内蒙古白绒山羊的体细胞克隆

内蒙古白绒山羊是具有悠久历史的绒肉兼用的品种,对荒漠和半荒漠环境有较强的适应性.山羊绒是来自绒山羊的细绒毛,具有极高的商业价值.为了扩大优秀绒山羊数量,本试验尝试利用体细胞克隆技术进行绒山羊克隆研究.从一只成年优秀公绒山羊中,取其耳缘组织,培养获得成纤维细胞.从当地屠宰场获得山羊卵巢,抽取卵母细胞并体外培养成熟.然后以绒山羊成纤维细胞为核供体,通过体细胞克隆技术生产克隆胚胎.核移植重构胚的融合率、卵裂率和囊胚发育率分别为75.8%,72.6%和11.6%.将处于1-至2-细胞期的胚胎移植入同期发情受体母山羊输卵管中,于2009年4月30日诞生了一只克隆绒山羊.该克隆羊的生长状态及产绒量与细胞核供体山羊相一致,呈现良好的发育态势,说明体细胞克隆技术可以成为良种绒山羊的扩繁途径.     

抗人端粒酶逆转录酶单链抗体基因在烟草中的表达

构建了含抗人端粒酶逆转录酶单链抗体基因ScFv-hTERT的植物表达载体p1304-SH,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草.转基因烟草植株叶片总DNA的PCR,Southern b lot检测结果表明,ScFv-hTERT基因已整合进了转基因烟草植株基因组中;RT-PCR,SDS-PAGE分析证实目的基因已在烟草叶片中成功表达,竞争性ELISA的结果表明,表达的重组抗体与其抗原有良好的结合活性.     

端粒酶催化亚单位hTRT基因在人肝癌组织中的表达

目的：探讨人端粒酶催化亚单位hTRT基因在肝癌组织中的表迭情况．方法：用兔抗人端粒酶催化亚单位多克隆抗体作为一抗，生物素化羊抗兔IgG作为二抗，对肝癌组织石蜡切片采用免疫组织化学方法测定hTRT基因的表达．结果：30例肝癌组织中25例检出hTRT阳性(25／30)，正常肝组织无l例阳性．结论：免疫组织化学法检测hTRT敏感性高、特异性强、重复性好，较其他方法简便、快速、经济且无放射性核素污染等缺点，临床具有推广价值．     

不同生理状态下二狼山白绒山羊LDH同工酶的表达

对二狼山白绒山羊血清ＬＤＨ同工酶进行了不连续缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析．结果表明：ＬＤＨ同工酶在该动物血清中以Ｂ型酶占相对优势地位，Ａ、Ｂ两亚基的表达在动物处于不同生理状态下发生显著变化．依据雌性个体空怀期和妊娠期ＬＤＨ同工酶表型，讨论了与白绒山羊能量代谢的关系．     

内蒙古白绒山羊不同放牧期瘤胃甲烷菌mcrA基因的RFLP分析

分析不同放牧期内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷细菌的种群组成.选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,对瘤胃液中提取的细菌总DNA进行PCR扩增,建立甲烷细菌特异性的mcrA基因文库.用限制性内切酶TapⅠ对该文库特异性片段进行限制性内切片段长度多态性分析(RFLP).结果表明牧草生长幼嫩期、旺盛期和枯草期随机挑选的特异性克隆片段分别为115、105和112,分成6个RFLP类型,每期的不同类型占了所有分析克隆子的比例分别为36%、28%、20%、3.5%、3.5%和9%;38%、27%、18%、7%、5.5%和4.5%;35%、24%、18%、6.5%、3%和13.5%.     

人端粒酶逆转录酶在大肠杆菌中表达的初步研究

端粒酶是迄今为止最为广谱的肿瘤标志物，是一种良好的肿瘤检测和治疗的靶分子，曾报道了人端粒酶逆转录酶（hTERT) 一个基因片段的表达和相应的抗体用于端粒酶及hTERT检测的研究，为了获得更多针对hTERT不同表位的抗体，根据hTERT的抗源性进一步选取了hTERT的数个片段来制备抗体，这里初步探讨了这些原片段在大肠杆菌中的表达及各种因素对表达的影响，实验结果表明，位于hTERT蛋白中部和C末端的片段可在大肠杆菌中表达，但位于N末端的片段在各种条件下均不能表达，另外，就选取的hTERT各片段而言，诱导条件的优化只能在量上提高表达的水平，不能决定片段是否表达，而密码偏好性，启动子强弱及mRNA二级结构的稳定性可能对片段的表达具有更大的决定作用。     

陕北白绒山羊在陕北黄土高原区域农林牧生态经济系统中的地位

以陕北横山为例,对陕北白绒山羊在陕北黄土高原区域农林牧生态经济系统中地位问题进行了研究。结果表明,陕北白绒山羊在陕北黄土高原区域农林牧生态经济系统中处于主导产业地位,是农、林、牧有机结合的中间枢纽和中轴产业;是振兴陕北农村经济、培育优势特色产业,增加农民收入,实现生态、经济可持续发展形成良性循环的有效载体;林业、农业均应为绒羊产业提供丰富的饲草、饲料而进行调整;陕北白绒山羊应当大力发展：高效设施养羊是实现陕北老区养羊业可持续发展的根本出路。     

端粒酶基因在多种肿瘤中的表达及意义探讨

目的 :探讨端粒酶基因表达与癌细胞生物学行为及其端粒酶活性关系。方法 :用原位杂交的方法检测端粒酶基因 h TR和 h TRT在 1 1 5例癌组织 ,2 3例癌前病变 ,2 0例良性病变中的表达情况。结果 :1 1 5例癌中 h TR阳性率为 83.5 % ,h TRT阳性率为 80 .9% ;2 3例癌前病变中 h TR、h TRT阳性率分别为 39.1 %和 30 .4% ;2 0例良性病变中除 1例有 h TRT弱阳性外其余均为阴性。癌组织 h TR和 h TRT的表达与癌前病变、良性病变比较有显著性差异 ( p<0 .0 1 ) ,而癌组间无差异。h TR、h TRT表达在淋巴结转移癌组明显高于无转移组 ,端粒酶基因表达随肿瘤分化程度降低而有增高的趋势。结论 :端粒酶基因 h TR和 h TRT在多种癌及癌前病变组织中均为高表达且有很大相关性。端粒酶的激活发生在癌变早期 ,提示与癌的发生、发展密切相关。原位杂交技术检测h TR和 h TRT对恶性肿瘤诊断具有重要意义     

陕北白绒山羊高新生产技术与展望

到2005年末,榆林全市陕北白绒山羊和改良羊发展到320万只,生产山羊绒能力达到768吨,存栏羊只均产绒228.6g,产绒量占全国产量的4.4%。但是,由于历史的原因，羊只养殖中的实用高新技术没有在陕北自绒山羊得到充分应用和推广，陕北自绒山羊的深层次研究也不能与其目前的发展相适应，主要表现在以下几个方面。     

不同解冻方法对辽宁绒山羊精子活力的影响

通过比较三种精液冷冻保存稀释液配方（A、B、C）对山羊细管冷冻精解冻后精子活力的影响,结果表明,三种稀释液配方（A、B、C）,冷冻-解冻后精子活力有极显著的差异（P〈0．01）,分别为42．57％、37．34％、33．03％,A显著优于B液和C液．而且用不同的水浴温度和解冻时间进行解冻,通过精子活力的比较,寻找出最佳的解冻温度为38℃,解冻时间为60s．     

四川道孚县藏山羊绒毛的理化性能研究

本文从物理性■、化学组成和组织学结构三方面对分布于四川省甘孜州道孚县的藏山羊绒毛纤维作系统的■质分析。绒毛的平均细度,伸直长度、强度和伸度分别为:13.00μm、5.51cm、3.09g和46.22％,绒毛主要由18种氨基酸构成,其中以谷氨酸、胱氨酸、丝氨酸,亮氨酸含量最高,分别为:16.50％、11.58％、8.01％、7.75％;绒毛主要由碳、氮氧、氮、硫等五种元素组成,含量分别为49.88％、6.91％、23.56％、16.37％和3.25％;绒毛皮质呈典型的双边结构,正负皮质约各占50％。电镜观察表明,绒毛鳞片为环形结构,根据鳞片边缘的形,可将鳞片分为直环形、斜环形、锯齿形和不规则形,少数鳞片边缘有缺损现象,绒毛的鳞片密度为747个/mm,可见高度为13.66μm。     

绒山羊曲细精管生殖细胞的长期培养和精子发生过程的观察

哺乳动物精子发生过程是生殖生物学的重要研究课题之一.为了开展对山羊精子发生过程的研究,我们首次建立了绒山羊睾丸生殖细胞原代培养方法.原代生殖细胞和支持细胞(Sertolicells)由绒山羊睾丸曲细精管组织块产生,在体外共培养超过三个月.在共培养期间,观察到绒山羊的精原干细胞分化为精母细胞和精子细胞的形态变化过程.这一方法的建立为山羊精子发生过程的研究和应用打下了基础.实验结果显示,在没有添加任何生长因子的条件下,绒山羊睾丸生殖细胞长期增生分化,不断产生精子细胞.这一结果暗示了组织块和共生的支持细胞为生殖细胞的增生和分化提供了营养因子和调节因子.生成的游离精子细胞最后全部死亡,暗示这一共培养体系不能提供变态过程所需因子.     

化学发光自显影免疫印迹法（Western Blotting）检测绒山羊皮肤组织中催乳素受体蛋白

采集不同季节绒山羊皮肤组织样品,提取总蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,将电泳结果转移到醋酸纤维薄膜,然后与催乳素抗体结合、辣根过氧化物酶标记二抗结合,后者作用于化学发光底物,暗室中置X-光胶片上自显影数分钟,经显影、定影,得到黑色曝光斑,根据胶片上曝光斑的位置确定出催乳素受体的分子量为87kD。根据不同时期样品黑斑的大小得出各时期催乳素受体表达量与绒毛生长趋势是一致的。     

自发性高血压大鼠动脉组织端粒酶活性研究

为了解发育时期和高血压时期自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）动脉端粒酶活性的调节，研究了发育不同时期（５天和第２、４、６、１０周）的ＳＨＲ和Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ（ＷＫＹ）大鼠各大、小动脉组织端粒酶活性．新生（５天）的ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠动脉组织端粒酶呈阳性，但出生后第２、４、６周端粒酶活性消失．在第１０周，ＳＨＲ出现高血压，其大、小动脉的端粒酶重新被活化，而同龄、同源的ＷＫＹ或Ｗｉｓｔａｒ大鼠各动脉组织者则呈阴性，血压正常．从１０周龄的ＳＨＲ和ＷＫＹ胸、腹主动脉段分离的平滑肌细胞（ＳＭＣ）做端粒酶活性检测，ＳＨＲ大动脉来的ＳＭＣ端粒酶阳性，而ＷＫＹ或Ｗｉｓｔａｒ大鼠者则呈阴性．这些结果揭示：动脉组织端粒酶活性在ＳＨＲ、ＷＫＹ大鼠出生后迅速被抑制，而在高血压状态时，ＳＨＲ大、小动脉端粒酶再激活．具端粒酶活性的ＳＭＣ至少与大动脉，可能包括小动脉的端粒酶活性直接有关．这为高血压病人或其他心血管疾病病人应用抗端粒酶药物治疗动脉ＳＭＣ增生提供一个新思路．     

安哥拉山羊与建昌黑山羊杂交效应分析

以安哥拉山羊为父本级进交改良建昌黑山羊,观察杂种羊体形外貌, 定全尺,体重,产毛量,被毛品质及繁殖力。结果表明,F1、F2体尺、体重具有明显的杂种优势,F1育成羊体重,体重,体直长,胸围以及F2成年体重,体直长,胸围极显著高于建昌黑山羊（P＜0．01）,F2以上的杂种羊体形外貌趋向安哥拉山羊,白色个体F1,占90．0％,F2占93．5％,F3占100．0％,F3较F2同质个体增加12．76％（P＜0．05）,被毛密度增大,腹毛着生好,杂种羊被毛中无髓无的细度随代数增加而变粗,有髓毛则变细,成年母羊无髓毛和两型毛的重量比,F2占82．88％,F3占94．9％,杂种羊无髓毛强度和伸长随代数增加而增加,成年母羊剪毛量F1为0.53kg,F2为0.96kg,F3为1.04kg,净毛率2O地76．7％,F3为76．0％,繁殖成活率建昌黑山羊仅为63．8％,而F1、F2和F3分别比建昌黑山羊高12．6％（P＜0．05）、10．6％和7．2％。     

安哥拉山羊及其杂种羊父权认定的DNA指纹图分析

应用ＤＮＡ指纹技术对安哥拉山羊作亲子鉴定,结果发现子代个体的ＤＮＡ指纹图中,谱带均分别来自父亲和母亲,没有新带出现。父权概率为０．９８８９,表明（ＣＡ／ＧＡＴＡ／ＴＣＣ）５探针能有效地应用于安哥拉山羊及其杂种后代的遗传分析。     

Coating for Nano Super Soil-repellency of Cashmere Fabric

The nano-size metal oxide was prepared by the single-disperse technique on liquid phase, and formed sol dusters, its uniform film was covered on the surface of cashmere fibers by coating, and it had good oil repellency and water repellency. The results of IR（infrared） Spectrometer analysis revealed： The nano material combines through the strong bonds with the surface of cashmere fibers by the live groups. These analyses by SEM techniques showed that the nano material was distributed on the fiber surface even, and the nano material formed the strong peak of the regular crystal phase structure using the X-Ray Diffractometry （XRD） to analysis the fabric. The optimum techniques were selected by a series of experiments, coated cashmere fabric not only has preserved original properties of softness and comfort, but also has good properties of Bi-repellency function. Therefore, the technique will have potential appfication in engineers.