猪源双歧杆菌筛选及生物特性参数测定

采用双歧杆菌选择性培养基，从健康猪肠道和粪便中共分离到９０株细菌，根据微生态学关键指标，筛选出１０株双歧杆菌，这些菌株能够耐受０．８％－１．０％的胆盐，在ＰＨ３．５ＢＳ肉汤中３７℃下保浊ｈ存活率在４０％以上，代谢产物对４种常见致病菌均有不同程度的抑制作用，双歧杆菌与上述４种致病菌在ＢＳ液体培养基中混合培养到３６ｈ，能够彻底清除病菌，３株双歧杆菌对小猪肠道上细胞有良好的粘附作用。     

一株新的氧化硫硫杆菌的分离纯化与培养

采用Starky-Na2S2O3和Waksman液体培养基以及Starky-Na2S2O3-琼脂固体培养基,从某矿矿坑水中分离、纯化得到一株新的氧化硫硫杆菌,并初步研究了这株氧化硫硫杆菌在液体培养基Starky-Na2S2O3和W aksman中的生长情况,发现W aksman培养基更适合用来培养这株氧化硫硫杆菌.     

菊糖及其酶解产物对长双歧杆菌的促生长作用

研究了长双歧杆菌在分别以葡萄糖、菊糖和菊糖酶解所得低聚果糖为碳源的培养基中的生长情况,在这些培养基中,长双歧杆菌最高菌体质量浓度分别是0.30、0.37、0.41,g/L,在以菊糖和低聚果糖为碳源的培养基中的增殖情况要好于以葡萄糖为碳源的培养基,通过原子力显微镜对长双歧杆菌的形态进行观察,发现在分别以菊糖和葡萄糖为碳源的培养基中其形态无明显差别.     

两歧双歧杆菌培养基成分的改进

根据双歧杆菌的特殊生长要求及培养基的设计原则,在比较３０余种现有双歧杆菌与乳酸菌培养在的基础上,设计了ＢＩＢ培养基,并通过选择ＢＩＢ中最适蛋白胨品种及增加适量泡菜汁,改进ＢＩＢ为ＢＩＢ－１。结果表明;每毫升ＢＩＢ－１,培养基培养两歧双歧杆菌ＡＴＣＣ２９５２１所得的最高活菌数约为其他培养基的１０－３０倍。     

两歧双歧杆菌增殖培养基的优化

针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交试验设计优化增殖培养基,结果表明,酵母膏是影响短双歧杆菌的显著因素,最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%.用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18 h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010cfu/ml.     

一个GAP启动子的分析及点突变体构建

甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(GAP)作为常见的持家基因在微生物中普遍表达,因而其启动子(PGAP)被认为是一个强的组成型启动子;首先,预测并克隆了双叉双歧杆菌的GAP启动子,并利用葡萄糖醛酸苷酶基因为报告基因,分析了PGAP在大肠杆菌和双歧杆菌中驱动表达的强度;不同碳源的发酵实验表明:PGAP在葡萄糖培养基中强度最高,而3种底物类似物对PGAP强度的影响各不相同;对PGAP预测的-10区进行了系列点突变,具有更接近sigma 70启动子共有序列的突变体p MGAP3表现出更高的驱动强度;最后,通过对代表性双歧杆菌PGAP序列的比对,表明在一些核心区域,如可能的TATA盒、转录起始位点、核糖体结合位点高度保守。     

两种海洋寡糖对双歧杆菌体外生长作用的影响

壳寡糖、褐藻寡糖是具有独特生理活性的功能性海洋寡糖。以壳寡糖、褐藻寡糖分别代替葡萄糖作为培养基的碳源,观察双歧杆菌在体外生长的情况,比较分析2种寡糖对双歧杆菌生长的作用效果。结果表明：2种寡糖可使双歧杆菌大量增殖,对双歧杆菌体外生长有显著的促生长作用,且作用效果明显优于葡萄糖。褐藻寡糖在2.5~1.25 g.L-1范围内,作用变化幅度较小;而壳寡糖则表现为高浓度优于低浓度。培养基中添加壳寡糖的最佳质量浓度为1.25 g.L-1,添加褐藻寡糖的最佳质量浓度为0.625 g.L-1。     

低聚木糖对两歧双歧杆菌的增殖

以酶解低聚木糖为碳源，在严格厌氧条件下增殖两歧双歧杆菌。研究表明，低聚木糖可有效增殖两歧双歧杆菌，两歧双歧杆菌对该糖的转化率与对葡萄糖的相近。将低聚木糖在浓度为5.0-10g/L的范围内增加其初始浓度，可提高双歧杆菌的菌体浓度和增殖速率，低聚木糖对两歧双歧杆菌和青春双歧杆菌的双株混合培养效果明显优于单株培养，其功能完全符合人体的生理特点，适宜于低聚木糖在人体内自然增殖双歧杆菌菌群。     

甘蓝型油菜3个AP3重复基因植物反义表达载体的构建及遗传转化

利用pFGC5941构建了甘蓝型油菜3个AP3重复基因的植物反义表达载体pFGC5941-BnAP3-2、pFGC5941-BnAP3-3和 pFGC5941-BnAP3-4.采用快速冻融法,将载体导入农杆菌EHA105,转化甘蓝型油菜下胚轴.在5mg/L PPT的MS培养基中筛选,获得反义BnAP3-2基因的抗性再生植株31株,反义BnAP3-3基因的抗性再生植株20株,反义BnAP3-4基因的抗性再生植株42株.PCR鉴定结果显示,获得BnAP3-2反义的基因植株12株,BnAP3-3反义的转基因植     

Fermentation of Bifidobacterium lactis utilizing Tilapia viscera

罗非鱼加工过程中产生大量的下脚料,下脚料中的内脏一般不能被正确处理或高效利用.本研究采用液体发酵工艺,以细菌数为检测指标,以罗非鱼内脏为基本营养发酵乳双歧杆菌Bi07,通过单因素实验和正交实验(L9(34))对其发酵培养基配方和发酵条件进行了优化.优化后的最佳发酵培养基配方为:葡萄糖质量浓度为10 g/L,m料∶m水=1∶7.5,m( NaHCO3)∶m(C3 H7 NO2S·HCI) =4:5,番茄汁体积分数为100 mL/L;最优发酵条件为:发酵时间36 h,发酵温度30℃,接种体积分数5％,初始pH7.0.本研究表明,罗非鱼内脏可以用于乳双歧杆菌的培养基中.