高特异性人血清白蛋白化学发光免疫分析方法的建立

人血清白蛋白(HSA)是人类肝脏功能的重要生物标志物.本研究旨在发展一种具有高度种属特异性和灵敏度的HSA化学发光免疫分析(HSA-CLIA)定量检测方法.通过HSA免疫小鼠,制备了6株HSA鼠单克隆抗体;使用间接化学发光检测(Indirect-CLIA)和West blotting检测方法评价单抗对HSA的反应活性;使用免疫组织化学检测(IHC)和West blotting检测方法评价单抗的种属特异性;选择最佳的包被抗体和检测抗体配对;确定HSA-CLIA的定量线性和范围.West bloting和IHC方法中,4F5和5D2抗体反应性最强,且不与小鼠、大鼠、牛、兔、山羊、猴、鸡等常见实验动物血清白蛋白交叉反应.以单抗5D2配合单抗4F5建立的HSA-CLIA,线性范围达到122~31 250pg/mL,可适用于多种样本的HSA定量检测.本研究发展的单克隆抗体和检测方法为HSA的特异性检测提供了重要工具和手段.     

胰岛素化学发光免疫测定法的建立

目的建立化学发光免疫法测定胰岛素及临床糖尿病患者胰岛素治疗跟踪与稳定性的可行性评估.方法 CLIA采用竞争法.结果该方法的灵敏度为1.24 mIU/L,在2.5～160 mIU/L的范围内线性良好.CLIA测定胰岛素的批内与日间变异系数分别为3.05%,4.61%和4.80%,4.92%.在血红蛋白浓度<2.4 g/L、总胆红素浓度<342 μmol/L、甘油三酯<9.9 mmol/L时的干扰率无临床意义.与放射免疫分析法有较好的相关性(r=0.915 6).结论 CLIA法测定胰岛素能及时有效地满足糖尿病患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制.     

前列腺特异性膜抗原RNA探针的制备

从前列腺癌细胞系LNCaP中提取总RNA，经RT－PCR扩增前列腺特异性膜抗原（PSM）靶序列，将其定向插入带T7RNA聚合酶启动子的pSPORT1质粒，转入大肠杆菌DH5α，经蓝白斑筛选获得重组质粒，以此重组质粒线性化DNA为模板，以地高辛标记的rUTP及其他三种rNTP为底物，经T7RNA聚合酶体外转录，成功地制备了地高辛标记的PSM特异性RNA探针，为研究以PSM为分子生物学指标的前列腺癌分期诊断奠定了基础。     

化学发光酶联免疫分析测定血清中乙型肝炎表面抗原

提出了曙红（Eosin)-H2O-HRP-Luminol化学发光体系测定HRP（辣根过氧化物酶）及HRP标记物的方法。将该方法与免疫分析技术相结合成功地用于测定病人血清中乙型肝炎表面抗原的含量，测定结果与经典的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性好。     

电化学发光法检测前列腺癌特异性抗原标志物的研究

目的：探讨总前列腺特异性抗原（T-PSA）、游离前列腺特异性抗原（F-PSA）及 F-PSA/T-PSA 比值在前列腺癌及前列腺增生的诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法收集病理确诊为前列腺癌患者86例、前列腺增生患者487例和健康体检者188例的血液样本,采用电化学发光法检测检测血清中 T-PSA、F-PSA 浓度,计算F-PSA/T-PSA 比值,比较 T-PSA、F-PSA 和 F-PSA/T-PSA 比值在前列腺癌组、前列腺增生组及正常对照组之间的差异。结果与正常对照组相比,前列腺增生组和前列腺癌组的 T-PSA、F-PSA、F-PSA/T-PSA 的比值差异具有高度统计学意义（p＆lt;0.01）;与前列腺增生组相比,前列腺癌组的 T-PSA、F-PSA、F-PSA/T- PSA 的比值差异也具有高度统计学意义（p〈0.01）。 T-PSA 在4.0～10.0 ng/mL 时,与前列腺增生组相比,前列腺癌组的 T-PSA 差异无显著性（p〈0.05）,F-PSA 差异有显著性（p〉0.05）,而 F-PSA/T- PSA 比值差异具有高度统计学意义（p〈0.01）。结论T-PSA 可作为前列腺癌筛选的一个重要的指标,当 T-PSA 在4.0～10.0 ng/mL 时,F-PSA/T-PSA 用于筛选前列腺癌优于 T-PSA,选择0.15作为 F-PSA/T-PSA 的临界值对前列腺癌诊断有较高的灵敏度和特异度。     

前列腺特异性抗原(PSA)生物学特性研究进展

前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）是由位于第１９对染色体的ＫＬＫ－３基因表达，并受雄激素的调节。ＰＳＡ主要由前列腺细胞合成，为一单链糖蛋白，本质是一种蛋白水解酶。在某些细胞癌变，或在激素刺激下的正常乳腺细胞中也可有ＰＳＡ基因表达。ＰＳＡ在血清以游离（Ｆ－ＰＳＡ）和结合（Ｔ－ＰＳＡ）两种形式存在，血清ＰＳＡ浓度，以及血清Ｆ－ＰＳＡ／Ｔ－ＰＳＡ比值，尿ＰＳＡ浓度的变化等均有助于前列腺疾病的诊断和鉴别诊断。     

增强化学发光酶免疫分析法测定人血清中的乙型肝炎表面抗原

采用对碘苯酚增强的Ｌｕｍｉｎｏｌ－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ化学发光反应体系作为免疫分析的最终检测方法，建立了一种新的乙型肝炎表面抗原的化学发光酶免疫分析方法（ＣＬＥＩＡ）。通过对２．０×１０－１０ｇ／ｍＬＨＲＰ连续１１次测定的相对标准偏差为３．５％，用该方法对人体血清中的乙型肝炎表面抗原进行了测定，其结果与ＥＬＩＳＡ法所得结果一致。     

检测前列腺特异抗原在前列腺疾病患者中临床价值的探讨

目的 探讨前列腺特异性抗原（PSA）浓度变化在前列腺疾病诊断中的应用价值。方法采用电化学发光免疫分析（ECL）法检测71例健康对照者、48例前列腺炎患者、111例良性前列腺增生（BPH）患者和59例前列腺癌（PCa）患者血清巾的PSA浓度，对检测结果进行统计分析：结果前列腺癌组患者血清PSA浓度明显高于其它各组（P〈0．001）；前列腺增生组部分病人血清PSA浓度升高，但局限在一定范围，一般不超过10．0mg/ml；前列腺炎组和健康对照组均在正常范嗣（〈4．0ng／ml）．结论PSA是筛查前列腺癌的灵敏的肿瘤标志物，对良、恶性前列腺疾病有一定的鉴别诊断意义。     

C-肽化学发光免疫测定法的建立

目的建立化学发光免疫法,测定C-肽及临床糖尿病患者胰岛素治疗跟踪与稳定性的可行性评估.方法 LEIA抗原竞争法.结果 CLIA测定C-肽的批内与批间变异系数分别为4.2%和5.0%.结论 CLIA法测定C-肽能及时有效地满足糖尿病患者的临床需要.     

化学发光免疫测定技术在检测肿瘤患者CEA中的应用

目的将化学发光免疫测定(Chemiluminescence immunoassay)方法应用于血清CEA测定.方法以L9(34)正交设计确定化学发光免疫测定方法检测血清CEA的最适实验条件,并对方法的特异性、敏感性和重复性进行评价.结果化学发光免疫测定方法测定血清CEA的最适实验条件为:CEA McAb包被质量浓度10mg/L,ABEI-CEAMcAb结合物使用发光强度为1.0×104mV,Hemin浓度为5μmol/L,H2O2质量分数为0.3%.结论化学发光免疫测定方法检测血清CEA特异性强、重复性好、敏感性超过ELISA和RIA方法,且与ELISA和RIA方法高度相关.     

微粒子酶免疫检测法测定血中FK506的浓度

为探讨微粒子酶免疫检测法（MEIA）测定全血中FK506浓度的可行性和准确性,采用微粒子酶免疫检测法,对血样中的FK506浓度进行检测。用本法检测的血液FK506浓度的结果,其回收率、精密度等均符合要求。说明微粒子酶免疫检测法用于全血中FK506的浓度测定,操作简便、快速、自动化程度高,适用于临床大量样品的测定。     

流动注射-抑制化学发光法测定人血清白蛋白

在碱性条件下,鲁米诺-过氧化氢-叶绿素铜钠体系的化学发光强度较大,而人血清白蛋白对此体系的化学发光有较强的抑制作用,据此采用流动注射技术,建立了一种简单、快速、可连续测定人血清白蛋白的新方法．在最佳条件下,测定人血清白蛋白的线性范围为：2．5～20mg／L,检出限为0．33mg／L．本方法用于血液样品中人血清白蛋白的测定,回收率在97．2％～102．7％之间,结果满意．     

用化学发光法间接测定血清中Na^＋含量的传感器

设计了测定血清中Na+含量的新型传感器。该传感器是基于Luminol-Fe(II)-O2体系的化学发光反应偶联离子再生反应原理来间接测定Na+含量。方法检出限2×10-7mol*dm-3，校准曲线的线性范围5×10-7～1×10-5mol*dm-3，相对标准偏差2.9%（5×10-6mol*dm-3Na+，n=11）。样品分析效率120次/h，传感器使用寿命三天。     

ELISA对毒理实验动物血清中神经生长因子抗体动态的研究

用ＥＬＩＳＡ法对神经生长因子（ＮＧＦ）毒理实验动物犬和大鼠血清作了抗－ＮＧＦ抗体检测。结果表明在大鼠血清中没有发现抗－ＮＧＦ抗体,但犬血清中有相应的抗体产生,并随注射剂量增加和注射时间延长而逐渐升高,另外,对ＥＬＩＳＡ间接法和竞争抑制法进行了比较,结果表明,竞争抑制法明显优于间接法,而且是一种简便、特异的好方法。     

镉标记2.5次微分新极谱法免疫测定人血清白蛋白

建立了Ｃｄ＾２＋标记异相伏安免疫测定人血清白蛋白的方法。用双功能团螯合剂二乙三胺五乙酸酐与ＨＳＡ偶联再与Ｃｄ＾２＋螯合间接标记ＨＳＡ。异相竞争免疫反应在酶联板孔进行。     

由其对应丛确定的正则半群

设S是一个半群,S×S的所有子半群(含空半群),按照二元关系的复合(o)、逆(-1)及集合包含关系(∈)构成了S上的对应丛.记为(C(S),o,-1,∈)或简记为C(S).如果对任何半群T,只要C(S)≌C(T),就有S≌T或S≌TOPP,则称半群S是C-确定的.Goberstein S M研究了基本逆半群及基本纯整半群的C-确定性.这里主要证明非周期群并的基本正则半群都是C-确定的.Goberstein S M所得到的结论都成为本文所得结果的推论.     

一些由它的邻接谱和角确定的图

探讨了“哪些图由它的邻接谱和角确定的问题”,利用同谱图的顶点度序列以及顶点度对序列的特点,证明了一些特殊结构的图,如冠图Cn°K1,Pn°K1,单轮图,树Ta各自由它们的特征值和角确定．     

前S1抗原的检测及其与HBV血清标志物之间关系的探讨

目的了解前S1抗原和乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物常见模式之间的关系,探讨前S1抗原检测的临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法对269例HbsAg阳性血清进行前S1抗原检测,并与相应的HBV血清标志物模式进行比较分析.结果HbeAg阳性组的前S1抗原阳性率无显著差别(P>0.05),HbsAg阳性组的前S1抗原阳性率也无显著差别(P>0.05).而HbeAg阳性组和HbsAg阳性组之间前S1抗原阳性率则存在显著差别(P<0.01),后者阳性率较高.结论前S1抗原与HBV血清标志物之间有一定关系,临床上宜将两者结合起来检测,综合判断.     

最大熵确定真ODF准确度的研究

采用Taylor模型和{110}〈111〉滑移形变机制构造了BCC金属冷轧织构的真ODF和简化ODF;并以简化ODF为初始条件用最大熵法求算了对应的近真ODF,与真ODF对比表明最大熵法确定的近真ODF具有良好的准确度。