转基因植物的非靶标效应——以转Bt基因棉为例

本文综述了转Bt基因棉的非靶标效应的研究进展,在此基础上分析了转基因植物非靶标效应研究的研究特点和不足,并对这类研究的发展方向进行了展望.     

植物抗虫基因工程研究与应用

近年来,植物抗虫基因工程研究及应用进展喜人.本文综述了利用Bt杀虫蛋白基因、豇豆蛋白酶抑制素基因、昆虫特异性神经毒素基因以及外源凝集素基因等抗虫基因开展植物抗虫基因工程研究的概况,并探讨了植物抗虫基因工程中存在的主要问题及解决的途径.     

植物抗虫基因工程研究进展

近年来 ,植物抗虫基因工程研究取得了令人瞩目的成果 .根据植物抗虫基因的来源 ,全面综述了利用Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制基因、外源凝集素基因、昆虫神经毒素基因等开展植物基因工程的研究概况 ,并且就其新进展、出现的问题和解决途径进行了讨论 .     

抗虫基因Bt的研究进展

植物抗虫基因为防治农业害虫提供了一条崭新途径。而Bt基因的应用最普遍，对Bt基因的作用机理、分类、应用及可行性改造等方面作了详尽的阐述，着重分析和探讨了目前抗虫基因Bt植物转基因育种中存在的一些问题。并就这些问题及如何合理持续利用Bt基因进行了探讨。     

新型双抗虫基因植物表达载体的构建及其在转基因烟草中的表达

用一个合成的编码完全活化的苏云金芽孢杆菌(Bt)Cry1Ac的嵌合蛋白基因BtS29K与慈菇蛋白酶抑制剂A和B的融合蛋白基因API-BA构建了双抗虫基因植物表达载体pBS29K-BA.通过农杆菌介导法将该双抗虫基因转入烟草,获得了一批可同时表达两个抗虫蛋白的转基因植株.Western blot分析结果表明Cry1Ac和API-BA蛋白的表达量分别达到3.2μg/g鲜叶重和4.9μg/g鲜叶重.用棉铃虫进行的杀虫试验表明,在中～高抗虫(70%以上的昆虫死亡率)植株中,表达双抗虫基因的植株百分数较仅表达Bt基因的高10%,比仅表达API-BA的高25%.证明用完全活化的Bt蛋白编码序列与蛋白酶抑制剂基因构建双抗虫基因表达载体可以确保两个基因抗虫功能的充分发挥.     

转Bt/CpTI基因水稻知识产权调查报告

水稻是世界上最重要的粮食作物之一.自1988年首次获得转基因水稻以来,水稻转基因技术已获得突飞猛进的发展,在抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆和改良稻米品质转基因等研究方面皆有长足进步.转基因水稻研发中涉及许多专利问题.本文以转Bt基因水稻、转CpTI基因水稻和转Bt/CpTI双价基因水稻为研究对象,对研究中所涉及的知识产权问题进行了调查.结果表明,我国在转基因水稻研究中的大多数材料和技术含有国外机构所持有的专利.本文对产生的原因和可能存在的问题进行了讨论,并对解决方式提出了建议.     

核质互作对转基因抗虫杂交棉主要性状的影响

对 4组转Bt基因抗虫杂交棉正、反交F1代的性状差异性研究表明 :株高、果枝数、单株铃数、衣分和籽、皮棉产量主要表现为受细胞核基因控制 ,核质互作效应不明显 ;铃重、子指、衣指、2 5 %跨距长度、比强度和麦克隆值是否受核质互作效应的影响 ,则取决于特定的杂交组合     

RNAi技术在植物抗病领域的应用研究进展

RNAi是一种内源的基因沉默现象.由于其简便、高效及特异性,RNAi技术在各种模式和非模式生物系统中得到了广泛的应用.植物基因工程的宗旨是将动物、植物或微生物中分离到的目的基因,通过各种手段整合到植物基因组上,使其稳定遗传并赋予植物新的优良性状.RNAi技术在植物基因工程领域得到了广泛的应用,目前已经成功培育出了抗病毒、抗细菌、抗真菌、抗线虫转基因植物.2007年,美国Monsanto公司及中国科学院研究人员利用RNAi技术分别获得了抗虫转基因玉米和棉花,为农业害虫的防控提供了新的思路和方法.本文重点探讨RNAi技术的发展史及通过RNAi技术培育抗虫转基因植物的原理和途径.     

转基因抗虫是怎么回事?

<正>将一种细菌体内的抗虫基因,通过生物技术的手段转入植物体内表达,就能让植物得到抗虫性状,免受特定害虫的侵扰。这种抗虫基因是哪里来的,如何发挥出作用的?到底对人体有没有害处呢?苏云金芽胞杆菌(又称苏云金杆菌,Bacillus thuringiensis),简称Bt,是一类可产生芽胞的革兰氏阳性细菌。Bt被广泛用于农业,特别是有机农业,以及转基因农业。它们广泛分布于世界各地的土壤、尘埃中,无论在海滩、沙漠还是冻土带,均有它们的活动踪迹。当周围环境中的营养物质缺乏的时候,营养期的Bt就开始形成芽胞,并在体内产生伴胞晶体。这种晶体主要由被称为"Cry内毒素"的蛋白质组成;而Cry内毒素,则得名于英文Crystal(晶体)的字头"Cry"。     

生物技术与作物病虫害防治

阐述了生物技术在作物病虫害防治领域的最新研究成果,包括克隆的抗卷叶病毒外壳蛋白基因转化马铃薯的培育、新型植物杀虫剂的开发、"植物伟哥"的成功研制、基因叠加技术抗虫作物的培育、植物抗逆诱导研究培育抗立枯病水稻以及转双基因抗虫水稻的研究进展和产生的效益等。     

转抗虫基因杂交稻的配制及田间表现

以质粒 pBUSCK HPT作抗虫基因供体 ,优良籼型恢复系SH5 2 7为受体 ,采用基因枪转化法 ,获得了转抗虫基因sck的植株 .通过自交和选择剂潮霉素B的筛选 ,筛选到选择标记基因纯合的单株 (T2代 ) .将纯合单株与不育系G4 6A ,D6 2A和D70 2A杂交 ,获得转抗虫基因杂交稻 .分子证据和蛋白质测定表明 ,外源基因能稳定地转移到杂交稻中并正确表达 .农艺性状测定显示 ,转基因杂交稻与对照相比 ,抗虫性有所提高 ,其它性状没有发生变化 .作者还讨论了转基因技术在水稻育种中的作用 .     

Bt水稻对青翅蚁形隐翅虫和非靶标害虫种群动态的影响

以转cry1Ab/cry1Ac基因水稻汕优63(以下简称Bt水稻)为实验材料,亲本汕优63(非Bt水稻)为对照,在田间自然条件下研究Bt水稻对稻田捕食性天敌青翅蚁形隐翅虫Paederus fuscipes Curtis和非靶标刺吸式害虫稻飞虱及叶蝉混合种群消长动态的影响.同时,进行青翅蚁形隐翅虫与稻飞虱和叶蝉混合种群的相关性分析,以期为Bt水稻的生态安全评价提供依据.结果表明,捕食性天敌青翅蚁形隐翅虫和非靶标害虫稻飞虱及叶蝉在Bt和非Bt稻田中种群动态基本一致,但Bt稻田青翅蚁形隐翅虫和稻飞虱及叶蝉数量显著高于非Bt稻田.青翅蚁形隐翅虫与稻飞虱相关性在两类型稻田中都不显著,而青翅蚁形隐翅虫与叶蝉相关性在两类型稻田中都达到极显著水平.     

回归方程在转基因水稻Bt基因定量检测中引入的不确定度评估

为了把测试分析误差控制在允许范围内,保证测试结果有一定的精密度和准确度,使分析数据在给定的置信水平内达到要求的质量,根据JJFl059.1999《测量不确定度评定与表示》技术规范,采用抗虫转Bt基因水稻定量PCR方法,测试"科丰6号"样品Bt基因的含量,初步评估了内标基因GOX和外源基因Bt的校准曲线输出值的不确定度.检测结果平均值为5.3%,接近约定真值;回归方程在转基因水稻Bt基因定量检测中引入的不确定度评估结果为0.027.Ct值的随机变化和标准曲线的非线性是回归方程引入的不确定度的主要因素,因此,在转基因生物安全定量结果不确定度评定中,应重点讨论Ct值变化与标准曲线非线性的偏离.     

杀虫微生物的研究应用方兴未艾：记全国第三届杀虫微生物学术研讨会

1990年10月17日在武汉召开了全国杀虫微生物学术研讨会,来自全国21个省市、自治区的大专院校、科研、管理、出版、生产等74个单位,200多位代表,交流了141篇论文,充分地反映了活跃在我国生物防治领域中杀虫微生物的研究和应用的新进展。其中有高层次的基础研究,例如转Bt杀虫基因的植物基因工程研究、昆虫病毒分子生物学的研究、昆虫病原细菌的致病机理的研究以     

湘文一号抗虫棉幼叶总RNA提取技术研究

棉花抗虫Bt基因克隆技术第一步就是从抗虫Bt基因特异性表达的幼叶中提取总RNA,基因的表达可以在RNA产生的不同阶段进行调控,纯化完整的总RNA是进行基因表达研究和从cDNA克隆新基因的基础.对比分析了CTAB-licl法、改良异硫氰酸胍一步法、Trizol一步法和试剂盒提取方法4种RNA提取技术,经琼脂糖凝胶电泳谱带结果检验和紫外分光光度计检测,发现前2种方法很难提取到理想的RNA,而后2种提取的RNA完整性较好,但用RNA Out试剂盒提取的RNA更加适用于反转录cDNA.     

转Bt基因杨树(NL-80106)对杨小舟蛾抗虫性研究

以转Bt抗虫基因杨树(NL-80106)的大田移植苗为材料，在室内控制和自然条件下测定其对畅小舟蛾幼虫的抗虫性。结果表明：转Bt基因杨树对杨小舟蛾1龄幼虫12d校正死亡率高达84．3％；其杀虫活性存在明显的时间动态，3个抗虫转基因杨树无性系FIN5、FB51和FB56对1龄幼虫12d的抗性由6月的56．9％～84．3％下降至7～8月的35．6％～45．1％，9月又回升至59．4％～80．8％；不同龄期幼虫对转基因杨树敏感性不同，1～3龄幼虫6d校正死亡率为19．8％～25．4％，与对照存在显差异，而4～5龄幼虫6d校正死亡率与对照差异不显；转Bt基因杨树对大部分杨小舟蛾幼虫的生长具有明显抑制作用，取食量、体重增长速率显低于对照，并导致幼虫最终死亡。     

杀虫防菌Bt工程菌的构建

N-乙酰高丝氨酸内酯（N-acyl-homoserine lactones,AHLs）是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,能够调控许多植物病原菌的致病基因的表达,但如果内酯酶将其水解,则会影响病原菌的致病活性,植物就不会染病。苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）,作为生物杀虫剂已有多年使用的历史,本研究通过生物技术手段成功地构建了携带信号分子AHL水解酶基因的穿梭载体pHTss10304,并转入到具有Bt中,构建成工程菌Bt24、工程菌Bt33、工程菌Bt34和工程菌Bt36。通过设计,实现了Bt工程菌的多功能改造,为BT工程菌的应用提供了更为广阔的空间,为生物防治菌的开发现有菌剂提供了新的思路。     

转Bt杀虫蛋白基因植物及其抗虫性研究进展

利用遗传工程技术将苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ Ｂｅｒｌｉｎｅｒ简称Ｂｔ）杀虫蛋白基因导入植物是近年来的研究热点,本文就Ｂｔ基因的转化及其在植物中的表达与抗虫效果、转Ｂｔ基因植物的产量及品质以及存在的风险与安全性等方面的研究进展作一综述．     

抗虫基因在转基因植株中聚合的初步研究

以质粒 pBUSCK HPT ,pCUSBK HPT和pGNA HPT作抗虫基因供体 ,优良籼型三系恢复系SH5 2 7和广亲合系W 2 0 0 8为受体 ,采用基因枪转化法 ,获得了转修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 (sck)、修饰的Bt毒蛋白基因 (sbk)和雪花莲凝集素基因 (gna)的植株 .通过人工杂交 ,将外源基因聚合 .分子证据显示 ,作者获得了抗性基因聚合的材料 .蛋白活性测定表明 ,聚合基因的表达因载体结构相似而受到影响 ,但抗虫性却得到提高 .作者还讨论了聚合转基因在水稻育种中的作用和及其相关问题 .     

转基因抗虫棉花木质素含量及其生物合成关键酶活性研究

通过盆栽试验,以不同转基因抗虫棉花及其亲本对照为供试对象,研究木质素含量及其生物合成关键酶活性.结果表明:与非转基因棉花比较,在蕾期及铃期,转基因抗虫棉花Z30,CCRI41,SGK321叶片、茎秆组织中的木质素含量及叶片内的苯丙氨酸解氨酶和过氧化物酶活性发生了一些变化,但其显著性改变仅特异性地发生在某些品种、某些组织或某些时期内.在蕾期,转Bt基因棉花Z30茎秆组织中的木质素含量比其常规棉对照Z16显著下降,幅度达34.96%;转CpTI-Bt棉花CCRI41茎秆组织和SGK321叶片组织中的木质素含量比其常规棉对照显著下降,幅度分别为27.15%,13.22%.所有供试转基因抗虫棉花的木质...