3,5-二硝基水杨酸降解菌的分离鉴定及生长条件初探

从污染的土样中分离到一株高效降解3,5-二硝基水杨酸的菌株E-2,它能够在以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源和能源的无机培养基上生长。根据菌株E-2的形态特征及生理生化反应特征,初步鉴定为盐芽孢杆菌属(Halobacillus Spring et al.)。研究表明:此菌能以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源进行生长,最适合浓度为0.05%,pH值为8.0,温度为30℃,培养5天后降解率为85%。     

牛源纤维素降解菌的分离筛选与鉴定

为了提高牛粪中的纤维素降解效率,筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种,采用连续稀释平板法,以羧甲基纤维素纳(CMC-Na)为碳源,从新鲜牛粪和腐熟牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离.对所得菌株进行纤维素水解圈测定,并进一步采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活,再结合菌落形态、生化反应特性和16S rDNA序列分析进...     

产纤维素酶沙棘根瘤内生放线菌的筛选、鉴定及其酶活性测定

以中国沙棘根瘤中分离纯化得到的内生放线菌为材料,筛选高产纤维素酶的菌株,并对其产生的纤维素酶活性进行检测.实验以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,结合CMC-Na刚果红染色水解圈法筛选得到1株高产纤维素酶的放线菌,利用插片法观察其显微形态特征,结合生理生化试验及16S rRNA基因序列分析,鉴定出该纤维素酶高产菌为橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus).通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定该菌株产纤维素酶的活性,并利用单因素法对该菌株的产酶条件进行了优化.结果表明,该菌株产纤维素酶的最适pH为7.0,温度为28℃、160 r·min~(-1)振荡培养48 h后,该菌株所产生的纤维素酶活性最大,酶活性为46.3 U·mL~(-1).     

柴油脱硫菌的筛选及发酵条件研究*

首先以二甲基亚砜为唯一硫源,通过初筛,筛选出28株菌株,再以二苯并噻吩（DBT）为唯一硫源复筛,筛选出降解DBT较好的菌株HT1。菌株液体发酵实验表明,菌株HT1生长的最适pH值为6.5～7.5,最佳温度30℃;酸性和碱性条件均对菌株的生长有抑制作用,二苯并噻吩降解能力降低;以葡萄糖作为碳源菌株生长最好,但存在底物抑制作用,以甘油作为碳源时,菌株生长及DBT降解能力略低,但不存在底物抑制作用;菌株HT1既能利用有机氮源也能利用无机氮源,但利用有机氮源的能力远远大于无机氮源,对DBT的降解能力却正好相反,其中以硝酸铵作为氮源时,对DBT降解能力最大。最终确定甘油为最佳碳源,浓度为5 g/L,硝酸铵为生长氮源,最佳浓度为2 g/L。     

5-氨基水杨酸的合成研究

以水杨酸为原料,分别采用浓硝酸和稀硝酸作为硝化试剂,对硝化后的反应液用水重结晶,热滤出的固体部分为5-硝基水杨酸,液体部分冷却后析出副产物3-硝基水杨酸,用浓硝酸制得的5-硝基水杨酸的收率为30.0%,用稀硝酸硝化收率为38.5%.采用混酸硝化,主要制得另一副产物3,5-二硝基水杨酸.将5-硝基水杨酸用铁粉还原制得5-氨基水杨酸.5-氨基水杨酸结构经红外吸收光谱分析确证与文献相符;各主、副产物的熔点均与文献报道相符.该合成方法成功合成了5-氨基水杨酸.同时提供了两种制备和分离5-硝基水杨酸和3-硝基水杨酸的方法,两种方法相比,稀硝酸硝化的收率更高.     

苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究

从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解苯酚的最佳条件为温度30℃,pH7.0.在最佳条件下,GXY-1对600mg/L苯酚的降解率在60h时达99%以上.同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长.测定了降解途径中相关酶的活性,表明菌株GXY-1是通过邻苯二酚1,2双加氧酶催化开环来降解苯酚.该菌株粗酶的最适反应pH为7.8,最适反应温度为40℃.     

SDBS降解菌的筛选及其降解特性研究

为筛选纯化和研究SDBS降解菌的生物学及降解特性,通过富集、分离与纯化,从长期受洗涤剂、除草剂和有机磷污染的土壤中,分离出4株能以十二烷基苯磺酸钠(SDBS)为唯一碳源的细菌,这4株菌分别为2-1,2-2,C-1和X-4.在选定的最适条件下,测定了4株菌对SDBS的降解能力.SDBS质量浓度达500 mg/L时,菌株2-1仍能很好地生长且继续进行降解,SDBS的降解率达到了94.78%;菌株2-2的降解率为91.09%.     

高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

为了获得高效石油降解菌种,以原油为唯一碳源,从油水混合物中分离筛选出菌株.研究不同的温度、转速等对菌体生长情况和石油降解率的影响.在实验条件下,2株优势菌在适宜的条件下对石油的降黏率可分别高达28.5%、51.5%.偏酸或偏碱环境均不利于菌体生长,培养温度对2株菌体生长和石油降解率影响较大,最佳温度是35℃.在高矿化度条件下,菌株对原油仍有降解作用,降黏率为40%以上.原油组分分析结果表明,菌种在以原油为碳源培养后,使原油组分中沥青质、非烃及芳烃类含量均发生变化.     

1株海洋石油降解菌的筛选鉴定及其固定化研究

从受石油污染的海洋沉积物中分离得到1株能以柴油为唯一碳源生长的菌株LHOD-2,通过形态特征、生理生化及16SrDNA序列分析,初步鉴定菌株LHOD-2属于埃氏假交替单胞菌(Pseudoalteromonas espejiana).利用聚氨酯泡沫为载体制备固定化菌,并对其降解特性进行考察.实验结果表明,菌株LHOD-2的最佳生长降解条件为温度25~30℃,pH 7.0~8.0,盐度(体积分数)3%~3.5%,转速150r/min.在最佳条件下,LHOD-2对800mg/L柴油在120h内的降解率达到85%(质量分数).聚氨酯泡沫载体具有大孔网状结构,利于菌株生长和传质,固定化菌降解柴油的速率明显高于游离菌.     

甲苯降解菌降解特性及代谢途径初步研究

从污泥中分离得到1株能以甲苯为唯一碳源和能源生长的细菌菌株,经过生理生化实验初步鉴定为假单胞菌属.温度在20～40℃之间、pH7、甲苯浓度在316 mg/L以下,菌株降解甲苯的效率保持80%～100%之间,甲苯浓度大于316 mg/L,出现抑制现象.甲苯降解途径是通过甲苯双加氧酶形成顺甲苯二氢二醇,再经邻苯二酚2,3双加氧酶开环降解.     

2,4,6-三氯酚的共基质降解机理

分别利用经过驯化的葡萄糖降解菌和2,4,6-三氯酚（TCP）降解菌,通过添加易生物降解的有机物（葡萄糖、苯甲酸、苯酚）作为共基质,对TCP进行好氧生物降解,以考察其降解机理．当利用葡萄糖降解菌降解TCP时,在没有共基质存在时,微生物经历51h的适应期之后,才能生长,与此同时可利用TCP作为唯一碳源而使其降解．当有共基质存在时,TCP几乎没有降解．而当利用TCP降解菌降解TCP时,在没有共基质的条件下,只需43h的适应期可使TCP得到降解．实验结果表明：由于在没有共基质存在的条件下,葡萄糖降解茵和TCP降解菌均能利用TCP作为唯一碳源得到生长,并使TCP同时得到降解．因此在有共基质条件下,使TCP的降解效率提高的机理为次级利用,而非共代谢．     

一株DBP高效降解菌的筛选及其降解特性

从污染土壤中筛选到一株能够以酞酸酯(Phthalic acid esters,PAEs)为唯一碳源和能源生长的微生物,命名为JDC-11,对其进行鉴定和降解特性研究,并考查不同葡萄糖浓度对其降解的影响。采用形态学、生理生化和16SrDNA序列分析进行鉴定。采用高效液相色谱(HPLC)测定菌株JDC-11在摇瓶中对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的降解能力。研究结果表明:该菌株为Rhodococcussp.;最佳降解条件是温度为30℃,初始pH值为8.0,转速为175r/min,在此最佳条件下,JDC-11能够在24h内将1g/LDBP完全降解,证明JDC-11是一株高效降解菌。在降解过程中的前12h,葡萄糖的存在均抑制DBP的降解,12h后,200mg/L的葡萄糖仍抑制降解,而质量浓度≥400mg/L的葡萄糖加速了DBP的降解效率。     

Plasmid-related anaerobic autotrophy of the novel archaebacterium Sulfolobus ambivalens

Three different species of the genus Sulfolobus, S. acidocaldarius, S. solfataricus (= Caldariella) and S. brierleyi, have been distinguished by the conditions required for optimal growth, by the component patterns of their DNA-dependent RNA polymerases and by DNA sequence data. Many isolates of these species are able to grow chemolithoautotrophically using CO2 as the sole carbon source and the oxidation of S(0) with O2 yielding sulphuric acid, as the energy source, though a few others grow only heterotrophically. We show here that a strain of a novel Sulfolobus species, S. ambivalens, is alternatively able to live by an anaerobic mode of chemolithoautotrophy, also using CO2 as the sole carbon source, but using reduction of S(0) with H2, yielding H2S as the energy source. This mode of growth is correlated with the amplification of a plasmid, pSL10.     

芽孢杆菌L-32发酵条件优化及提高原油采收率实验研究

经筛选得到了一株能以原油为碳源进行生长繁殖的菌株 ,初步鉴定为芽孢杆菌 (L 32 ) ,对其发酵条件进行了优化 ,确定出最佳的发酵条件 ,并确定了厌氧条件下以原油为碳源时的培养基成分。通过补加葡萄糖使其浓度保持在8g/L的方法可以提高菌体的浓度。实验结果表明 ,L 2 3可以以原油为碳源生长 ,并能在降低原油粘度的同时使原油培养基内水相的pH值下降。L 2 3能提高实验岩心的原油采收率 ,即在关井 96h后 ,L 2 3可使原油采收率提高 9.6 %左右。     

解酚假单胞菌的分离及毒物降解的特点

在假单胞菌中有些株可以降解芳香类有机物,另一些株可以抗重金属.某些芳环化合物如苯酚等,及含汞的化合物都是可以造成环境污染的有毒物质.对假单胞菌降解水杨酸等芳香化合物的途径已有一些了解,但少有涉及代谢的调控问题.本文报道一株从化学工业污染区域新分离到的假单胞菌.这株菌不但可以降解水杨酸、苯甲酸及邻苯二酚,而且还能降解毒性较强的苯酚,并具有耐受一定浓度Hg~(2+)的能力,是一株有前途的去污染工程菌.对该菌降解混合芳香化合物的研究发现,邻苯二酚在这些芳香化合物降解代谢中是一个具有调节作用的物质.     

Cupriavidus metallidurans CH34中2个苯酚降解基因簇的筛选与功能鉴定

Cupriavidus metallidurans(C.metallidurans)CH34是一种重金属耐受性细菌,能在以苯酚、甲苯酚、苯甲酸、苯胺等芳香族化合物为唯一碳源和能源的培养基中生长,其基因组中含有2个苯酚降解基因簇.以载体pIndigo-BAC 5构建C.metallidurans CH34的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库,获得约3万个克隆,平均插入片段大小为30 kb,插入频率为98%,推测该文库覆盖CH34基因组约1 240倍.用PCR筛选文库中的3 000个单克隆,共获得9个阳性克隆,其中5个克隆含有长基因簇,4个含有短基因簇,并从中得到含有全长苯酚降解基因簇的克隆.利用以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基,研究2个基因簇在大肠杆菌中的表达情况.结果显示,两个基因簇均表现出了苯酚降解能力,短簇的降酚能力要优于长簇.     

邻氯硝基苯降解菌Pseudomonas putida OCNB-1的分离、鉴定与降解质粒研究

摘要：以邻氯硝基苯为唯一碳源、氮源和能源从某化工厂废水处理站分离出一株细菌, 经微生物自动测定仪WSVTK-R07.02和16SrRNA扩增测序鉴定为Pseudomonas putida;在 培养基pH为8.0,培养温度32 ℃,摇床转速120 rpm 条件下考察了该菌株降解邻氯硝基苯的能力, 菌株42 h内将起始浓度为1.07 mM的对邻氯硝基苯降解近80%;经质粒检测,在菌株OCNB-1中发现一条质粒条带,选用7种内切酶对质粒pOCNB-1进行单酶切,得出质粒大小约为32 Kb;抗生素抗性实验表明菌株对红霉素、氨苄青霉素、青霉素钠的抗性与质粒无关,对利福平、氯霉素的抗性与质粒有关;通过细菌接合,质粒转移到无降解邻氯硝基苯能力的Pseudomonas.stutzeri受体菌中,接合子Pseudomonas.stutzeri能利用邻氯硝基苯为唯一碳源、氮源和能源,证明质粒为降解质粒。     

酚降解菌的筛选及含酚废水处理研究

从土壤中分离得到可在含酚培养基上生长的细菌。通过菌种驯化,筛选出耐高浓度酚的菌株,在实验室条件下,进行对含酚废水的处理,其中部分菌株可分别在12～24小时内将1000毫克/升的苯酚完全去除。基质不同对酶活力大小有影响,在以苯酚为唯一碳源的基质中,多酚氧化酶活力最高。