亚基组成的多态性研究

对来自以色列的38份野生二粒小麦的高分子量谷蛋白亚基(high molecular weight glutenin subunits,HMW-GS)组成进行SDS-PAGE检测,发现其HMW-GS具有较高的遗传多样性.在Glu-A1和Glu-B1位点共有18种可确定的亚基变异类型.其中,A1位点上的亚基1、2*(出现频率分别为60.53%和13.16%)和B1位点上的亚基13+16、14+15与17+18为优质亚基(出现频率分别为26.32%、7.89%和2.63%).同时出现了许多普通小麦所稀有或缺乏的特异亚基类型,如6+8*,7*+9,6+9*,7+9*,20,22等,在2份材料中出现了1种未命名的新亚基类型.     

新疆主栽小麦品种高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

采用SDS-PAGE技术,分析了38份新疆主栽小麦品种（系）的高分子量麦谷蛋白亚基组成．结果表明,38份材料在Glu-1位点共检测到14种等位基因变异类型,其中Glu—A1位点有“1、2＊、Null”3种变异类型,Glu-B1位点有“7、7＋8、7＋9、6＋8、13＋16、17＋18、14＋15”7种,Glin-D1位点有“2＋12、5＋10、5＋12、2＋10”4种．“Null、7＋8、2＋12”是主要亚基,它们的频率分别是55．3％、57．9％和65．8％．亚基组合类型有17种,其中Null、7＋8、2＋12亚基组合占39．5％;1、7＋8、2＋12亚基组合为10．5％,其余亚基组合的频率都在10％以下,不同材料的品质评分在3～10之间,平均评分为6．3．     

野生二粒小麦高分子量谷蛋白亚基等位变异分析

本研究采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法,对从国内外引进的175份野生二粒小麦（Triticum dicoccoides）种质资源高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）Glu1-等位基因组成进行了鉴定和分析.结果表明,175份野生二粒小麦中,Glu-1B位点上的HMW-GS有32种变异类型,比普通面包小麦Glu-1B位点编码的HMW-GS的变异类型丰富得多,其中7＋8和14.1＋15.1亚基分布频率最高（占20.00%）;Glu-1A位点编码的HMW-GS有4种变异类型：1、1^＊、2^＊和Null,一共鉴定了10个新的高分子量亚基.这些新的亚基和等位基因有可能成为面包小麦品质改良的候选基因资源.     

不同来源小麦品种(系)高分子量麦谷蛋白亚基分析

用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）对青海省不同来源114个小麦品种（系）品质得分、高分予量麦谷蛋白亚基构成、等位基因不同亚基变异及出现频率进行了分析。结果表明：小麦品种（系）间高分子量麦谷蛋白亚基组成存在一定差异,国外引进品种和当地培育品系亚基组成多于其他品种,而当地培育品系的分布最均匀;在A1位点上N亚基出现的频率最高,在D1位点上2＋12亚基出现的频率最高;共有25种亚基组合,国外引进的小麦品种和当地培育的小麦品系亚基组合类型明显多于其他品种,（N,7＋8,2＋12）组合的出现频率最高;品质平均得分当地培育品系最高（6．40）。     

新疆引进小麦品种(系)的HMW-GS组成与沉淀值的关系

以新疆近年来引进的32个小麦品种(系)为材料,运用SDS PAGE技术系统分析了其高分子量谷蛋白亚基构成、不同等位基因间亚基变异,并研究了高分子量谷蛋白亚基构成对沉淀值的影响。结果表明:不同亚基对沉淀值的作用不同,其中5 10>2 12,1>N,7 8与7 9的作用相近;Glu l评分与沉淀值呈极显著正相关,r=0.775 。     

151份小麦品种（系）中主要品质基因的分子检测

明确江苏瑞华农业科技有限公司151份小麦品种（系）中品质基因的分布情况,利用分子标记技术对小麦谷蛋白亚基（HMW-GS）、多酚氧化酶（PPO）活性和1B/1R异位系进行检测。结果表明：高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）基因频率Ax2为1.32%,Dx5为17.22%,By8为70.20%,Bx7为89.40%,Ax2+Dx5、Ax2+By8和Ax2+Bx7均为0.66%,Dx5+By8为7.28%,Dx5+Bx7为14.57%,By8+Bx7为62.25%;多酚氧化酶（PPO）活性相关基因频率Ppo-A1b为45.70%,Ppo-D1a为25.83%,双低PPO活性等位基因Ppo-A1b+Ppo-D1a为优异等位基因,频率为8.60%;1B/1R异位系的分布频率为86.75%;同时携带低PPO活性等位变异组合,且为非1B/1R异位系的材料只有2份,频率为1.32%;同时携带谷蛋白亚基Bx7和低PPO活性等位变异组合,且为非1B/1R异位系的材料只有1份,可作为小麦育种材料。     

新疆及外引的部分小麦种质资源高分子量谷蛋白亚基分析初报

利用SDS-PAGE对43个新疆及外引的小麦种质资源高分子量谷蛋白亚基(HMW)的构成、不同等位基因变异及出现频率进行系统分析，并按照Payne等人的评分方法，计算了其品质得分分析。结果表明：43个小麦种质资源的Glu-1的平均分为5．47分，低于全国的平均水平，高分子量麦谷蛋白亚基构成中以2 12亚基居多，5 10亚基较少，部分地影响了新疆小麦品质的改良。     

小麦雌性育性双向极端群体QTL定位策略初探

在极端不育群体中计算重组频率(c值)初步筛选QTL位点的基础之上,利用普通小麦中育性正常的良种藁城8901(P1)与雌性不育系XND126(P2)杂交F2群体中的189株隐性极端不育株和63株极端可育株组成的双向极端群体为定位群体,构建了连锁图,分析定位了小麦雌性育性位点taf1,获得了与F2平衡群体相同的定位位点.分析发现与taf1位点连锁较紧密的标记,其c值较小.利用极端群体的策略能快速有效的定位小麦雌性育性QTL在染色体上的位置.     

小麦核心种质选育研究

用节节麦/野燕麦//偏凸山羊草/硬粒小麦杂交,F1自然加倍成节节麦一野燕麦一偏凸山羊草-硬粒小麦部分双二倍体,连续自交后代分离出普通小麦类型,从中筛选出节燕001-2,具有高分子量麦谷蛋白优质亚基1、5 10、7 9,兼抗条锈病和白粉病,株高44cm,和综合农艺性状优良的特性,经初步研究,矮秆性和抗病性属显性遗传,是一个优良的小麦核心种质.     

新疆春小麦育成推广品种及骨干亲本的高分子量谷蛋白亚基的组成分析

利用SDS—PAGE技术对新疆育成与推广的11个品种和卯年代引进的44个亲本的高分子量谷蛋白亚基组成进行了比较系统的分析。结果表明，引进亲本在G1u—Al位点有2种等位变异类型0和1；Glu—Bl位点有6个等位变异类型：7 8、7 9、13 16、17 18、6 8、7，但主要以7 8为主；G1u—D1位点有2个等位变异类型：2 12、5 10，以5 10为主要类型。在大面积推广品种中，新春5号和新春9号为5 10亚基携带者；新春3号品种携带17 18亚基。上述结果基本反映了20世纪90年代新疆春小麦育成与推广品种和20世纪90年代引进亲本品种的谷蛋白亚基组成的变化情况。     

青海省育成小麦品种Ppo基因的分子检测

为全面了解青海省历年育成小麦品种籽粒中多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)活性的高低,本研究以82份青海省育成小麦品种为研究对象,利用PPO18,PPO16和PPO29这三个功能标记检测Ppo基因在Ppo-A1和Ppo-D1位点的等位变异和基因组成。结果表明:在Ppo-A1位点,有44份小麦含Ppo-A1a(高PPO活性)型等位基因,38份小麦含Ppo-A1b(低PPO活性)型等位基因。在Ppo-D1位点,42.7%的小麦含Ppo-D1a(低PPO活性)型等位基因,57.3%的小麦含Ppo-D1b(高PPO活性)型等位基因。在Ppo-A1和Ppo-D1 2个位点共检测到4种类型的组合:Ppo-A1a/Ppo-D1a,Ppo-A1a/Ppo-D1b(双高PPO活性),Ppo-A1b/Ppo-D1b,Ppo-A1b/Ppo-D1a(双低PPO活性),分布频率分别为24.4%,29.3%,28.0%和18.3%。两个基因组合类型中分布频率最低的是Ppo-A1b/Ppo-D1a(双低PPO活性),分布频率最高的是Ppo-A1a/Ppo-D1b(双高PPO活性)。     

春小麦品种Waxy蛋白亚基的电泳检测

淀粉粒束缚淀粉合成酶,亦称蜡质蛋白（Waxy蛋白）,是合成禾谷类作物胚乳直链淀粉的关键酶。直链淀粉的含量大小对小麦的最终用途影响较大,特别对面条品质的影响尤为重要。本实验用SDS-PAGE电泳方法对国内外115份春小麦品种（系）Waxy蛋白进行了鉴定,从中鉴定出Wx—B1亚基缺失材料16份;Wx—D1亚基缺失材料2份;而全部材料都含有Wx—A1亚基。3个亚基出现频率为Wx—A1〉Wx-D1〉Wx—B1。在所检测材料中没有发现3个亚基都缺失的或其中2个亚基缺失的类型。在缺失Wx—B1亚基的材料中以新疆的春小麦品种居多,占缺失Wx-B1亚基材料的56．3％。     

小麦核心种质选育研究

用节节麦/野燕麦//偏凸山羊草/硬粒小麦杂交,F1自然加倍成节节麦—野燕麦—偏凸山羊草—硬粒小麦部分双二倍体,连续自交后代分离出普通小麦类型,从中筛选出节燕001 2,具有高分子量麦谷蛋白优质亚基1、5+10、7+9,兼抗条锈病和白粉病,株高44cm,和综合农艺性状优良的特性,经初步研究,矮秆性和抗病性属显性遗传,是一个优良的小麦核心种质。     

大熊猫核糖体蛋白S26亚基基因(rps26)的cDNA克隆及序列分析

为了解大熊猫核糖体蛋白亚基rps26基因的结构特点及其与已报道的人和其他哺乳动物核糖体蛋白亚基基因rps26的异同,以大熊猫的肌肉组织为材料,根据已报道的部分哺乳动物核糖体蛋白S26亚基基因(rps26)的相关信息设计引物,运用RT-PCR技术,成功地克隆了核糖体蛋白亚基基因rps26的表达序列,并对其进行了测序及初步分析.结果表明:大熊猫rps26亚基基因的表达序列长为413 bp,开放阅读框(ORF)为348 bp,编码115个氨基酸的蛋白质,该蛋白的相对分子质量为13.025 2×103,等电点为11.61.拓扑预测显示该蛋白含有3个功能位点:1个N-糖基化位点,1个酪蛋白激酶Ⅱ蛄姿峄?位点和1个核糖体蛋白S26e signature位点.进一步分析发现,大熊猫rps26基因与已报道的人、西藏黄牛、野猪、褐家鼠和小家鼠5个哺乳动物物种的表达序列其编码的氨基酸序列具有很高的相似性:编码序列同源性分别为90.23%、91.67%、92.82%、87.36%和86.78%;氨基酸序列同源性均为99.86%.     

山羊草四个组高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

利用SDS-PAGE技术对山羊草属18个种的46份材料进行高分子谷蛋白亚基电泳分析．18个种各电泳出2～5条带，共有24种不同的电泳条带，26种不同的麦谷蛋白亚基类型，每个种有1～3种类型．山羊草与小麦的麦谷蛋白亚基存在着较大的差异，山羊草属中各种间在高分子量麦谷蛋白亚基组成与其亚基的电泳迁移率方面也存在广泛差异．     

大熊猫核糖体蛋白S15A亚基基因（rps15A）的克隆及序列分析

根据已报道的部分物种的核糖体蛋白S15A亚基基因(rps15A)的相关信息设计引物, 运用RTPCR和TouchdownPCR技术, 分别克隆了大熊猫核糖体蛋白S15A亚基的cDNA和结构基因序列, 并进行测序及分析. 结果表明: 大熊猫核糖体蛋白S15A亚基基因的表达序列全长为460 bp,开放阅读框(ORF)为393 bp, 编码130个氨基酸, 结构基因序列全长为6091 bp, 含有4个外显子和3个内含子. RPS15A蛋白的相对分子质量为14.84 kD, pI为10.62. 拓扑预测显示含有5个类型的功能位点, 即: 1个依赖cAMP和cGMP的蛋白激酶磷酸化位点, 2个蛋白激酶C磷酸化位点, 1个乙酰化位点, 1个N 糖基化位点及1个核糖体蛋白S8 signature位点. 进一步对RPS15A蛋白的结构分析及其与部分脊椎动物和果蝇RPS15A蛋白的同源性分析, 发现该基因的表达序列及其编码的氨基酸序列具有很高的相似性, 这表明真核生物核糖体蛋白亚基S15A在进化中具有较高的保守性.     

小麦核心种质选育研究

用节节麦／野燕麦／／偏凸山羊草／硬粒小麦杂交，F1自然加倍成节节麦-野燕麦-偏凸山羊草-硬粒小麦部分双二倍体，连续自交后代分离出普通小麦类型，从中筛选出节燕001-2，具有高分子量麦谷蛋白优质亚基1、5 10、7 9，兼抗条锈病和白粉病，株高44cm，和综合农艺性状优良的特性，经初步研究，矮秆性和抗病性属显性遗传，是一个优良的小麦核心种质。     

转基因小麦T1代中外源基因的检测和分析

该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白质亚基X,表明外源基因的插入引起了转基因T1代籽粒中HMW-GS组成的变化.该研究不仅验证了线性基因片段遗传转化策略的可行性,而且印证了普通小麦Glu-1D等位基因的多重PCR分子标记体系的有效性,为培育安全型的转基因作物新种质打下坚实的基础,加快小麦分子育种进程.