热处理对HeLa细胞微管影响的研究

目的:用HeLa细胞作模型,研究热处理对肿瘤细胞微管的影响.方法:用不同温度(37°C、、40°C43°C和45°C)经不同时间(1h和2h)水浴处理培养的HeLa细胞后,分别即时用SABC法显示其微管.结果:与37°C相比,40°C处理后的HeLa细胞微管变化不大,43°C处理后,微管开始解聚,并随着作用时间的延长而加剧,45°C处理2h,微管组织中心消失.结论:高温能引起HeLa细胞微管呈现渐进式的解聚变化,微管组织中心具有较强的保护作用.     

芒果多酚对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机制

用芒果多酚处理人宫颈癌细胞(Hela)后,采用MTT法检测细胞的存活率;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用Western blot检测p53,p21,c-myc,cyclin D1蛋白质水平变化.结果显示：0.025,0.05, 0.1,0.2,0.4 mg/mL的芒果多酚溶液能明显抑制Hela细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性;荧光染色后,大多数细胞内可以看见浓密的荧光颗粒,并出现核收缩;流式细胞术分析发现,与未处理组比较,芒果多酚作用后的G1期Hela细胞数显著增多,G2期细胞数逐渐减少;凋亡率明显高于对照组;Western blot检测显示芒果多酚上调p53,p21蛋白水平,下调c-myc,cyclin D1蛋白水平. 以上结果表明芒果多酚能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡.     

紫杉醇诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇抑制HeLa细胞生长的机制。方法：经荧光染色、电镜观察细胞形态,DNALadder及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果：紫杉醇作用24h经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色,作用48h细胞被染成红色,电镜观察可见细胞变小,染色质浓缩并产生凋亡小体,DNALadder未见明显的梯形条带,流式细胞仪检测紫杉醇作用24h细胞凋亡。结论：紫杉醇可诱导细胞凋亡,也可直接杀伤HeLa细胞,而且以后者为主。     

恩度对雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制的研究

研究了重组人血管内皮抑素(恩度)对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞株生长的抑制作用与其分子机制.采用MTT法、台盼蓝染色法和中性红染色法检测不同浓度恩度对MCF-7细胞生长的抑制作用,Hoechst33258荧光染色法和TUNEL分析法观察恩度诱导MCF-7细胞凋亡的形态变化,蛋白印迹法检测恩度作用的MCF-7细胞中与生长和凋亡相关蛋白的表达.结果表明,恩度显著性地抑制MCF-7细胞的生长并诱导细胞凋亡.此外,恩度显著性地减少MCF-7细胞VEGFR1,c-Met,ERα,Akt,NF-κB,Bcl-2和CyclinD1蛋白的表达,明显地上调Bax蛋白的表达,其作用的分子机制可能是通过抑制VEGFR1/c-Met/ERα-Akt-NF-κB信号传导通路,下调Bcl-2/Bax蛋白比率、降低CyclinD1蛋白的水平.     

灭多威对美国棉铃虫细胞的抑制作用研究

运用 LKB2 2 77生物活性检测仪在 2 8℃下测定了昆虫细胞 (美国棉铃虫 Hz)的离体基础代谢热值 (其值为 2 3.6p W/ cell) ,研究了不同浓度的灭多威农药对昆虫细胞代谢产热功率的影响 ,并对其影响进行了讨论 .同时测得了农药 (灭多威 )对美国棉铃虫 Hz的半抑制量浓度 EC5 0 为1 96μg·m L- 1 ,并讨论了抑制率与农药浓度之间的关系     

电磁脉冲各参数对HeLa细胞可逆穿孔影响的研究

通过对HeLa细胞进行电磁脉冲处理,可以看到细胞膜电穿孔.穿孔的几率及深度与脉冲的各参数有关.细胞膜表面的微绒毛受到一定程度的损伤,还可见到火山形的喷口和喷出物.经实验研究,得到了在离体条件下HeLa细胞电穿孔的最佳电脉冲参数.     

PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响。结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)%(P<0.05)。表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似。PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强。但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响。小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响。结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化。     

双氯芬酸对Jurkat细胞的抑制作用

目的:探讨双氯芬酸体外对淋巴瘤细胞的抑制作用及机制。方法:分别以双氯芬酸10、30、100μg·mL-1体外处理T细胞淋巴瘤细胞系(Jurkat细胞),采用流式细胞仪和细胞生长曲线观察双氯芬酸对Jurkat细胞的影响。结果:双氯芬酸在体外显著抑制Jurkat细胞的增殖,其抑制作用随着剂量的加大而增强,和空白对照组比较有显著性差异。经流式细胞仪分析显示,双氯芬酸与Ju rkat细胞共同培养,可使细胞凋亡率显著升高。结论:双氯芬酸体外能显著抑制Jurkat细胞的增殖,此作用可能与诱导淋巴瘤细胞发生凋亡有密切关系。     

Sry基因的克隆及其在HeLa细胞中的表达

目的:构建真核表达重组质粒pCR3.1-Sry.并检验其在真核细胞内的表达.方法:用PCR法从小鼠基因组中扩增出Sty全长基因,重组入pMD18-T载体,酶切鉴定重组质粒,对酶切正确的重组质粒测序.双酶切测序验证的重组质粒.将切下的片段与真核表达质粒pCR3.1相连构建pCR3.1-Sty重组质粒.将其转染HeLa细胞后,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA的转录;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白质的表达.结果:PCR法扩增得到了1.2 kb的特异性Sry基因片段;成功地构建了真核表达重组质粒pCR3.1-Sry;重组质粒pCR3.1-Sry在HeLa细胞中mRNA及蛋白水平均可检测到表达.结论:重组质粒构建成功并可以在体外真核细胞中表达,为进一步研究其作为核酸疫茁的免疫作用提供了可控的实验材料.     

CdTe量子点对HeLa细胞的初步标记

采用巯基丙酸作为稳定剂在水相中合成了水溶性的CdTe量子点,并通过量子点外层包被的羧基实现了量子点与兔抗人癌胚抗原抗体和山羊抗兔免疫球蛋白的链接.把链接了兔抗人癌胚抗原抗体的量子点溶液和链接山羊抗兔免疫球蛋白的量子点溶液作为荧光探针,利用直接法和间接法分别对HeLa活细胞和固定细胞进行了标记.通过荧光显微镜成像观察到直接法和间接法均可以对HeLa细胞进行标记,但间接法具有更好的特异性,表明可以通过癌细胞表面的癌胚抗原与抗体之间的免疫反应实现对癌细胞的荧光标记.     

紫杉醇与褪黑素联合使用对HeLa细胞的生长影响研究

目的：研究紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响。方法：通过生长曲线、集落形成试验观察二者联合应用对HeLa的影响作用。结果：单独应用紫杉醇和褪黑素与二者联合应用其生长曲线、集落形成试验的结果无明显差别。结论：紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响与单独应用二者无明显差别。     

SBHL对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因表达的研究

目的 观察澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-rass和hTRT基因表达的影响.方法 用鼠抗人c-myc McAb,H-ras McAb和hTRT PcAb作为一抗,生物素化羊抗鼠IgG作为二抗,用免疫组化方法测定澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因的表达.结果 澳洲茄胺盐酸盐处理的HeLa细胞与对照组相比,c-myc,H-ras和hTRT基因的表达均明显降低(P<0.05).结论 澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞c-myc和H-ras基因的表达,抑制细胞增殖,诱导分化;澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞hTRT基因的表达,抑制端粒酶活性,抑制细胞生长.     

三尖杉酯碱诱导HeLa细胞凋亡的研究

报道了三尖杉酯碱 (harringtonine ,HT)可以诱导HeLa细胞凋亡 .采用Heochst33342荧光染色、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞光度术 (FCM)的方法 ,研究了HT对HeLa细胞凋亡的影响 .利用细胞同步化技术和斑点杂交法研究发现 ,HT影响了HeLa细胞c myc和bcl 2基因的表达并且与细胞周期密切相关 .初步探讨其凋亡诱导的机制 ,认为HT通过在G1和G2 期下调细胞凋亡抑制基因bcl 2的诱导凋亡 ,以及下调c myc癌基因阻滞细胞增殖 ,并延迟凋亡发生 .这些结果对于了解HT的药物作用机制和提高临床化疗疗效具有重要意义 .     

转铁蛋白偶联荧光纳米钻石靶向体系的制备及HeLa细胞吸收机制研究

以荧光纳米钻石(FND)作为药物载体和探针,转铁蛋白(Tf)作为靶向配体,聚赖氨酸(PL)做桥梁,制备了荧光纳米钻石-聚赖氨酸-转铁蛋白(FND-PL-Tf)靶向纳米颗粒;以人宫颈癌细胞(HeLa cells)为体外模型,研究靶向纳米颗粒与细胞的作用,探讨细胞摄取纳米颗粒的转运机制,为纳米颗粒靶向输送药物和肿瘤检测提供有价值的理论依据。结果表明细胞摄取FND-PL-Tf纳米颗粒的数量与颗粒浓度、时间及纳米颗粒表面偶联转铁蛋白量有关;由物理吸附或共价偶联Tf获得的FND-PL-Tf纳米颗粒均为网格蛋白决定、转铁蛋白受体介导机制进入细胞。这些研究表明FND-PL-Tf纳米颗粒具有潜在的靶向输送药物和肿瘤靶向检测功能。     

反义HSP90诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的 探讨反义ＨＳＰ９０降低ＨｅＬａ细胞恶性度的机制。方法 经荧光染色观察细胞形态,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果 转染有反义ＨＳＰ９０的ＨｅＬａ细胞经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色,荧光染色观察可见细胞变小,染色质浓缩并产生凋亡小体,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ可见明显的梯形条带,流式细胞仪检测有凋亡的细胞。结论 反义ＨＳＰ９０可诱导细胞凋亡。     

芒果苷对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用及其机制研究

利用相差显微镜观察细胞形态变化情况;用MTT法测定芒果苷对A549细胞增殖作用的影响以及Western-Blot法检测芒果苷对Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白分子表达水平的影响.结果显示,与对照组相比,芒果苷对人肺腺癌A549细胞的抑制率与浓度和时间均呈正相关性.在有效浓度为3μM,作用最佳时间为48h时,A549细胞的镜下形态和结构发生显著的变化;并且导致Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性以及它们的剪切小体数量增加.表明芒果苷对人肺腺癌A549细胞具有抑制增殖的作用,并且通过caspase依赖性途径诱导A549细胞凋亡.     

4HPR对Hela细胞的抑制作用

目的：国外文献报道４ＨＰＲ对乳腺癌具有显著的化学预防及治疗作用。本文拟探讨４ＨＰＲ对Ｈｅｌａ细胞的抑制作用。方法：运用荧光显微镜、电子显微镜、动物致癌试验及流式细胞仪分析等方法。结果：通过荧光显微镜、电子显微镜观察发现Ｈｅｌａ细胞发生明显的形态学改变；流式细胞仪检测，Ｈｅｌａ细胞ＤＮＡ出现显著改变；裸鼠致癌试验也提示４ＨＰＲ抑制Ｈｅｌａ细胞生长。结论：上述结果提示４ＨＰＲ在体内外对Ｈｅｌａ细胞均具有较强的抑制作用。     

苯甲醛及其类似物对酪氨酸酶抑制作用的研究

酪氨酸酶是一种金属铜蛋白,广泛存在于自然界中,在生物体合成黑色素过程中起着关键作用。分别以多巴和以邻苯二酚作为酪氨酸酶催化底物,对苯甲醛及其类似物对酪氨酸酶抑制作用机理进行了详细的研究,并利用CD(圆二色谱)研究了苯甲醛类化合物对酪氨酸酶的构象影响,提出苯甲醛及其同系物与酶分子相互作用的可能机理。     

HER—2基因打靶对HeLa细胞生长的抑制

构建具有正，负筛选特性的ＨＥＲ－２基因打靶载体，ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｐＰＮＴ１３０５．用电穿孔法把线法ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｐＰＮＴ１３０５导入ＨｅＬａ经Ｇ４１８正筛选及丙氧鸟苷我筛选，选出了敲除了ＨＥＲ－２单等位基因的打靶命中细胞。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交表明，ＨＥＲ－２＾－１     

葡萄糖饥饿对HeLa细胞形态与结构的影响

为了探究葡萄糖饥饿对HeLa细胞形态与结构的影响,采用噻唑蓝法检测了细胞活力;用倒置显微镜、荧光显微镜和电子显微镜观察了细胞形态与结构的变化;采用激光共聚焦免疫荧光技术观察了细胞微丝与微管的分布.结果表明:葡萄糖饥饿能够抑制HeLa细胞增殖,破坏细胞骨架,改变细胞形态;使细胞皱缩、染色质凝集,出现凋亡小体,微丝微管解聚,表现出典型的凋亡特征,且细胞凋亡程度呈葡萄糖浓度依赖性和处理时间依赖性.总之,葡萄糖饥饿能抑制HeLa细胞活性,改变细胞形态,诱导细胞凋亡.