Lumican基因对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响

目的 观察基膜聚糖(Lumican)基因过度表达对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响.方法 以携带人Lumican基因的重组慢病毒感染A549细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选法建立稳定细胞株.分别用Real-time PCR和Western blotting方法检测A549细胞组、空载体组及Lumican感染组目的基因mRNA和蛋白的表达.运用MTT法研究Lumican基因对A549细胞增殖的影响.运用Transwell法检测Lumican基因对A549细胞侵袭的影响.结果 ①各组Lumican mRNA表达差异显著(x2=21.60,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=102.86,P＜0.000 1),Lumican感染组的蛋白表达水平高于其它两组.②Lumican感染组在不同时间(1、2、3、4、5 d)OD(吸光度)值与A549细胞组和空载体组差异不显著(P＞0.05).③各组穿膜细胞数差异显著(x2=23.49,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=73.92,P＜0.001).结论 成功构建了Lumican高表达的人肺腺癌A549稳定细胞株,Lumican基因对人肺腺癌细胞的体外增殖能力无影响,但能增强人肺腺癌细胞的体外侵袭能力.     

慢病毒介导的CBS基因过表达对原代皮质神经元β淀粉样蛋白分泌的影响

目的通过过表达手段上调胱硫醚β-合成酶(Cystathionine-β-synthase,CBS)在原代神经元细胞中的表达,观察其对原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)分泌的影响。方法使用过表达CBS慢病毒载体感染体外培养的原代皮质神经元,设定为慢病毒介导阳性(CBS)组、另设阴性对照慢病毒感染(NC)组、未经慢病毒感染(CON)组。采用实时荧光定量PCR检测CBS基因mRNA的表达,Western blot检测CBS蛋白的表达,采用Elisa检测Aβ40的表达水平。结果使用过表达CBS的慢病毒载体感染体外培养的神经元,实时荧光定量PCR检测其mRNA的表达上调明显升高,与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P0.01),Western blot结果显示蛋白表达升高与定量PCR一致,Elisa检测感染72小时后CBS组、NC组、CON组Aβ40的分泌分别为(182.19±24.52)ng/L、(411.90±12.43)ng/L、(390.41±54.53)ng/L,CBS组与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导的CBS基因过表达可降低原代皮质神经元Aβ40的分泌。     

腹腔感染早期腹膜淋巴孔变化及淋巴引流的研究

目的研究腹腔感染早期腹膜淋巴孔孔径及分布密度的变化,探讨腹腔内毒素的淋巴转归及其机制。方法将40只WISTA大鼠(200~250 g),随机分为正常组(10只)、假手术组(10只)和腹腔感染组(20只)。应用扫描电镜观察各组大鼠腹膜淋巴孔孔径大小及分布密度,利用显色基质鲎试剂检测门静脉血及胸导管淋巴内毒素的浓度,同时利用一氧化氮硝酸还原法测定腹膜组织中一氧化氮(NO)的含量。结果 1与正常组相比,腹腔感染组淋巴孔的孔径(P0.01)和密度显著增加(P0.01),且感染时间越长,腹膜淋巴孔径增加越显著(P0.01),但分布密度无明显增加(P0.05)。2腹腔感染组大鼠胸导管淋巴液中内毒素的含量显著高于正常组(P0.01),且感染时间越长,内毒素的含量越高(P0.01),而各组大鼠门静脉血中内毒素的含量无显著差异(P0.05)。3腹腔感染组大鼠腹膜组织中NO的含量显著高于正常组(P0.01)。结论腹腔感染早期,腹膜淋巴孔孔径增大,分布密度增多,细菌内毒素主要通过变大、增多的腹膜淋巴孔进入淋巴回流系统,而非门静脉血流循环。体内NO是调控腹膜淋巴孔开闭的一个重要调节因子。     

行为学评价大鼠急性脊髓损伤模型脊髓节段选择的研究

目的通过行为学评价观察不同脊髓损伤节段选择的特点及对脊髓功能恢复的影响。方法选取不同脊髓损伤节段建立大鼠急性脊髓损伤模型。BBB评分法和斜板试验观察1d、3d、5d、7d、14d、21d和28d脊髓功能恢复情况。结果通过BBB评分法和斜板试验观察显示,脊髓损伤组(T8、T9、T10)大鼠相比假手术组大鼠各时间点均有显著差异(P0.01),整体趋势随时间呈现跳跃式变化。BBB评分结果显示,第5d开始,T10组的评分值高于T8组(P0.05),第7d到21d,T10组的评分值明显高于T8组(P0.01),第14d和21d,T10组的评分值高于T9组(P0.05),在第28d,T10组评分相比T8组和T9组无统计学差异(P0.05)。斜板实验结果显示,第5d到28d,T10组的评分值高于T8组(P0.05)。第5d到14d,T10组评分值高于T9组(P0.05),而第21d和28d,T10组的评分值相比T9组无统计学差异(P0.05)。评分值标准化为百分制后进行横向比较,假手术组大鼠两种评分值之间的一致性较好,脊髓损伤组大鼠两种评分值之间的差异较大,在术后1d、3d、28d时,无统计学差异(P0.05),在第7d、14d可观察到差异非常显著(P0.01)。结论通过BBB评分和斜板试验发现,T10组实验结果所反映的组间差异在术后各时间点较T8、T9差异更加显著,跨度更大,在实验过程中更有利于观察其变化,在损伤后第5d到第21d尤为明显,建立脊髓损伤模型选择T10损伤节段要优于T8和T9损伤节段。     

FGFR1、FGFR3和Pokemon在膀胱癌中的表达及相关性研究

目的通过观察FGFR1、FGFR3和Pokemon在膀胱癌组织的表达情况,探讨它们在膀胱癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化检测296例膀胱癌和48例正常膀胱组织中FGFR1、FGFR3和Pokemon蛋白的表达情况。结果 1)FGFR1在膀胱癌不同病理分期、分级及初发复发的表达率为:Ta-T1期7.5%,T2-T4期18.1%(p0.01);低级别2.8%,低-高级别11.9%(p0.05),高级别14.3%的(p0.01);初发表达6.8%,复发表达率17.1%(p0.01)。2)FGFR3在膀胱癌不同病理分期、分级的表达率为:Ta-T1期68.1%,T2-T4期35.0%(p0.01));低级别75.0%,低-高级别60.3%(p0.05),高级别44.9%(p0.01)。3)Pokemon在膀胱癌不同病理分级及初发复发的表达率为:低级别47.2%,低-高级别66.7%(p0.01),高级别80.6%(p0.01);初发59.2%,复发80.0%(p0.01)。结论 FGFR1在膀胱癌中的表达与病理分级、分期成正相关,复发表达明显高于初发;Pokemon在膀胱尿路上皮癌中的表达与病理分级成正相关,复发表达也明显高于初发,表明它们可能主要参与膀胱癌发展及转移等过程。FGFR3在膀胱癌中的表达与病理分级、分期成负相关,表明它可能在膀胱癌发展早期及低级别肿瘤发展中发挥着重要作用。     

Graves病患者IL-6、IL-10、IFN-γ水平的变化及临床意义

目的 通过检测GD患者外周血血清中IL-6、IL-10、IFN-γ三种细胞因子水平于治疗前后的变化及关系,探讨其与甲状腺功能变化的相关性及临床意义.方法 取GD患者共32例.缓解期患者组共33例为确诊的GD患者,接受系统抗甲状腺药物治疗,临床症状缓解,甲状腺功能恢复正常者定为缓解组.以上两组患者均无其它自身免疫性疾病和感染性疾病.另取正常健康人40倒.均无甲状腺疾病史及甲状腺疾病家族史定为正常对照组.取所有受试者静脉血测定FT3、FT4、TSH、TMAb、TGAb、IL-6、IL-10、IFN-γ值.结果 IL-6:GD组较缓解组显著增高(P<0.01),缓解组与对照组无明显差异(P>0.05)IL-10:GD组与缓解组较对照组显著增高(P<0.01),GD组与缓解组无明显差异(P>0.05)IFN-γ:GD组与缓解组较对照组显著增高(P<0.01),GD组与缓解组无明显差异.结论 IFN-γ可诱导甲状腺细胞Ⅱ型抗原的表达,进而增强这些细胞的免疫原性.IFN-γ单独或与TNF-α联合作用可促进甲状腺细胞表达胞间粘附分子Ⅱ(ICAM-Ⅱ)及HLA-Ⅱ类抗原.并且TNF-α可增强IFN-γ对TEC的MHC-Ⅱ分子抗原的高效表达,而表达的异常则可使自身免疫反应得以发生及进行性发展.随治疗过程的进展,IFN-γ仍处于较高水平.高于正常对照组,反映了免疫治疗过程的滞后性.     

冠心病患者血清γ干扰素诱导蛋白10的表达及临床意义

目的 探讨γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)在冠心痛患者血清中的表达状况及临床意义.方法 22名健康对照者及68名冠心病患者纳入研究.根据临床资料将患者分为稳定性心绞痛组(SAP,n =43)与不稳定心绞痛组(UAP,n=25);根据冠脉造影结果将患者分为轻度狭窄组(n=11)、中度狭窄组(n=38)与重度狭窄组(n=19).ELISA法检测所有被研究者的血清γ干扰素诱导蛋白10水平,并计算与冠脉狭窄的相关度.结果 冠心病患者血清IP-10水平明显高于健康对照者(P ＜0.05);UAP组血清IP-10水平显著高于SAP组(P＜0.01);血清IP-10水平随冠脉狭窄程度的加重而升高,呈显著正相关(r=0.692);亚组分析,血清IP-10水平与轻、中、重三组的相关值分别为0.539,0.684,0.756.结论 γ干扰素诱导蛋白10在冠心病患者中显著升高,尤其是在不稳定心绞痛患者中;IP-10可以作为冠脉狭窄的重要预测指标.     

连续性血液净化治疗对重症急性胰腺炎患者内皮细胞通透性的影响

目的探讨连续性血液净化治疗对重症急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)患者内皮细胞的作用.方法人脐静脉内皮细胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVEC)按实验分组分别用16例健康对照组血清,38例 SAP患者连续性血液净化(ContinuousBloodPurificantion,CBP)治疗前、治疗6h、治疗20h血清体外干预脐静脉内皮细胞5h.transwell小室观察内皮细胞通透性变化,激光共聚焦显微镜观察 F actin应力微丝的表达及分布.结果 SAP患者 CBP治疗前内皮细胞通透性较健康对照组明显增高(P<0.01),CBP治疗6h、治疗20h后通透性均降低(P<0.05),但治疗20h组与治疗6h组相比,差异无显著性(P>0.05).激光共聚焦结果显示,与健康对照组相比,CBP治疗前 SAP患者内皮细胞 F actin应力微丝的数量及密度均明显增加,CBP治疗6h后,F actin应力微丝形成减少,治疗20h后减少更加显著.结论重症急性胰腺炎患者内皮细胞通透性明显增加,CBP治疗可以显著降低 SAP患者内皮细胞通透性,其机制可能与调节 F actin应力微丝形成与分布有关     

eIF4E和 VEGF C在大肠癌中的表达及其意义

目的探讨大肠癌组织中真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)和血管内皮生长因子 C(VEGF C)的表达及意义.方法应用免疫组织化学技术检测46例大肠癌及20例正常大肠组织中 eIF4E和 VEGF C的表达,同时结合患者的临床病理资料进行分析.结果46例大肠癌组织中的 elF4E和 VEGF C的表达阳性率分别为91.3和76.1%.而正常大肠组织中 elF4E和 VEGF C的表达阳性率分别为10%和20%.eIF4E和 VEGF的表达都与大肠癌患者性别、年龄、肿瘤病理分化程度无明显相关,但与肿瘤浸润深度、临床分期、有无淋巴结转移有关(P<0.05);两者的表达具有正相关(r=0.347,P<0.05).结论 eIF4E和 VEGF C与大肠癌的发生发展密切相关,可作为判断大肠癌侵袭转移及预后的重要指标     

COPD大鼠肺组织中 LTB4水平、5 LOmRNA表达及齐留通的干预作用

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)大鼠模型肺组织中白三烯 B4(LeukotrieneB4, LTB4)含量与5 脂氧合酶(5 LO,5 lipoxygenase)mRNA水平的变化,以及给予齐留通干预的影响.方法36只健康雄性 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、药物组,采用被动吸烟法制作 COPD大鼠模型,给予药物组鼻饲齐留通,测定肺功能,各组肺组织匀浆检测其 LTB4含量及髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性,RT PCR法检测5 LOmRAN的表达.结果模型组、药物组的0.3秒用力呼吸容积(Forcedexpiratoryvolumeinthe0.3second,FEV0.3)/用力肺活量(Forcedvitalcapacity,FVC)%较对照组显著下降(P<0.001),吸气相阻力(Inspiratoryphaseresistance,Ri)和呼气相阻力(expiratoryphaseresistance,Re)较对照组显著增加(P<0.001,P<0.05);模型组较药物组 FEV0.3/FVC%下降程度更低,Ri、Re更高,两组间差异有显著性(P<0.05).比较各组大鼠肺组织 LTB4水平,MPO活性及5 LOmRNA表达:模型组、药物组较对照组显著升高(P<0.001);与模型组比较,齐留通干预使得三项指标均有显著降低(P<0.001).结论 LTB4及5 LO参与 COPD的气道炎症过程.5 LOX抑制剂齐留通可部分抑制减少 COPD大鼠肺组织中 LTB4产生,其机制可能为抑制5 LO表达     

Formation of proviruses in acute infection in vitro and in vivo

Summary Formation of DNA proviruses of RNA viruses, Sendai and Newcastle disease, was studied. DNA provirus of NDV was shown to be formed in mouse L-cells and Sendai DNA provirus in Ehrlich ascites carcinoma cells within 2–3 days post infection.     

Role of bile in intestinal absorption of203Pb in rats

Summary The author studied absorption of²⁰³Pb after administering intraduodenally²⁰³Pb eliminated with bile. The results obtained were compared with absorption of203Pb administered into the duodenum as²⁰³PbCl₂ in rats forming 2 groups, one with bile ducts cannulated, the other intact. It was found that bile played an important role in absorption of Pb from the gastrointestinal tract. Absorption of Pb²⁰³ is significantly reduced if the bile is drained off by means of a canula.     

Changes in binding of JH-III in hemolymph of adult femaleLocusta migratoria

Summary Hemolymph from adult femaleLocusta migratoria migratorioides was analyzed for binding of juvenile hormone III (JH-III) after allatectomy and transection of thenervus corporis allati 1 (NCA-I). These operations did not affect the apparent dissociation constant of the binding (Kd=3.3 10^–8 M). The concentration of binding sites exhibited fluctuations in relation to age and type of operation: an increased concentration of binding sites in females with disconnected corpora allata and a decreased concentration in allatectomized females. The changes in concentration of binding sites was not due to differences in water content or hemolymph volume in operated animals. The hemolymph protein concentration was reduced after NCA-I transection and even more after allatectomy. However, variations in protein concentration did not correlate with changes in concentration of JH-III binding sites. The changes in binding site concentration were related to changes in JH-titer.     

Absence of recovery in the dark of chloroplast formation in UV-irradiatedEuglena

Summary UV-irradiatedEuglena showed recovery of liquid holding, as indicated by cell survival, but not of chloroplast formation. The addition of caffeine after UV-irradiation decreased the fraction of cells surviving, but had no effect on the chloroplast formation.     

Occurrence of dictyosteliaceae in the rhizosphere of plants in Southern India

Zusammenfassung Sechs Arten von Dictycosteliaceae sind in Indien zum ersten Mal aus bebautem und unbebautem Boden isoliert worden. Ihr Vorkommen in nichtkultivierten Böden war bis jetzt unbekannt. Die Rhizosphäre der Pflanzen scheint ein wichtiges Habitat dieser Organismen zu sein.     

中国城市化进程中的环境抗争

城市化是经济社会发展的必然选择。然而,随着中国城市化飞速发展,也产生了城市水、大气、固体废弃物和噪声污染等一系列生态环境问题。同时,随着环境意识的增强,人们对居住环境质量的要求不断提高,致使城市化过程中环境抗争事件不断涌现。本文回顾了已有研究文献,以国外环境抗争、国内农村环境抗争与城市环境抗争作对比,突出城市环境抗争的特点;从抗争的情感基础、精英力量、弱组织化和互动过程四个方面对城市的环境抗争进行建构;从抗争力量、制度化因素、发展观念和社会力量四个方面分析当前环境抗争所面临的一系列困境。培育公民社会、更新地方政府的发展观念、加强社会科学与自然科学和管理科学之间的交叉研究等是应对当前困境最根本的出路。