诱导胰腺干细胞再生胰岛治疗糖尿病的研究

近年来,随着免疫抑制剂的改进及细胞移植技术的不断成熟,胰岛细胞移植已成为治愈Ⅰ型和部分Ⅱ型糖尿病的有效治疗方法,而胰岛供体短缺的矛盾亦更为突出．胰腺干细胞是一类存在于胎儿或成年胰腺组织中的成体干细胞．体外分离、克隆胰腺干细胞,并定向诱导其分化为功能性胰岛移植治疗糖尿病,是解决胰岛供体短缺的有效途径．目前,该研究已成为组织细胞工程研究的又一热点．文中综述了这一领域研究的最新进展．     

丹妮丝·福斯特曼 胰岛复活

福斯特曼认为,Ⅰ型糖尿病患者的胰岛细胞可以再生,分泌胰岛素的功能也可以恢复。后来,她又提供了确凿的数据,证明胰岛的确可以再生。她还暗示,移植的脾脏细胞也可以转化为胰岛细胞。Ⅰ型糖尿病源于免疫系统攻击自身的胰岛细胞。与Ⅰ型糖尿病不同的是,Ⅱ型糖尿病起因于机体对胰岛素功效的耐受性。     

Aurora-A对2型糖尿病小鼠模型中胰岛细胞增殖的影响

为研究Aurora-A在2型糖尿病小鼠中对胰岛细胞增殖的影响,通过Western blot、免疫组织化学染色、增殖细胞核抗原(proliferating cell nucler antigen,PCNA)染色等方法研究了Aurora-A在2型糖尿病小鼠胰腺组织中的表达以及抑制AuroraA后糖尿病小鼠胰岛细胞的增殖情况。将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组8只,分别为空白组、高脂饮食组、模型组和治疗组。模型组和治疗组采用高脂饲料(high fat diet,HFD)联合链脲佐霉素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射造模,造模成功后治疗组以Aurora-A抑制剂连续灌胃2周;模型组则以等量的生理盐水灌胃。经药物干预后采用PCNA染色检测各组小鼠胰岛细胞的增殖情况。结果表明:与空白组相比,Aurora-A在模型组胰腺组织中明显表达升高;与模型组相比,治疗组小鼠经Aurora-A抑制剂治疗后胰岛细胞增殖率明显降低。可见,Aurora-A在2型糖尿病小鼠胰腺组织中表达升高;并对胰岛细胞的增殖起着重要的作用。     

糖尿病的干细胞疗法

糖尿病的治疗目前集中于细胞的替代疗法。供体器官的短缺激发了对如何产生beta细胞的研究。目前，胰岛的扩增，胰岛的异种移植，人胰岛细胞系的开发，干细胞的分化都是热点。干细胞的治疗包括胚胎干细胞和成体干细胞。本文讨论干细胞向胰腺beta细胞分化的各种可能性。     

胰岛炎症导致的2型糖尿病发病过程的动力学模型及治疗策略

为了揭示胰岛炎症导致2型糖尿病发生发展的机制,建立胰岛 β 细胞和巨噬细胞相互作用的数学模型,包括IL-1β 的产生和巨噬细胞的浸润过程,研究高浓度葡萄糖和游离脂肪酸对IL-1β 的共同作用,揭示胰岛炎症在2型糖尿病进程中的动力学机理.通过对模型中动力学参数的敏感性分析,提出针对不同患病情况的可能的优化治疗策略.     

空肠异位胰腺伴胰岛细胞瘤样增生并肠梗阻误诊为神经内分泌肿瘤病理分析

目的探讨小肠异位胰腺的临床病理学特征及鉴别诊断.方法观察1例空肠异位胰腺伴胰岛细胞增生并发肠梗阻患者的临床表现,依据组织病理学特征并结合相关文献讨论其临床病理特点.结果患者术中空肠系膜缘对侧肠壁见一肿物,大小约2 cm×1 cm×0.8 cm,表面呈结节样,质地韧,活动度差,术中行快速病理学检查,结果为(空肠)神经内分泌肿瘤,术后石蜡切片结果为空肠异位胰腺伴胰岛细胞增生.结论异位胰腺是一种比较罕见的先天性异位器官,大量增生的胰岛细胞单独存在,呈团状.石蜡切片显示:空肠黏膜下有腺泡、导管及胰岛结构,系胰岛细胞增生.     

巴马小型猪胰腺解剖学特点

摘要:胰腺是重要的消化器官。 以往关于猪胰腺的解剖组织学研究,主要侧重于血管和导管的分布。 本研究利用本课题和其他课题中的 24 头对照组动物,观察和测定巴马小型猪胰腺的组织形态学数据。 结果表明:巴马小型猪的胰腺形态变异较大,大体结构可分为 3 个叶,即脾叶、十二指肠叶和连接叶;初步分为 3 种类型,即标准型、纤细型和粗壮型;24 头猪中,3 种类型分别占比 16 / 24、6 / 24 和 2 / 24。 胰腺占比体质量的 0. 09% ~ 0. 15%。 巴马小型猪的胰岛普遍较小,以超小胰岛居多。 胰岛占比胰腺的 1. 52% ~ 4. 98%。 胰岛 β 细胞占比体质量的 0. 012‰ ~ 0. 024‰。     

糖尿病是遗传病吗?

<正>A:糖尿病(diabets mellitus,DM),是最常见的一类内分泌代谢病。有人估计,我国糖尿病患者高达约7000万。胰腺是人体内重要的腺体,根据细胞组成和功能不同,又可以分为外分泌腺(分泌胰液,消化食物)和内分泌腺(分泌多种激素,起到不同生理作用)两大类。在胰腺的腺泡组织之间,约有100万~200万个胰岛细胞,它们执行着胰腺的内分泌功能,其中的B细胞(也叫β细胞)可以分泌出一种含有51个氨基酸残基的小分子蛋白质,就是著名的胰岛素。作为一种蛋白质类激素,胰岛素的生理作用非常复杂,它既是全面促进机体合成代谢的关键激素,又能够调节细胞的生长、增殖,并抑制细胞的凋亡。非常特别的是,胰岛素还是体内惟一     

胎肝Sca-1+细胞治疗STZ诱导小鼠糖尿病的实验研究

目的探讨小鼠胎肝组织中的干细胞抗原1阳性的细胞(Sca-1+细胞)治疗链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病鼠的潜能.方法取14.5 d的C57BL/6J小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca-1+细胞,将2×105个雄性小鼠Sca-1+细胞输注到STZ诱导的C57BL/6J雌性小鼠体内,以后每7 d定时测定小鼠血糖,第38 d处死受体小鼠取胰腺组织固定、切片,免疫组化观察胰腺组织中胰岛素阳性的β细胞变化.结果小鼠胎肝Sca 1+细胞能够有效抑制STZ诱导小鼠血糖的持续升高,明显降低糖尿病鼠的死亡率.受体小鼠胰岛细胞结构清楚,其中可见表达胰岛素的β细胞,荧光原位杂交显示小鼠胰岛内有Y染色体阳性杂交点.结论小鼠胎肝Sca-1+细胞具有一定的治疗小鼠糖尿病的作用.     

C肽释放试验、谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞自身抗体的测定在糖尿病诊断中的临床意义

目的 探讨C肽释放试验、谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞自身抗体的测定在糖尿病诊断中的临床意义.方法 采用放射免疫分析法(RIA)检测30例Ⅰ糖尿病(DMⅠ)患者及50例Ⅱ型糖尿病(DMⅡ)患者的C肽释放试验、谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞自身抗体.结果 谷氨酸脱羧酶抗体阳性率DMⅠ患者为73.3%,与DMⅡ患者为12%相比,显著增高(P<0.01);DMⅠ患者C肽释放试验、胰岛细胞自身抗体水平平均显著低于DMⅡ患者(P<0.01).结论 谷氨酸脱羧酶抗体是胰腺β细胞功能损伤的一个预测指标,结合C肽释放试验、胰岛细胞自身抗体的测定有助于对糖尿病的诊断与疗效监测.     

家兔胰腺再生期間的組織学、組織化学和生物化学研究

(一) 結扎家兔胰导管,使胰腺退化至5天或7天时,重新使其恢复暢通,胰腺組織可以再生。在其再生过程中,腺体内淀粉酶活力的变化是随腺体的再生时間的延长而逐漸增强的,而血液淀粉酶活力則仍維持正常水平不变,說明在胰腺功能的退化和再生期間,血液淀粉酶可能不是由胰腺而来的。 (二) 随着家兔胰腺腺泡細胞的新生,腺泡細胞内RNA及脂肪酶的組織化学反应又重新出現,并逐漸恢复增强,且与胰腺内淀粉酶活力上升的变化有平行关系。 (三) 家兔胰腺再生过程中,用組織化学显示碱性磷酸酶的方法証实在胰腺退化期間已扩大的閏管可以逐漸恢复到正常时期的細长形态。 (四) 家兔胰腺再生初期(4天),腺細胞的核与核仁的容积增大,是随着腺体再生时間的延长而恢复到正常。 (五) 本实驗用显示腺泡内的脂肪酶,RNA和閏管細胞的碱性磷酸酶的組織化学方法进一步証实了家兔胰腺再生过程中,腺泡細胞的来源問題,結果表明在胰腺退化期間残留着的腺泡細胞能重新回生成为新的腺泡細胞,同时閏管細胞亦能分化轉变成为腺泡細胞。     

糖尿病小鼠胰腺腺泡细胞的超微结构和酶原颗粒的定量分析

本文用四氧嘧啶将小鼠建造成糖尿病动物模型。８周后，取胰尾组织作电镜观察，对腺泡细胞的超微结构和酶原颗粒的定量分析进行了研究。结果表明：糖尿病模型小鼠胰腺腺泡细胞中粗面内质网扩张、脱颗粒；线粒体峪紊乱或断裂；胞浆内出现许多髓样小体；酶原颗粒数（Ｎ值）减少（Ｐ＜０．０１），体密度（Ｖｖ值）降低（Ｐ＜０．０１）。显示：实验性糖尿病小鼠胰腺腺泡细胞超微结构和酶原的合成受到一定程度的损害。     

人胎胰腺组织细胞培养的研究

取4至8个月龄的胎儿胰腺组织,培养7至8天的胰岛细胞生长最旺盛,胰岛素分泌量最高(2500u/ml),但随着培养时间的延长,分泌量随之下降,组织逐渐解体,细胞老化。若培养至10天时加入11.1m/ol葡萄搪激动因子,对细胞生长有良好的激发作用。经冰冻保存两个月的胰腺细胞在37℃复温后培养仍能生长。组织学观察胰線的胰岛分布,胰尾比胰头多,但培养到第五天以后,外分泌腺泡发生变性,而腺管上皮细胞仍生长良好。     

赤腹松鼠消化腺组织学观察

研究了赤腹松鼠消化腺组织学结构.结果表明:消化腺由小消化腺和大消化腺组成.小消化腺由单管泡状腺的舌腺,单管状腺的胃腺、小肠腺和大肠腺以及管泡状腺的十二指肠腺构成;食管内未见食管腺,大肠内可见大量杯状细胞.大消化腺有大唾液腺、肝和胰腺.大唾液腺由腮腺、舌下腺和颌下腺组成,均为复管泡状腺.肝脏分为5叶,由肝小叶和门管区组成.肝小叶包括中央静脉、肝细胞索和肝血窦,门管区内有小叶间动脉、小叶间静脉和小叶间胆管.胰由外分泌部的复管泡状腺胰腺和内分泌部的胰岛构成.研究结果表明赤腹松鼠消化腺结构与其食性是相适应的.     

結扎家兎胰导管后胰腺内的組織化学变化与胰腺内及血液內淀粉酶活力变化的关系 (Ⅰ)胰腺內脂肪酶的组織化学变化的观察

(一)在正常饥饿24小时的家兔胰腺组织中,以组织化学既显示的脂肪酶是分布于腺泡细胞近腺腔端;而大小导管,胰岛细胞和血管壁皆呈阴性反应。在胰腺组织不同部位的腺细胞中脂肪酶活力强弱不一,特别是胰岛周围反应较强。 (二)在结扎胰导管过程中,脂肪酶的组织化学反应发生显著变化;结扎后第一天酶反应加强,自结扎胰导管的第三天开始至第十三天脂肪酶皆呈阴性反应。 (三)在结扎胰导管过程中,组织化学显示的脂肪酶变化和生物化学上测定的血液和腺体内淀粉酶的变化有平行的关系,并和腺细胞中RNA的变化有一致的趋势。     

鳖胰腺和胆囊组织学的初步观察

鳖胰腺为弥散型,其外分泌部为浆液性的复管泡状腺,腺泡由单层锥体形或矮柱状细胞围成,导管可分为闰管、小叶内导管、小叶间导管和胰总管等;内分泌部的胰岛很小,大多由几个或十几个内分泌细胞组成.胆囊壁由黏膜、黏膜下层、肌层和外膜组成,黏膜上皮为单层高柱状细胞,疏松结缔组织,肌层为平滑肌和弹性纤维,外膜为薄层结缔组织.     

链球菌制剂预防性治疗实验动物糖尿病机理研究

为了探讨链球菌制剂预防性治疗糖尿病的机理,以纯系的自发性糖尿病NOD小鼠和链脲霉素诱导糖尿病鼠为动物模型,从5周～20周皮下注射链球菌制剂0.1 mg/只,对照组注射等量生理盐水,观察其发病率.至40周时链球菌制剂组均未发病,而生理盐水组发病率为70%.取胰腺组织作病理切片,Fas、FasL染色及胰岛β细胞染色.未发病鼠无Fas表达,但有FasL的表达;已发病鼠有Fas的表达;经链球菌制剂免疫后小鼠有FasL表达.相同的结果也出现在以链脲霉素(STZ)诱导的迟发型糖尿病模型鼠中.链球菌制剂可能通过改变Fas L/Fas系统在胰腺组织的表达,来预防性治疗糖尿病,发挥免疫调节作用.     

胰腺特异性表达Hes1基因的构建及体外表达

为了探究胰腺的发育机制,以及制备胰腺缺陷型的小型猪模型,构建了特异性表达载体,开展了相关载体构建及体外验证研究.本研究以小鼠PDX1启动子为特异性启动元件,构建胰腺特异性启动小鼠Hes1基因的表达载体PDX1-Hes1,载体转染MIN-6胰岛β细胞、猪耳成纤维细胞及猪肾细胞,培养48h后,通过qRT-PCR、Western Blot检测.结果显示:Hes1在MIN-6胰岛β细胞中的RNA水平和蛋白水平均高效表达,而在非胰腺细胞猪耳成纤维细胞及猪肾细胞中均不表达.试验表明:胰岛特异性表达载体PDX1-Hes1的成功获得,为构建相关基因在胰腺中特异性表达的载体提供参考,为后续制备胰腺缺陷型的小型猪提供了条件.     

自发性糖尿病小鼠C57BL/KsJ-db/db某些脏器组织病理学观察

目的观察自发性糖尿病C57BL/KsJ-db/db小鼠胰腺、肾脏、睾丸和卵巢的常规病理变化。方法取血糖高于10.1 mmol/L的2、7、12月龄db/db纯合仔小鼠,摘眼球放血后取胰腺、肾、睾丸、卵巢放入10%福尔马林溶液中,HE染色,常规病理切片。结果 7、12月龄胰腺见淋巴细胞浸润,部分胰岛体积较大,小导管样病变有增生扩张及潴溜;小鼠肾脏见部分肾小球细胞数增多,系膜细胞增生,系膜基质增多;卵巢较小,卵泡较少,未见黄体;睾丸生精功能弱。结论 C57BL/KsJ-db/db小鼠的自发性糖尿病会在一定程度上出现胰腺、肾脏、睾丸和卵巢等脏器发生病理改变。     

从人胎胰腺分离完整胰岛的方法

采用 Hanks’(4℃)液自胰管灌注使胰腺膨胀,或用多点注射法使胰腺浆膜扩张,整个胰腺则清晰可见,此时迅速摘除并清除它周围的血管及结缔组织,用Hanks’液清洗整个胰腺并将它快速剪碎,然后加入胶原酶、胰酶消化,再经过滤和 Ficoll 密度梯度离心,使人胎胰腺中的胰岛有效地被分离并将其收集。胰岛的纯度达80％,通过体外活染,表明胰岛具有活性。通过放免法测定,游离胰岛及胰岛分散为单个细胞的分泌能力正常,在离体中对葡萄糖急性刺激能产生反应。