暗纹东方鲀蛋白酶活性的研究

pH是影响蛋白酶活性的显著因素之一 .本文仅初步探讨了pH对一龄、二龄两种规格暗纹东方的胃、肠、肝胰脏蛋白酶活性的影响 .结果表明 ,一、二龄鱼的胃蛋白酶最适pH均在 2 .2 ,肠蛋白酶最适pH为 8.5 ,而一龄鱼肝胰脏蛋白酶最适pH在 9.0以上 ,二龄鱼的最适pH为 8.5 .另外 ,蛋白酶活性大小依序为胃、肠、肝胰脏 .0 .5mol/LCaCl2 溶液能明显的抑制胃蛋白酶的活性 .     

养殖三龄暗纹东方鲀性腺发育及其毒性

对三龄养殖暗纹东方鲀性腺发育情况进行了较全面观察与测量,同时对其卵巢和肝脏的毒性进行了检验,结果表明养殖三龄暗纹东方鲀雌鱼和雄鱼性腺均发育到了第ＩＶ期,成熟系数在１９．８～２６．０ 之间,存在作为种鱼进行全人工繁殖的可能性;养殖三龄暗纹东方鲀的肝脏和卵巢均未检出毒性．     

暗纹东方鲀线粒体若干tRNA基因的克隆及序列分析

利用分离纯化的暗纹东方鲀肝脏mtDNA为模板，按照红鳍东方纯（Takifugu rubripes）mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增，首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的Cytb、COⅠ、COⅡ、COⅢ、D-loop等5个重要基因及其侧翼的8个tRNA基因。上述基因均已在GenBank登录。8个tRNA基因含有69-72个碱基。推定了各个tRNA的二级结构并进行了初步的序列分析。结果表明：8个tRNA基因具有较为典型的三叶草型结构，各臂的碱基配对率大多数较高，稳定性较好.     

暗纹东方鲀鱼苗培育中苗间互残行为对成活率的影响

暗纹东方鲀育苗期饵料不同投喂量与成活率的关系表明，苗期相互残食是其行为特征．鱼苗饱食时残食减轻，饥饿时残食加重．鱼苗个体大小差异不显著时残食减轻，差异显著时残食加重．喂食人工饵料的驯化完成后，残食现象大大减轻．     

暗纹东方鲀线粒体12S rRNA基因的克隆及序列分析

利用提取纯化的暗纹东方纯肝脏的mtDNA为模板,按照红鳍东方纯mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增,首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的12S rRNA基因.同时运用DNA分析软件,对暗纹东方纯与GenBank中选取的几种同目鱼类的相应序列进行比较分析,显示暗纹东方纯与这些鱼类的12S rRNA基因具有较高的同源性.利用分子生物学相关软件,对暗纹东方纯及与其同目的5种鱼的12S rRNA基因序列建立NJ和MP分子进化树,并与传统的分类地位进行比较,结果表明与传统的分类地位基本吻合.     

野生与养殖暗纹东方Tun（Fugu obscurus）脂肪酸组成和 …

对野生及２龄养殖暗纹东方Ｔｕｎ肝脏和肌肉总脂中脂肪酸的组成和含量进行了测定,结果表明主要的组分均为１６：０,１６：１,１８：１,其中１８：１是最主要的脂肪酸,野生暗纹东方Ｔｕｎ肝脏和肌肉总脂中的脂肪酸种类,尤其是多烯酸种类,均多于养殖鱼。     

嗜水气单胞菌感染暗纹东方鲀脾脏的蛋白质组学分析

为了解暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)受到病原菌感染后参与应答的主要蛋白的功能与调控作用,采用TMT标记、高效液相色谱(HPLC)分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,分析了暗纹东方鲀感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 12 h后脾脏组织的蛋白表达水平,鉴定差异表达蛋白,并通过亚细胞定位、GO(Gene Oncology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)对差异表达蛋白进行进一步分析.本次实验共鉴定到306个差异表达蛋白,其中120个上调表达蛋白,186个下调表达蛋白;利用平行反应检测实验(PRM)对4个(1个上调,3个下调)与免疫相关的差异蛋白进行验证,其结果与蛋白质测序结果一致;亚细胞定位结果显示:差异表达蛋白主要定位在细胞质、细胞核和胞外; GO分析发现:差异表达蛋白参与的主要生物进程有代谢过程、细胞进程和单一生物进程,主要的分子功能有结合、催化活性和机构分析活性; KEGG通路分析结果显示:差异表达蛋白主要参与了核糖体、视黄醇代谢、卟啉和叶绿素代谢、ECM受体相互作用、吞噬体...     

暗纹东方鲀线粒体ND1及其侧翼tRNA基因的克隆及序列分析

利用提取纯化的暗纹东方纯（rakifugu fasciatoz）肝脏的mtDNA为模板，按红鳍东方纯（rakifugu rubripes）mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增，首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的ND1亚基及其侧翼的tRNA基因。运用DNA分析软件，对暗纹东方纯与GenBank中选取的几种同目的鱼类的相应序列进行比较分析，显示暗纹东方纯与这些鱼类的各个相应基因具有较高的同源性。利用分子生物学相关软件，对暗纹东方纯及与其同目的6种鱼的ND1基因序列建立NJ和MP分子进化树，并与传统的分类地位进行比较，结果表明与传统的分类地位基本吻合。3个tRNA基因含有69～71个碱基，推定了各个tRNA的二级结构，均具有较为典型的三叶草型结构。     

野生和人工养殖暗纹东方鲀不同组织中河豚毒素(TTX)含量的初步研究

采用小鼠生物检测法测定了野生和人工养殖暗纹东方不同组织中河豚毒素（ＴＴＸ）的含量．野生暗纹东方不同组织中ＴＴＸ含量由高到低依次是：卵巢、肝脏、胃肠、肾脏,肌肉毒性最小;而人工养殖暗纹东方不同组织中ＴＴＸ含量都极低,几乎无毒．结果表明,用人工养殖方法可以培育出低毒或无毒河豚,在一定程度上支持了河豚毒素的微生物起源学说．     

硬骨鱼类性别决定与分化相关基因研究进展

鱼类是脊椎动物中最低等但分布最广、种类最多的一类生物.与高等脊椎动物不同,鱼类的性别决定除了受遗传因素的影响,外界环境(激素水平、温度、盐度、氧气等)和自身内分泌调节也发挥了重要作用,因而其性别决定与分化机制极其复杂.尽管如此,遗传因素仍然是鱼类性别决定与分化的关键因素.本文通过对影响硬骨鱼类性别决定及分化的遗传因素(包括sox,dmrt1,amh,gsdf,cyp19a1a,foxl2等性别决定及分化相关基因和Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路)的研究动态与进展进行综述,为更深入的探索鱼类性别决定与分化机制提供参考.     

Population Genetic Structure and Genetic Differentiation of the Pufferfish Takifugu Rubripes and Takifugu Pseudommus Revealed by RAPD Analysis

RAPD analysis is used to assay the population genetic structure and genetic differentiation of pufferfish T.rubripes and T.pseudommus.One hundred and twenty fragments are aplified with 21 random sequence 10-mer primers.The proportion of polymorphic fragments of T.rubripes populations from the coast of China(TRC),the coast of Japan(TRJ),general population of T.rubripes both from China and Japan(TRCJ),and the population of T.pseudommus are 31.7%,33.3%,35.0%and 39.2% respectively.The mean expected heterozygosities of the four populations are 0.116,0.125,0.126,and 0.144,respectively.Low genetic distances(ranging from 0.0118 to 0.0309)and Fst estimates(0.020 to 0.024) among the populations indicated that there is no significant differentiation between T.rubripes and T.pseudommus and suggested that only one species is involved.     

海水养殖真鲷肝CYP1A基因的克隆与表达

根据国外已发表野生真鲷(Pagrus major)肝CYP1A cDNA同源序列,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从我国海水养殖真鲷(Pagrus major)的肝脏中扩增出P4501A基因全长cDNA序列(1 548 bp).用基因重组技术将P4501A cDNA克隆于pTrc-CKS载体,在大肠杆菌TOP10F′诱导表达,将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;其表达产物为89 ku,获得了表达融合蛋白CKS-CYP1A.该项研究将为利用免疫学技术研究有机污染物的毒性效应机制以及探讨P450酶作为毒性效应的生物标志物奠定基础.     

阿特拉津对泥鳅性腺及性别分化相关基因的影响

以泥鳅为材料,首先确定了阿特拉津对泥鳅的急性毒性.在此基础上采用组织学切片和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法研究了阿特拉津长期处理对泥鳅性腺形态和性别分化相关基因表达模式的影响,以期准确评估阿特拉津的环境毒性和对水生生物生殖发育的作用.结果表明:阿特拉津对泥鳅的24h、48h、96h的半数致死浓度(LC50)分别为31.60mg/L、26.82mg/L、18.98mg/L,安全质量浓度(SC)为5.8mg/L.随着阿特拉津浓度的增加和处理时间的延长,泥鳅的死亡率明显的升高.通过组织学研究发现高浓度的阿特拉津(2.68 mg/L)处理泥鳅21d能够抑制泥鳅精巢精子的发生,促进卵巢细胞的发育.同时qRT-PCR结果显示:与对照组相比不同剂量的阿特拉津(2.68mg/L,0.268mg/L,0.0268mg/L)能够显著的诱导细胞色素P450芳香化酶基因(cyp19a),类固醇生成因子(sf1)的表达,对抗缪勒氏管激素(amh)有显著的抑制效应.因此,阿特拉津对泥鳅有明显的外源雌激素效应;通过干扰类固醇激素合成基因的表达影响生殖细胞的生成;也通过某种未知的机制干扰性别分化上游基因的表达,从而影响性腺分化.     

菠萝蛋白酶诱导K562细胞分化及其对P53基因表达的影响

为进一步证实菠萝蛋白酶对肿瘤细胞的诱导分化作用,采用形态观察计数、血红蛋白定量测定、发光法测定细胞吞噬能力和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ原位杂交法观察和检测了菠萝蛋白酶诱导Ｋ５６２细胞分化及其ｐ５３基因表达变化．结果显示,菠萝蛋白酶可诱导Ｋ５６２细胞向红系和粒／巨噬系两个方向分化;在菠萝蛋白酶作用下,ｐ５３基因于给药后８ｈ转录表达增强,２４ｈ达高峰,此后又下降,其时相变化先于分化发生．这些结果提示ｐ５３基因在Ｂｒｏｍｅｌａｉｎ诱导Ｋ５６２细胞分化过程中可能起启动分化的重要作用,有关机制尚待深入研究．     

《灿烂千阳》中的女性角色特质及其成因——以西蒙·德·波伏娃的《第二性》为依托工具

玛丽雅姆与莱拉作为《灿烂千阳》中代表着两种不同时代与背景的女性角色,她们既有着先后传承的相似之处,又因其生活环境与个人经历的不同而形成了迥异的人物性格与斗争方式。借助被称为＂女权主义圣经＂的西蒙·德·波伏娃所著的《第二性》为基本分析工具,探讨了在阿富汗特定社会背景下女主人公玛丽雅姆与莱拉的性格特质及其形成的原因。     

尼罗罗非鱼雌性性腺关键LncRNA的鉴定和表达分析

生殖细胞的分化与发育是硬骨鱼类性别分化的重要环节,并受到遗传和环境2个因素的影响.为研究LncRNA在硬骨鱼类卵母细胞发育以及性别分化中的作用,课题组通过转录组测序获得了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)雌、雄性腺中呈现差异表达的LncRNA,并选取LncRNA(TCONS_02477925)开展研究.发现该LncRNA具有2个外显子,属于典型的基因间LncRNA(Intergenic LncRNA),转录本全长1 537 nt,基因组定位于19号连锁群(Linkage Group 19,LG19)上,并且该基因在卵巢的表达水平显著高于精巢.荧光原位杂交结果表明,该LncRNA主要表达在I和II时相的卵母细胞的细胞质中.转录组测序结果及生物信息学分析发现,qrsl1和rtn4ip1可能是该LncRNA的cis靶基因,并且2个靶基因在卵巢中表达丰度较高.因此,本研究表明该LncRNA在罗非鱼卵母细胞发育和性别分化中可能有重要的作用.     

电影《罗曼史》对“性”中之男女的剖析

性一直是人类涉及的敏感区,但又确实体现出人类的本质属性。法国著名女导演凯特琳.布雷亚在电影中通过对性的剖析,显示了男权社会下的男性与女性的生态。