耐多菌灵木霉菌株的可溶性蛋白电泳研究

本文利用筛选获得的耐多菌灵的木霉菌株,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现:耐药性菌株的可溶性蛋白含量比对照菌株增加,而且在Rf=0.873处出现较强的特征性条带,说明该处的基因表达量增加。     

瑞氏木霉纤维素酶研究进展

瑞氏木霉(Trichoderma reesei)产生的纤维素酶酶系全、能分泌到细胞外,是研究得最清楚的产纤维素酶的模式菌株,但是其产生的纤维素酶还不能满足工业化转化纤维素的需要。本文从纤维素酶种类与调控、提高纤维素酶活的方法、标记基因的选择等方面概述瑞氏木霉纤维素酶,分析瑞氏木霉纤维酶研究面临的问题及对策,指出提高β?葡萄糖苷酶的产量和酶活是未来研究工作的重点之一。     

耐镉木霉菌株筛选及培养基优化

镉作为土壤重金属污染物之一可引起植物生理紊乱、营养失调,甚至经食物链参与物质循环,对生物群落造成极其恶劣的影响.本研究从土壤及海洋中分离纯化300株木霉菌株,通过筛选后获得1株具有明显镉耐受性的菌株Th02.通过形态学结合分子生物学鉴定该菌株为哈茨木霉.通过单因素优化寻找最佳培养条件,然后通过正交实验确定关键因子的最佳参数.结果表明,最适培养条件:15 g/L蔗糖,8 g/L胰蛋白胨,pH值为6.0,28°C培养48 h.在最适条件下菌株对镉耐受可达6 mmol/L.研究结果将为后期对于木霉菌修复镉污染提供理论基础.     

棘孢木霉抑菌谱及木霉菌肥对北苍术根腐病的防治效果

为明确棘孢木霉的抑菌谱及其制备的生物炭木霉菌肥对北苍术根腐病的防治效果,采用平板对峙法筛选出抑菌谱最广的菌株后,采用田间随机区组试验测定了木霉菌肥对北苍术根腐病的田间防治效果。结果表明：Shi-1-8的抑菌谱最广,对串珠镰孢菌等8种病原菌的抑菌率均高于80%。经过6 d发酵分生孢子为1.48×10⁹个·g^-1。木霉菌肥对北苍术根腐病的田间防治效果达到73.32%。由此表明,木霉菌肥可用于防治北苍术根腐病。     

多功能植病生防木霉的分离筛选与鉴定

从采集的120份土壤样品中分离获得木霉244株。对峙培养发现其中对棉花立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）具有拮抗能力的有114株;固体培养检测木霉的解磷和固氮能力,发现所有菌株都能够水解植酸钙,有74株能够水解磷酸钙,未发现具有固氮能力的菌株。对抑菌圈和解磷圈最大的19株木霉在液体培养条件下检测了解磷和解钾能力,其中菌株T13—8（1．792μg／mL）、123（1．652μg／mL）显示出较高的解磷能力,部分菌株在液体培养条件下不能解磷;部分菌株在液体培养下显示出解钾功能,其中菌株T47-4（20．585μg／mL）显示出较高的解钾能力。上述19个菌株的形态学和ITS序列分析鉴定表明,其中9个菌株为Trichoderma longibrachiatum,8个菌株为rharzianum,另外2个菌株分别为rvirens和zcitrinoviride。     

木霉对腐霉菌的拮抗机制及生防效果研究

利用本研究室从土壤中分离出的木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｓｐ．）菌株Ｔ４１,通过对峙法对腐霉菌进行了体外拮抗作用测定和评价［１］。并对木霉的竞争、重寄生、抗生、溶菌等拮抗机制进行了初步探讨和研究,同时,利用制备的木霉菌剂,对黄瓜猝倒病进行了室内盆栽生防试验。结果表明：木霉 Ｔ４１防治效果达 ８０％,而且具有防效长久和刺激作物生长的作用。     

绿色棘孢木霉菌株固体发酵条件优化及其生物学特性的农业应用

木霉菌对大多数植物病原菌具有拮抗作用，可利用简单和复杂的碳源氮源，甚至有转化和降解一些有害或持久存在的污染物的能力．产生的多样拮抗，有竞争，重寄生作用，产生抗生素和溶菌酶具有寄生的广谱性，有较高的抑制性，会对灰霉菌引起菌丝变形和消解，同时又不产生抗生物质，减少有效元素的老叶固定以提高氧化还原能力等植物内在生理的角度，提高化肥的利用率和有机肥的速效性，并对植物自身吸收的运转能力，增加植物体内营养物质的吸收和利用。对人和动物无毒害，对于解决降低农产品亚硝酸盐含量的三农困扰的新课题有重要意义，同时在植物生物学生仿领域的开发和利用也有很大的价值。     

疏水层析在分离纯化里氏木霉重组t-PA中的应用

疏水层析是一种有效的分离纯化手段,本文采用Octyl Sepharose和Butyl Sepharose两种疏水层析填料对里氏木霉表达的t-PA的提纯操作条件进行了初步研究。结果表明,选用Butyl Sepharose FF填料,上样量10mL（蛋白含量4．1mg／mL),用15％(NH4)2SO4的PBS以2mL／min的流速进行洗脱时,回收的酶的比活性较大,为2959．54U／mg,纯化倍数为5．16,回收率为7．12％。     

木霉菌对烟草黑胫病菌的拮抗机制及其生物防治研究

利用诱捕法从土壤中分离得到1株木霉菌株长枝木霉（Trichoderma longibrachiatum),采用对峙法测定其对云南省烟草黑胫病菌（Phytophthora nicotiana)的拮抗作用,结果表明：该菌对黑胫病菌具较强拮抗作用,拮抗机制主要为竞争作用,重寄生作用,抗生作用,采用温室盆栽,田间试验,分别测定该 对黑胫病的防效,室内防效为97．6％（10^6个／mL浓度级）,田间移栽时,每株施用4克效果较好,田间防效可达67％以上。     

纤维素降解木霉菌株的筛选及其生物学特性探究

选取分离自河北安国中药材种植基地不同药用植物根区土壤的7株木霉菌,通过羧甲基纤维素钠培养基初筛及玉米秸秆、甘草药渣固态发酵培养基复筛,联合筛选纤维素降解木霉菌株,采用形态学和分子生物学相结合方法进行菌株鉴定,并对其生物学特性进行探究.结果表明,经羧甲基纤维素钠培养基初筛,有4株菌表现出纤维素降解能力,分别为HQ1、BB1、DS3和DS1.经2种木质纤维素底物固态发酵培养基复筛发现,BB1以玉米秸秆为发酵基质时滤纸纤维素酶(filter paper cellulase,FPase)活性最高,HQ1以甘草药渣为基质时FPase活性最高.结合菌落形态、显微结构和DNA分子鉴定,HQ1被鉴定为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum),BB1为非洲哈茨木霉(Trichoderma afroharzianum).2株菌生物学特性存在趋同性,适宜生长产孢pH为5~6,适宜培养温度为28~33 ℃,且都表现出抵御干旱胁迫的能力.变差分解表明,不同培养条件对木霉菌生长速率及产孢有重要影响.本实验可为后续进一步优化HQ1和BB1降解不同木质纤维素底物固态发酵培养条件提供依据.     

木霉菌的几丁质酶与植病生防

木霉菌的几丁质酶是其防治植物真菌性病原菌的主要机制之一，它能降解真菌的细胞壁。木霉菌的几丁质酶具有结构和编码基因多样性。已经纯化的木霉菌几丁质酶有内切和外切几丁质酶，壳二糖酶和N—乙酰—β—D—葡萄糖胺酶。已经克隆的有编码33和42—KDa内切几丁质酶和编码73—KDa的N—乙酰—β—D—葡萄糖胺酶基因。42—KDa内切几丁质酶是目前研究最多的，已经用于转基因植物的培育；对它的表达和调控也有部分了解。     

木霉菌产生的葡聚糖酶和植物病害防治

木霉菌能够产生不同类型的葡聚糖酶，包括α-1，3-、β-1，3-、β-1，4-和β-1，6-葡聚糖酶，酶的产生受葡萄糖抑制，而为葡萄糖聚合体如真菌细胞壁所诱导。已经克隆了几个萄聚糖酶的编码基因。该酶是木霉菌产生的重要抑菌蛋白，能够与几丁质酶或抗生素协同抗菌，用于改良植物病害生物防治菌和植物。     

根癌农杆菌介导的木霉插入转化及其应用

根癌农杆菌介导的遗传转化法(ATMT)已广泛地应用于真菌的转化研究,该方法具有操作简单、转化效率高和转化子遗传稳定等特点。木霉作为土传植物病原菌的重要生防真菌,对其生防分子作用机制方面的研究也越来越受到关注,目前所面临的问题是如何基因突变和基因替换。ATMT法为木霉(Trichodermaspp.)的分子生物学研究提供了一个强有力的工具,在木霉的插入突变、遗传转化以及基因标记和克隆方面起着重要的作用。本文综述了根癌农杆菌介导木霉遗传转化的原理、特点、转化方法和应用,并且对有关发展趋势进行了展望。     

从土壤中分离木霉的培养基的研究

本文通过在基本培养基中添加抑制其它真菌和细菌的制剂，探索出分离木霉的培养基为基本培养基中添加适量的丙酸钠和庆大霉素。通过在不同温度和pH条件下的对比实验，确定培养最佳pH值为5．2～5．7，最佳温度为22～28℃。     

木霉菌拌种对小麦生长和根际真菌群落的影响

为了了解木霉菌拌种对冬小麦生长和根际土壤真菌群落的影响,选取小麦种植后180 d的根际土壤,通过高通量测序技术研究分析了4株木霉菌拌种对小麦根际土壤中的真菌群落组成的影响,通过qPCR检测了根际土壤中真菌的绝对含量。结果表明：木霉菌拌种处理后降低了小麦根际土壤中真菌群落丰度,同时发现小麦产量与小麦根际土壤真菌群落均匀度(香农指数)和丰富度(OTUs数)呈反比,而与群落的优势度(辛普森指数)呈正比;通过田间病害调查和测产,结果显示,与未拌种处理相比木霉菌拌种降低了小麦纹枯病和茎基腐病引起的白穗率,其中哈茨木霉LTR-2和QT21990防效可达60% 以上,增产7.42%和6.94%(P<0.05)。     

木霉及其制剂对棉花真菌病害的防治效果

在盆栽条件下,9个木霉菌株对棉花丝核菌立枯病的防治效果为39．71％-82．35％,14个菌株对棉花枯萎病的防治效果为37．5％-75．00％,9个菌株对棉花黄萎病的防治效果为30．49％-65．85％。制备了绿色木霉LTR-2的可湿性粉剂,田问条件下处理种子及灌根,菌剂对棉花枯萎病的防治效果达50．1％-80．0％。     

白喉毒素及其编码基因TOX在分子生物学中的应用

对白喉毒素及其编码基因的结构及其作用原理进行了详细说明,并对它们在分子生物学中的运用作了概要的介绍。     

杀菌剂对木霉菌的毒性以及农业土壤中木霉菌分离与计数用选择性培养基

通过添加三唑酮刺激分生孢子产量、添加苯菌灵刺激营养生长以及添加曲里通X-100限制菌落扩展。本文进一步优化了木霉菌的选择性分离与计数培养基。三唑酮能有效地抑制轮枝菌生长。在该培养基上青霉菌和曲霉菌的生长受到明显抑制。在测定了多种杀菌剂对木霉菌以及相关的非木霉菌的毒性基础上,研制了更为可靠、有效的木霉菌选择性培养基。该培养基适合于从非木霉菌含量高的样本,也适合于从木霉菌含量低的样本中计数、分离木霉菌。无论样本中木霉菌的群体大还是小,利用该培养基均能进行计数和分离。