落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

簸箕柳组培再生体系的建立

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响。【结果】簸箕柳组培基本培养基成分以MS+蔗糖(30 g/L)+Phytagel(植物凝胶)(4.4 g/L)为宜。以幼嫩茎段为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理30 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理10 min,适宜诱导腋芽的生长调节剂组合为6-BA(1 mg/L)+NAA(0.01 mg/L),丛生芽继代增殖的适宜生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.05 mg/L),适宜腋芽生根的生长调节剂组合为IBA(0.2 mg/L)+NAA(0.03 mg/L)。以种子为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理10 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理2 min,光照条件下诱导愈伤组织的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.3 mg/L),并利用6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.5 mg/L)和6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.8 mg/L)两种组合方式交替使用进行愈伤组织的继代培养; 愈伤组织分化成芽的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ TDZ(0.2 mg/L),生根培养基只需添加NAA(0.01 mg/L)。【结论】以茎段和种子作为外植体,通过不同的再生途径,均可以建立簸箕柳组织培养再生体系。     

蝴蝶兰类原球茎诱导、增殖及植株再生条件初步研究

为优化蝴蝶兰类原球茎诱导和增殖再生条件,以蝴蝶兰品种‘红太阳’无菌播种形成的原球茎为材料,研究了取材时间、植物生长调节剂(6-BA、NAA)、碳源等对类原球茎诱导和增殖及分化再生的影响,结果表明,生长45d的蝴蝶兰原球茎最适于类原球茎诱导和增殖培养。最佳的类原球茎诱导和增殖培养基为:花宝1号3.5g/L+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.7mg/L+白糖20g/L+琼脂6.0g/L+活性炭2.0g/L,pH为5.4-5.8,最高增殖系数可以达到17.33,比已报道的最高增殖系数提高了35.39%;类原球茎最佳分化培养基为:花宝1号3.5g/L+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L+白糖20g/L+琼脂6.0g/L+活性炭2.0g/L,pH为5.4-5.8,最高分化率可达96.67%,生根率最高可达到92%。     

七叶一枝花组织培养和种子萌发条件的研究

为观察不同浓度赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、聚乙二醇6000(PEG6000)对七叶一枝花种子萌发的影响,采用了不同温度、光照和不同植物生长调节剂对七叶一枝花种子和根状茎愈伤组织进行诱导.结果表明:在17～22℃,光照12 h,添加0.5mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA,种子和根状茎愈伤组织的诱导率高为57%,30mg/L GA3和35%PEG6000种子萌发效果最好,萌发率分别为39.3%和37.9%.故低浓度的GA3、2,4-D和PEG6000都能促进种子萌发.     

红阳猕猴桃叶片再生体系的建立

文章以红阳猕猴桃组培苗的叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂对愈伤组织的诱导、不定芽的分化及生根的影响。结果表明,MS+0.5mg/L ZT(玉米素)+0.5mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)诱导产生淡黄色疏松的愈伤组织,MS+3.0mg/L 6-BA(6-苄基腺嘌呤)+1.0mg/L NAA(萘乙酸)诱导产生绿色致密的愈伤组织,愈伤组织诱导率均为100%。在MS+5.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上愈伤组织的不定芽分化率达到100%。在1/2 MS+1.2mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上不定芽生根率为83.3%。     

野生通江百合高频率再生植株的研究

本文报道了用野生通江百合的种子萌发的无菌苗,切取叶片、叶柄、茎段基部小鳞茎为外植体进行组织培养研究.结果表明:种子在预处理去翅后,经75%(v/v)酒精浸泡杀菌30s,0.1%(v/v)氯化汞消毒5min,灭菌效果最好;愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L;培养基MS+6-BA2.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L诱导不定芽及增殖效果最好,平均繁殖倍数9.38,增殖率100.0%;培养基MS+IBA1.00mg/L+蔗糖30g/L最适合用于诱导通江百合不定芽生根,生根率可达93.3%;炼苗后移栽成活率95%以上.     

白芨愈伤组织诱导研究

目的:以白芨假鳞茎为培养材料,进行愈伤组织诱导和抗褐化研究.方法:使用兰科常用培养基MS,B5,KC分别作为基础培养基,应用正交试验方法设计生长调节剂配比.结果:当基础培养基为MS培养基时,并且6-BA1.5mg/L+2,4-D3.0mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达73.3%.另外,添加活性炭可防止外植体褐化:活性炭含量为1.5g/L时,褐化率为44%,愈伤组织诱导效果最好;活性炭含量为3.0g/L时,褐化率最低为11%,愈伤组织诱导效果不好.结论:白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+2,4-D3.0mg/L+AC2 g/L.     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

满天星不同外植体离体培养芽形成的研究

本试验研究了满天星不同外植体,不同取材时间及生长调节剂,对芽分化形成的影响。结果表明:以茎尖为外植体,芽诱导率最高可达95 0%,茎段次之,叶片的芽诱导率很低。取材应在5月至6月间,此时芽的诱导效果最好。6-BA和KT分别在(0 1-0 5)mg L及(0 1-1 0)mg L浓度范围内,对芽的产生起促进作用,且以6-BA0 5mg L的效果为好;当6-BA或KT与生长素NAA或IBA配合使用时,可提高芽的诱导率,以NAA0 5mg L 6-BA1 0mg L的效果最优。     

蜻蜓凤梨快速繁殖的研究

通过对蜻蜓凤梨快速繁殖进行研究,结果表明:用蜻蜓凤梨试管苗茎的中部进行诱导侧芽效果比较好,培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;增殖阶段适宜培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L或MS 6-BA4.0mg/L IBA1.0mg/L NAA1.0mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;生根阶段适宜培养基为1/2MS NAA0.5mg/L 活性碳0.1%.蜻蜓凤梨组培苗容易移栽成活,移栽成活率可达95%以上.     

滇越金线莲快速繁殖技术研究

通过滇越金线莲种子无菌诱导和茎诱导芽以及丛生芽增殖、生根等试验，得出结论：滇越金线莲种子在不含激素的Hyponex 1培养基上有较好萌发率，并且在添加10％椰乳后原球茎能分化出健壮的苗。外植茎在Hyponex 1＋6-BA 1mg／L＋NAA 0．01／L培养基上诱导产生芽的几率最高；最佳增殖培养基是Hyponex 1＋BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L；生根培养基是Hyponex 1＋6-BA0．05mg／L＋NAA0．1mg／L。     

真盐生植物盐地碱蓬茎尖组织培养和植株再生

以盐地碱蓬茎尖为外植体,探讨了不同激素浓度配比对植株再生的影响．结果表明,以盐地碱蓬茎尖为外植体,在附加1．0mg/L6-BA和0．5mg／L IAA的MS培养基上培养30天可诱导出不定芽,不定芽的诱导频率达到100％以上,每个外植体的平均出芽数达到3．63,60天后形成丛生芽．不定芽转至MS培养基中培养10天生根形成完整植株．本文建立了真盐生植物盐地碱蓬高效的再生体系,为遗传转化体系的创建奠定了基础．     

植物生长调节剂促进野生茄种子发芽的研究

通过种子发芽率和发芽势指标的测定,初步研究了用不同浓度的赤霉素、细胞分裂素和油菜素内酯植物生长调节剂对野生茄托鲁巴姆种子萌发的影响．结果表明：1000mg／L浓度的赤霉素处理24h、10mg／L6-苄基腺嘌呤处理8h．300mg／L赤霉素＋10mg／L6-苄基腺嘌呤混合激素处理24h和低浓度的油菜素内酯（BR）（0．005mg／L）处理24h,该种子发芽率和发芽势均明显提高,彻底打破了休眠,促进萌发．     

生物柴油植物麻疯树综合繁殖技术研究

研究发现,麻疯树种子在播种前进行剥壳处理,有利于种子萌发。播种以覆土1 cm左右的浅播为宜,适宜的发芽温度为30℃。采用组织培养技术繁育时,愈伤组织诱导培养基以MS＋1%琼脂＋3%蔗糖＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.9 mg/L效果最佳,不定芽分化培养基以MS＋1%琼脂＋3%蔗糖＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L较适宜,而1/2MS＋NAA 1.0 mg/L培养基生根效果较佳。采用扦插技术繁育时,插条越长生根率越高,短插条扦插时,结合200 mg/L的NAA进行促生根处理也能取得较好的效果。     

贴梗海棠组培快繁技术研究

对贴梗海棠的外植体进行了愈伤组织和植株再生体系研究．结果表明,带芽茎段为最适外植体;诱导芽的最适培养基为Ms＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L芽生长培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L;在1／2MS＋NAA0.3mg／L培养基上,生根率为90％．     

大叶饲料槐高频再生体系建立及试管苗工厂化生产

通过叶片外植体愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径,建立了大叶饲料槐的高频再生系统,采用正交试验筛选出愈伤组织最适诱导培养基为;MS附加0．5mg／L 6-BA和1．0mg／L NAA;愈伤组织分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．2mg／L NAA。叶片外植体直接分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．1mg／L NAA;试管苗在1／2MS附加0．2mg／L IBA、0．1mg／L NAA和2g／L AC的培养基上生根率高达100％,移栽成活率达90％,从而实现了大叶饲料槐的工厂化生产．     

丰香草莓叶片诱导不定芽的研究

以草莓品种丰香叶片为外植体,研究基本培养基及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明:丰香不定芽分化的最适基本培养基为MS培养基;TDZ与2,4-D组合能明显提高丰香草莓叶片的再生效果;MS基本培养基附加2.0mg/L TDZ和0.05mg/L 2,4-D,不定芽再生率为67.3%,平均每叶再生芽为2.34个。试验还发现TDZ的诱导效果显著优于6-BA。     

醉蝶花的组织培养及其细胞遗传学研究

研究发现赤霉素对醉蝶花(Cleome spinosa Jacq.)种子发芽和幼苗生长有明显的促进作用，其中10mg／L浸种30min的处理对种子发芽和幼苗生长的促进作用最明显，发芽率达到80％．用不同激素组合诱导醉蝶花下胚轴和子叶形成愈伤组织，MS 6-BA0．5mg/L NAA0．5mg/L KT0．5mg／L中子叶的出愈率最高，达到100％．下胚轴出愈不及子叶，最高只有93％．MS 6-BA2mg／L NAA0．05mg/L适合于芽的分化，诱导率达到100％．以醉蝶花幼芽为材料，用常规染色体制片方法确定醉蝶花体细胞染色体数目2n=20．     

香石竹试管苗增殖培养的研究

本文探讨了香石竹试管苗增殖过程中,不同的生长调节剂、碳源、水质对增殖效果的影响。研究结果表明：在ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的生长调节剂组合下,试管苗增殖效果好、苗壮,增殖率达４．７。用４０ｇ／Ｌ的市售白糖代替３０ｇ／Ｌ化学纯蔗糖作为培养基的碳源是可行的,既降低了配制培养基的成本,又不影响苗的增殖和质量;但以自来水代替蒸馏水作培养基的水质,则不利于苗的生长和增殖。