重金属汞、镉离子快速检测方法建立及应用

采用荧光微球分别标记抗重金属汞、镉离子小鼠多克隆抗体,牛血清蛋白偶联EDTA螯合的重金属汞离子、镉离子包被硝酸纤维素膜,制成的荧光快速检测试纸,应用层析式竞争法检测水样中的重金属离子.重金属汞离子荧光检测试纸检测重金属汞离子的灵敏度为5.5 ng/mL,检测限为0.03 ng/mL,重金属镉离子荧光检测试纸检测重金属镉离子的灵敏度为0.51 ng/mL,检测限为0.04 ng/mL,与其余金属离子的交叉反应率低.所建立的方法操作简单,快速,灵敏度高,特异性好,可作为水样中重金属残留筛查的有效手段.     

脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗体胶体金检测试纸条的研制

目的:为研制快速检测脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗体的胶体金试纸条.方法:以辛酸-硫酸铵沉淀法纯化脊髓灰质炎病毒Ⅰ型单克隆抗体,用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,胶体金标记单抗,再结合脊灰病毒抗原形成复合物,固定于金标垫上,将鼠抗人IgG和羊抗鼠IgG分别包被于试纸条的T (检测线)处和C (质控线)处,应用该试纸条进行性能检测.结果:以已知的脊灰病毒Ⅰ型阳性血清作为检测样品,试纸条检测的灵敏度为1:80;特异性试验证明该试纸条与甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、麻疹病毒抗体阳性血清没有交叉反应;检测结果与脊灰病毒Ⅰ型疫苗抗体检测试剂盒(ELISA)试验的符合率为86.7%.结论:该试纸条检测脊灰病毒Ⅰ型的抗体水平具有较好的特异性与灵敏性,适用于大规模临床血清抗体水平检测,具有良好的应用前景.     

基于适配体的胶体金色谱层析试纸条快速检测肌酸激酶同工酶

研究基于适配体的胶体金色谱层析试纸条快速检测肌酸激酶同工酶,用于揭示长期飞行下航天员潜在的心肌和肌肉损伤.利用SELEX方法筛选得到的肌酸激酶同工酶适配体,并优选出与肌酸激酶同工酶有较强亲和能力的核酸适配体应用于胶体金免疫层析试纸条,通过优化胶体金颗粒大小、缓冲液浓度等条件,成功建立了一种基于适配体的胶体金试纸法用于CK-MB的快速检测.实验结果表明,通过基于磁珠的核酸适配体筛选方法筛选出的与肌酸激酶同工酶有亲和力的核酸适配体,能够用于构建适配体-适配体夹心胶体金免疫层析试纸条并成功应用于82 nM以上的肌酸激酶同工酶的快速、可视化检测,同时,该免疫层析试纸条具有良好的特异性和稳定性,可用于未来空间医学即时检测.     

胶体金免疫层析方法检测肺炎链球菌细胞壁多糖抗原

建立一种简易快速、特异性高的胶体金免疫层析法(GICA)用于检测肺炎链球菌细胞壁多糖抗原(C-Ps).根据双抗体夹心原理,将C-Ps单克隆抗体标记于胶体金颗粒,建立检测方法.实验结果表明该试纸条操作简便,肉眼于15,min内即可判定结果.试纸条对肺炎链球菌具有高度特异性,与百日咳鲍特菌、脑膜炎奈瑟氏菌等其他重要呼吸道致病菌无交叉反应.室温保存12个月,其检测结果无明显变化.与现行检测方法相比较,该研究制备的试纸条具有操作简便、检测快速、检出限低、特异性强、稳定性好等优点,其灵敏度和特异性分别为70%,和100%.而且与国外同类产品(美国BinaxNOW?产品)相比,灵敏度具有较高的一致性,而且特异性可达到100%,,性价比更高,为肺炎链球菌感染疾病的临床检测与早期诊断提供了一个新的手段.     

鸡传染性支气管炎病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制

[目的]建立一种快速、灵敏的胶体金免疫层析法(Colloidal-gold immunochromatography assay),用以检测禽类早期感染鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)和监测IBV疫苗接种免疫水平.[方法]将重组IBV核衣壳(Nucleocapsid,N)蛋白包被在在试纸条检测线,羊抗兔IgG包被在试纸条控制线,用胶体金-兔抗鸡IgG偶联物作为示踪剂,检测血清中IBV抗体.[结果]制备所得的胶体金免疫层析试纸条与IBV抗体阳性血清反应呈阳性,与鸡新城疫病毒抗体阳性血清、鸡传染性法氏囊病毒抗体阳性血清、鸡毒霉形体抗体阳性血清和SPF标准鸡血清未发生交叉反应;当IBV抗体阳性血清以1:35比例稀释后,依然可以用该试纸条检出;该试纸条在60 d的保存期内重复性良好;以从不同养殖场采集到的鸡血清样本作为测试对象,比较该试纸条和进口 ELISA试剂盒的检测结果,两者符合率为97.44％.[结论]成功制备了检测耗时短、检测限低、特异性强、稳定性好的IBV抗体检测胶体金免疫层析试纸条,为鸡传染性支气管炎的早期诊断以及免疫监测提供了简便高效的技术方法.     

快速检测小麦和玉米中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

采用DON快速检测试纸条检测小麦和玉米样品,并对检测过程进行了优化,最后采用ELISA试剂盒进行比较和分析.结果发现14号和15号小麦样品为阳性,其余样品均为阴性,两种方法的检测结果一致;样品的颗粒大小、水质、搅拌时间和静置时间等对试纸条的检测结果无明显影响,显示该试纸条适合现场快速筛查.     

一种检测砷（III）的适配体试纸条

利用三明治夹心法构建基于适配体胶体金的试纸条,目的在于开发切实可行的As(III)检测应用装置。通过As(III)与金标适配体的特异性结合,将其截留在试纸条检测线处。纳米金作为显色材料,其颗粒直径为（13 ± 1） nm。经过优化反应条件,选择Satorius CN 140作为硝酸纤维素膜,控制线上捕获探针链霉亲和素与生物素的最佳比例为1∶4,对应的划线浓度为10 μmol/L。检测线上1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐与N-羟基琥珀酰亚胺的最优比例为1∶3,金标适配体最优浓度为0.5 μmol/L。在最佳反应条件下,观察试纸条的显色结果,颜色响应信号与砷浓度形成很好的梯度关系,检测限为0.1 μmol/L。本试纸条对As(III)具有高度的特异性,并且稳定性良好。其检测成本不足1元,可满足低收入地区普通人群实时检测As(III)的要求。     

唾液中HIV抗体快速检测诊断胶体金免疫层析试纸条的研制

制备一种适于早期HIV的大范围筛查使用的检测人唾液中抗HIV-1抗体的胶体金免疫层析试纸条.采用柠檬酸三钠还原法制备直径为19nm的胶体金颗粒,标记HIV-1gp41抗原,制备胶体金免疫复合物,按常规组装成免疫层析检测试纸条.结果表明:阳性HIV患者唾液中的抗HIV抗体与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色圆点.胶体金颗粒粒径均一,胶体金免疫复合物性能稳定,特异性强,试纸条检测时间只需10～20min.制备的胶体金免疫层析试纸条检测唾液中HIV抗体,使用安全,简便快速,结果准确,适用于基层医疗单位使用和对大量人群的规模筛查等.     

牛奶中三聚氰胺残留胶体金免疫层析快速检测方法研究

为建立牛奶中三聚氰胺免疫层析快速检测方法,采用胶体金偶联特异性三聚氰胺抗体,优化试纸条T线抗原包被量、金标抗体用量、二抗稀释倍数等条件,构建三聚氰胺免疫层析试纸条.结果表明,T线抗原包被量为0. 25μg/mL,金标抗体用量为9. 0μL/条,二抗稀释倍数为1:100时效果最佳;最优条件下该试纸条的最低检出限为0. 25μg/mL,结果可在5 min内进行判读,且牛奶样品不需任何处理可直接进行测定.本研究建立的免疫检测方法适用于牛奶中三聚氰胺的检测.     

胶体金免疫试纸法快速测定雌三醇

雌三醇(E3)在临床诊断、日用化工和畜牧业等领域具有广泛应用,同时它也是一种环境污染物,对E3的检测具有科学和应用意义.本研究采用竞争性免疫层析技术,以E3单克隆抗体-纳米胶体金复合物作为金标抗体,以E3偶联抗原为检测线(T线)、以羊抗鼠抗抗体为控制线(C线),通过条件的优化,制备出检测E3的胶体金试纸条.当试纸条C线和T线同时显色时,结果为阴性;当试纸条仅C线显色时,结果为阳性.所得检测试纸条测加标水样的最低检测限为100μg/L,测加标奶样的最低检测限为100μg/L,反应时间为10min,与雌酮、雌二醇、己烷雌酚等环境雌激素无交叉反应,具有良好的选择性.     

让科技更接地气

<正>遇到雾霾,我们首先想到的是找环保部门;遇到禽流感,我们首先想到的是找医院和卫生部门。其实,这些揪心的事要解决,最后都需要通过科技来"顶天立地"作支撑。让科技更接地气,解决民生难题,这也是我们深化科技体制机制改革要实现的主要目标。最近被媒体轮番报道的中国计量学院专家研发成功的"神奇的小试纸"——5分钟就能测出食品中农药残留、兽药残留、非法添加物,如有机磷、有机氯、三聚氰胺、苏丹红等超标物。这样的检测以前都是用仪器,而购买仪器就要花四五十万元,老百姓要么"望洋兴叹",要么就是花大钱到检测机构通过专门的仪器检测,如今几毛钱的试纸5分     

免疫金层析技术快速检测副溶血弧菌方法的初步研究

本研究应用兔抗V.parahaemolyticus IgG-2包被硝酸纤维素膜检测线,·羊抗兔IgG包被对照线,胶体金标记免抗V.parahaemolyticus IgG-1,建立了检测副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)的免疫金层析试纸条法(IGCA).结果表明,阳性者试纸条检测线和对照线均出现红色线,实验过程仅需5～15min即可判断结果,该法对V.parahaemolyticus的最低检测量为3.60× 104cfu/mL,与溶藻弧菌、霍乱弧菌、美人鱼弧菌、麦氏弧菌、弗氏枸橼酸杆菌和沙门菌等常见肠道菌不发生交叉反应.将试纸条4℃存放6个月、常温存放3个月,37℃存放1个月,检测结果无差异.说明建立的试纸条检测方法操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好,结果容易观察和判断,非常适于基层养殖部门应用.     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

目的探讨抗F30胶体金免疫试纸条的灵敏度和特异性以及假阳性问题。方法按试纸条说明书的方法，对14份阴道分泌液、9份尿液、5份唾液、5份汗液、5份未经治疗的多囊卵巢综合征阴道分泌液，人、鸡和猪精液进行检测。结果5分钟时观察除人精液外，其余收集样品均为阴性，10分钟时观察除4份阴道分泌液、1份多囊卵巢综合征阴道分泌液呈阳性外，其余样本结果仍为阴性。试纸条的灵敏度达到10000—100000倍。结论试纸条的灵敏度、特异性较高，具有一定的种属特异性。但为了避免假阳性的出现，建议将样品稀释10倍，5分钟之内观察结果。     

褐土剖面磁化率与重金属元素变化特征及相关性研究

研究通过对临汾市尧都区农田土壤剖面系统的测量与采样,分析了土壤磁化率与重金属元素垂直变化特征及其相关性.结果表明:磁化率随深度增加而递减,重金属元素Cu、Ni、Cd含量随深度增加而递增,Zn的含量随深度增加而递减.磁化率与重金属元素Cu、Ni、Cd含量呈极显著负相关,而与Zn含量呈显著正相关.频率依赖系数与重金属元素含量不相关.说明磁性物质对重金属元素含量有一定的指示作用,可以通过检测褐土中磁化率快速地诊断褐土中重金属的含量及污染状况.     

睡眠类特膳食品中非法添加地西泮的快速检测

为快速检测特膳食品中非法添加的地西泮,文章基于经典的免疫层析侧流试纸(lateral flow strips, LFS)结合金纳米粒子(gold nanoparticles, GNPs)标记,建立一种快速、简单、方便的胶体金试纸条检测方法。结果表明：制备的试纸条能够在不到10 min的时间内完成检测,且无需复杂的预处理过程,特异性好,灵敏度高,视觉检测限可低至10.0μg/L。该方法操作简单、安全便捷,可以有效地实现睡眠类特殊膳食食品中非法添加地西泮的快速检测。     

入境废塑料17种重金属元素含量检测分析

为了研究入境废塑料中重金属元素的含量情况,在宁波口岸抽取了16个样品,检测了17种重金属元素的含量。结果表明,抽取的入境废塑料中含有一种或多种重金属元素,其中铝、铅、钡等重金属元素的含量较高。废塑料中的重金属会带入到再生利用制品中,目前检验检疫标准中也没有对入境废塑料中重金属元素含量进行明确规定。文章对宁波口岸入境的废塑料进行重金属元素检测分析,供有关部门建立相应标准作参考。     

“粮食中重金属污染快速检测技术与仪器的研发”重大专项顺利通过验收

正近日,由福州大学牵头承担的福建省科技重大专项专题"粮食中重金属污染快速检测技术与仪器的研发"项目顺利通过验收。该项目建立了粮食中重金属的高级氧化处理、单克隆抗体免疫筛查、纳米电化学定量检测等技术,研制了重金属质控样品、重金属数据分析模型以及多功能智能化重金属检测仪,形成了可用于粮食中重金属(镉、铬、铅、汞和砷)污染快速筛查、定量分析、预警和趋势预测的一整套技术、仪器、速测产品、标准及软件系统,相关仪器和速测产品在福建、湖南等省推广应用,取得良好的社会经济效益。     

大气颗粒物浓度与重金属元素分析研究进展

 综述了大气颗粒物浓度与重金属元素分析方面的研究进展,阐述了大气颗粒物的界定、来源和组成、途径和危害、检测仪器和方法、相关技术标准等,比较了国内外相关标准、检测仪器等的发展情况,指出中国在法律法规、监测标准、测量仪器开发等方面仍存在一定差距,开发自动、在线、连续监测大气颗粒物的浓度及所含重金属元素的种类、含量等一体化仪器是检测仪器的发展方向.     

纳米金免疫层析法定量检测尿RBP

应用纳米金免疫层析技术(双抗夹心法)和柠檬酸三钠还原法建立一种对尿RBP的快速定量检测方法,并在此基础上研制出快速检测试纸条.该试纸条用纳米金免疫层析定量分析仪可在15 min内实现RBP定量检测,检测限为150μg/L(相当于150 ng/mL),检测范围为150～5000μg/L.与尿微量白蛋白(ALB)、转铁蛋白(TRF)、β2-微球蛋白(β2-MG)、尿纤维连接蛋白(FN)、溶菌酶(LZM)等肾脏疾病标志物无交叉反应.该方法特异性强、检测灵敏度高、范围广、简便快捷,在近端肾小管的损伤、糖尿病肾病等肾脏疾病的早期诊断及过程监控中具有较为广泛的临床应用.