四棱三植株再生

本文研究了四棱豆成熟叶片、茎段的组织培养,从茎、叶的愈伤组织中分化出了再生苗。并研究了不同激素比例和外植体在诱导和分化中的不同表现,以及诱导培养基对于分化的影响,筛选出愈伤组织诱导和分化的最适培养基。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生体系的优化

为了建立和优化小麦成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生体系,以京411、Brock、春麦S10鉴-6和春麦津强5号4种小麦的成熟胚为外植体,进行愈伤组织的诱导、分化及再生体系优化的研究.结果表明:(1)京411在各种诱导培养基中的平均出愈率高于其他3个品种;(2)京411在MS1(MS+2.0 mg/L 2,4-D+200 mg/L CH+100 mg/L MI+250 mg/L Glu)培养基中的出愈率最高,因此将该培养基定为京411的最佳诱导培养基;(3)同不切相比,采用纵全切的方式处理京411的成熟胚能够获得较高的出愈率和质量较好的愈伤组织;(4)在分化培养基F7(MS+10 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA)中,京411成熟胚的愈伤组织分化率、出苗率和生根率最高,幼苗长势最好,因此该培养基可以用作京411成熟胚愈伤组织的分化培养基.     

从白羊草成熟胚和幼穗培养诱导再生植株

由生长在北京地区的无融合生殖白羊草的成熟胚和幼穗诱导出愈伤组织，并由愈伤组织分化出植株．来源于成熟胚和幼穗的胚性愈伤组织的植株分化频率分别为４０％和８５％．     

神经干细胞的诱导分化

目的：探讨神经干细胞（NSCs）的诱导分化机制。方法：本文就Nscs的来源、分布、诱导分化的调控机制和因素以及其应用前景作一综述。结果：神经干细胞可从鼠、人的胚胎和成年中枢神经系统（CNS）成功分离并培养，具有自我更新和多分化潜能，经体外诱导或植入体内后均能分化为成熟神经元和神经胶质细胞。结论：神经干细胞的发现和研究的深入为神经发育研究及中枢神经功能重建提供了新的思路。     

TDZ促进花生外植体分化及基因转化

以花生成熟胚的上胚轴和胚叶为外植体，通过农杆菌介导转化Bt和CpTI双基因，在共培养基和诱导培养基中加入TDZ诱导不定芽和体细胞胚，实验证明，TDZ有明显促进花生外植体分化的作用，当诱导培养基组成为TDZ0．3mg/L NAA 0.4mg/L，诱导时间为28d，分化培养基为MS时采用TDZ发胚培养基萌发的轴外植体分化率最高，可达73％，GUS基因阳性率3．5％，当诱导培养基组成的TDZ0．2mg/L NAA0.4mg/L，诱导时间为21d，分化培养基为MS时水萌发种胚叶外植体分化率最高，达56％，GUS基因阳性率2．5％。     

根癌农杆菌介导的水稻遗传转化

以粳稻、空育131、垦鉴稻7号成熟胚、幼胚诱导的愈伤组织为材料,将反义蜡质基因导入受体材料.经两次抗性筛选后,转入分化培养基中分化培养后获得转基因小苗.成熟胚和幼胚的转化效果比较,幼胚优于成熟胚.将转化植株进行PCR鉴定,证明外源目的基因已经整合到植株中.     

杉木合子胚愈伤组织的诱导及植株再生

以杉木成熟及未成熟合子胚为外植体,研究了基本培养基、植物激素、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明：1／2MS＋2mg／L 2,4-D＋1．0mg／L 6-BA＋1．0mg／L KT＋30g／L蔗糖是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;处于胚胎选择阶段或者组织与器官分化阶段的幼胚,能诱导出松软、晶莹透明的愈伤组织,诱导频率为2％～6％。成熟阶段的幼胚诱导出的愈伤组织的外观形态与成熟合子胚诱导出的愈伤组织相似,愈伤组织的诱导频率随着合子胚发育的成熟而迅速提高;DCR＋1．5mg／L 6-BA＋1．5mg／L KT＋20g／L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基。高约1．5cm的不定芽转入生根培养基,生根率可达100%。     

大鼠骨髓来源的c-met+β2m-细胞向肝细胞样细胞诱导分化的实验研究

为了观察大鼠骨髓来源的c-met+β2m-细胞在体内外是否可定向诱导分化为肝细胞样细胞,将雄性F344大鼠的c-met+β2m-细胞通过肝门静脉移植入由丙烯醇诱导损伤的F344雌鼠体内,观察移植细胞在受鼠肝内整合、增殖、分化、成熟以及损伤后的修复作用;通过模拟丙烯醇肝损伤大鼠体内微环境,将c-met+β2m-细胞与损伤肝细胞共培养,观察了c-met+β2m-细胞的形态变化,并检测了肝细胞特异性蛋白的表达和肝细胞特异性功能的变化.结果表明,大鼠c-met+β2m-细胞在体内外均可以分化为成熟的有功能的肝细胞,提示微环境在成体干细胞定向诱导分化中起决定性作用,这为骨髓成体干细胞移植治疗各种原因引发的肝功能障碍提供了新的途径.     

NB4细胞分化来源的中性粒细胞与正常中性粒细胞的比较研究

目的:探索白血病NB4细胞经全反式维甲酸(ATRA)诱导分化成熟后的中性粒细胞是否与正常中性粒细胞(PMN)之间存在差异,以了解急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞的生物学特性.方法:ATRA诱导NB4细胞24、48、72、96h后,瑞氏染色观察细胞分化情况、原子力显微镜(AFM)观察细胞表面地貌形态变化;NBT还原实验、吞噬杀菌功能实验和趋化功能实验研究细胞功能.结果:NB4细胞经ATR诱导72 h后,细胞基本分化成熟,细胞核出现分叶,核/质比下降,与正常PMN相比,细胞直径相对较大,NBT还原率下降,趋化功能下降,但吞噬杀菌功能正常.AFM探测细胞机械性能发现,随着ATRA作用时间的延长,NB4细胞发生不同程度的形变,细胞体积增大,高度降低,均方根粗糙度(Rq)和平均粗糙度(Ra)降低.结论:ATRA诱导NB4分化成熟后的细胞和正常PMN,在形态和功能上存在一定差异.     

稻瘟病菌粗毒素对水稻成熟胚愈伤组织诱导的影响及抗性筛选

利用稻瘟病不同生理小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻成熟胚进行处理,粗毒素液对水稻胚芽的生长和胚的诱导有严重的抑制作用,与对照相比差异性极显著;不同浓度的粗毒素提取液其作用效果不同,随着毒素浓度的增大或是作用时间性的延长,水稻诱导受到的抑制作用越强.水稻成熟胚组织培养中进行抗稻瘟病菌突变体筛选的毒素浓度在30%较好;浸泡水稻成熟胚以处理72h愈伤诱导和分化效果较好;在进行抗稻瘟病突变体筛选中,以用含毒素的培养基进行诱导愈伤的处理的筛选取效果较好.     

稻瘟病菌粗毒素对水稻成熟胚愈伤组织诱导的影响及抗性筛选

利用稻瘟病不同生理小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻成熟胚进行处理,粗毒素液对水稻胚芽的生长和胚的诱导有严重的抑制作用,与对照相比差异性极显著;不同浓度的粗毒素提取液其作用效果不同,随着毒素浓度的增大或是作用时间性的延长,水稻诱导受到的抑制作用越强。水稻成熟胚组织培养中进行抗稻瘟病菌突变体筛选的毒素浓度在30%较好;浸泡水稻成熟胚以处理72h愈伤诱导和分化效果较好;在进行抗稻瘟病突变体筛选中,以用含毒素的培养基进行诱导愈伤的处理的筛选取效果较好。     

不同基因型小麦成熟胚盾片组织培养效果研究

不同基因型及其外植体的愈伤组织诱导和植株分化研究是建立高效植株再生和遗传转化系统的基本条件。文章首次以去胚的成熟胚盾片为外植体材料,对10个小麦基因型进行了离体操作。结果显示:愈伤组织诱导率平均可达96.5%,10个基因型的愈伤组织都能分化出绿苗,分化频率最高可达10.5%,没有白苗化现象;根的分化与绿点、绿苗的分化之间具有显著的相关性;鄂恩1号的植株再生能力显著优于其它基因型,其植株再生系统已具备了遗传转化的基本要求。     

农杆菌介导转化水稻成熟胚影响因素研究

实验对蜀恢881、蜀恢527、中花9号等7个水稻品种的成熟胚为受体材料，研究了影响农杆菌转化水稻频率的几个重要因素，实验结果表明：CC培养基是籼稻成熟胚愈伤组织的最适诱导培养基，而NB培养基是粳稻品种成熟胚的最适诱导培养基；诱导培养基中添加ABA并不能显著提高籼稻和粳稻成熟胚愈伤组织的诱导率，但在ABA为3mg／LN可以明显改善愈伤质量；适当的低温预处理可以不同程度提高诱导率；农杆菌菌株EHA105对水稻愈伤组织的转化能力优于LBA4404和AGL1；在分化时，采用适宜的激素配比有利于提高分化率。     

前体脂肪细胞3T3-L1诱导分化条件的优化

利用L18(37)正交试验,考察了联合诱导时3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松和胰岛素用量以及联合诱导时间,胰岛素单独诱导时间以及胰岛素用量对3T3-L1前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的影响.极差分析的结果表明,各条件对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响程度由大到小排序为:IBMX、联合诱导时间、胰岛素单独作用量、联合诱导时胰岛素作用量、地塞米松、胰岛素单独作用时间;方差分析的结果表明,IBMX的诱导效应极显著,联合诱导时间和胰岛素单独作用量呈显著水平,而其他条件(联合诱导时胰岛素作用量、地塞米松和胰岛素以及单独作用时间)对结果的影响并不显著.3T3-L1前体脂肪细胞分化的最适诱导条件为:500~750μmol/L IBMX、0.25~1μmol/L地塞米松与1μg/mL胰岛素,在联合诱导72 h后,再用5~10μg/mL胰岛素诱导48 h.油红染色镜检结果显示,在该条件下前体脂肪细胞诱导分化率均高于联合诱导时胰岛素作用量、地塞米松和胰岛素以及单独作用时间.     

激素对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响

比较了2,4-D和Picloram对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响．实验结果表明,培养基中加入2,4-D的诱导效果优于Picloram,2,4-D加入量为6mg／L时,诱导的愈伤组织的分化效果最好．对不同小麦品种幼穗愈伤组织诱导和植株再生的比较结果表明,鄂恩1号、鄂麦11、鄂麦12和山农1355等有较高的植株再生率。其中前3个材料植株再生率达90％以上;从幼穗、幼胚和成熟胚的比较结果来看,幼穗的愈伤组织诱导率和植株再生频率高于幼胚的和成熟胚．     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

一个光敏核不育水稻品种试管再生条件的研究

采用光敏核不育水稻（ＨＰＧＭＲ）成熟胚为外植体，在不同植物激素浓度和配比下诱导愈伤组织，并观察再生植株的发生特点和过程，同时分析愈伤组织酯酶和过氧化物酶同工酶谱的变化特征，初步表明诱导和分化频率较高的植物生长素与细胞激动素的配比．     

粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其分化培养体系的建立

为了促进新型高产水稻品种的抗病性,以粳稻成熟胚为外植体,通过诱导培养基、继代培养条件、分化培养路线、光照强度和蔗糖浓度的优化,建立了适合新稻18和豫粳6号的高效再生体系.结果表明:选择适宜的培养基是提高愈伤组织诱导率及愈伤组织质量的基础.新稻18和豫粳6号的水稻成熟胚诱导愈伤组织的培养基分别为MB1(MSB5+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+ABA 1 mg/L)和MB2(MSB5+2,4-D 3 mg/L+6-BA 1mg/L+ABA 0.5 mg/L),愈伤诱导率分别达95.24%和91.07%;愈伤组织剥离后的继代培养基为MB3(MSB5+2,4-D 3.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L);愈伤组织的分化培养路线为三步分化法MSD0/N6B5D0→N6B5D2→MSD0,适宜的分化培养温度为33℃,光照强度为43.75μmol.m-2.s-1.新稻18和豫粳6号的愈伤分化率最高分别达到99.3%和83.33%.     

星状孢子素和金雀异黄素对人早幼粒白血病细胞系的诱导分化作用

以人早幼粒白血病细胞ＨＬ－６０细胞为模型，研究了星状孢子素和金雀异黄素对该细胞的诱导分化作用，结果表明，ＨＬ－６０细胞经２种药物分别处理后，细胞增殖能力均呈下降趋势，细胞形态学变化明显，大部分细胞趋于成熟，硝基兰四氮唑（ＮＲＴ）还原能力增强，ＮＢＴ阳性细胞百分率均达８０％以上，说明此２种药物对ＨＬ－６０细胞有明显的诱导分化作用。ＨＬ－６０细胞酸性磷酸酶活力显著升高，则揭示该细胞沿粒细胞方向趋于分化。     

水稻愈伤组织分化与不同激素配比关系的研究

由水稻中花11号成熟胚诱导而来的愈伤组织,通过三批不同激素不同配比的分化培养基培养,得到了最高为89.6%的出苗率.分化出苗率最高的培养基为MS+2.0mg/L ZT+0.02mg/L IAA+3%蔗糖+0.8%琼脂,细胞分裂素ZT和生长素IAA的比率为100∶1.