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相似文献
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1.
水稻颖果总RNA提取方法的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
利用TRIZOL试剂快速提取法、异硫氰酸胍法和改良的SDS法提取不同发育时期水稻颖果的总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取获得的RNA样品的品质.研究结果表明,改良的SDS法提取的RNA具有28SrRNA和18S rRNA 2条清晰的条带,且无降解.其D260/D280为1.84~1.97,具有较高的纯度.其他2种方法获得的RNA品质较差,有降解和弥散现象.将改良的SDS法提取的RNA逆转录成cDNA,作为PCR扩增的模板,可获得清晰的约1.7kb的目的条带.该法提取的RNA用于Northern杂交,可产生特异的杂交信号.这些结果进一步证明了改良的SDS法提取的RNA具有很高的品质与纯度,可以满足下一步分子生物学研究的需要.  相似文献   

2.
以小麦苗为材料,通过一些生物化学与分子生物学操作获得总RNA。其条带整齐、清晰,OD260/OD280在1.93~2.06之间,RT-PCR检测PCR产物在500bp处。这些结果表明提取的总RNA质量很好,纯度很高,完整性很好,且适用于cDNA文库的构建、Northern印迹及mRNA差异显示等下一步工作。  相似文献   

3.
总RNA提取方法的比较与分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
用TRIZOL法、CTAB法和改良的热硼酸盐法从水稻叶片中提取总RNA,结果表明用这三种方法提取总RNA的OD260nm/OD280nm值分别为1.896、1.992和1.657。琼脂糖电泳表明,用改良的热硼酸盐法提取的RNA降解严重,用TRIZOL法提取的总RNA有部分降解,而CTAB法提取的总RNA完整、未降解,可用于后续实验。因此CTAB法更适于从水稻叶片中提取总RNA。  相似文献   

4.
一种水稻总RNA提取的简易方法   总被引:5,自引:0,他引:5  
应用高效Trizol试剂,对水稻根、叶、花材料进行了总RNA的提取.采用摸索后的优化程序,可在不用液氮的室温下,1 h完成总RNA的提取.电泳结果可见清晰的条带,表明RNA的完整性较好;紫外测定结果表明了RNA的纯度较高,所得检测结果说明所得总RNA产品可作进一步的实验之用.  相似文献   

5.
库尔勒香梨总RNA的快速提取方法   总被引:2,自引:1,他引:2  
以库尔勒香梨花、芽、茎尖、叶片和皮层为材料,对总RNA提取方法进行了改进,从而筛选出适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。采用该方法可以在3-4h内得到纯度高、含量高、完整性好的梨总RNA,并获得了逆转录活性较强的病毒RNA,同时使提取成本降低。此方法对苹果、葡萄、桃等果树总RNA的提取均适用。  相似文献   

6.
针对黑木相思富含多酚、多糖等次生代谢物质的特点,以其组培苗为试材,采用改良CTAB裂解法、硼砂-SDS裂解法、改良异硫氰酸胍裂解法、CTAB-异硫氰酸胍裂解法、改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法等5种不同的提取方法提取其总RNA.结果发现:改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法能有效地控制多酚、多糖、蛋白质以及DNA等对所提取总RNA的污染,所得总RNA质量高、完整性好.紫外分光光度检测,A260/A280比值为1.96~2.00,A260/A230比值1.98~2.20,总RNA得率为118.4~213.6μg.g-1,电泳检测,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,所提RNA质量可以满足dscDNA合成和cDNA-AFLP等后续分子操作要求.  相似文献   

7.
为提取高质量的山药总RNA,以铁棍山药茎段为材料,采用Trizol法、RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法、改良CTAB法和试剂盒法提取总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳分析所提取RNA的完整性,并用超微量分光光度计分析RNA的纯度.结果显示采用Trizol法难以提RNA,RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法提取效果不理想,存在DNA和蛋白质污染,而用改良CTAB法和试剂盒法提取到的总RNA纯度高、完整性好,其中,改良CTAB法较试剂盒法价格便宜,但提取过程较烦琐.因此,应根据实验需要选择CTAB法或试剂盒法提取铁棍山药总RNA.本结果对其他品种山药或富含多糖多酚类物质植物的RNA的提取也具有一定借鉴意义.  相似文献   

8.
香蕉不同组织中总RNA提取方法的研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
针对香蕉组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,以香蕉根、茎、叶、果实为试材,对其总RNA提取进行研究.比较了SDS法、改良SDS法、改良CTAB法和Trizol试剂盒法提取总RNA的效果,结果分析表明:改良SDS法能从香蕉根、茎、叶中获得质量高、完整性较好的总RNA,而改良CTAB法对果实的提取效果较佳,所得A260/A280均高于1.8,A260/A230大于2,0,28 S rRNA带的亮度约是18 S rRNA的2倍.其产率在根、茎、叶中均在400μg·g^-1以上,果实中可达49.34μg·g-^1.以上2种方法所得的总RNA均能满足RTPCR、Northern blot和cDNA文库建立等分子生物学研究,且具有快速、简便易行、成本较低的特点,适合于富含多糖、多酚的植物材料.  相似文献   

9.
铁观音茶树不同生育时期叶片为材料,采用Tripure试剂法、申能博彩试剂盒与Tripure试剂相结合的方法提取茶树叶片总RNA。结果表明,Tripure试剂法比结合法更适宜提取铁观音茶树RNA,该方法提取的RNA 28S、18S和5S rRNA条带清晰明亮;OD260/OD280值在1.7~2.0之间,说明该方法提取的RNA完整性和纯度好,可用于进行后续分子生物学实验。  相似文献   

10.
在Trizol法的基础上通过优化操作规程、改进操作步骤等手段提取纯化了兰州大尾羊脂肪组织总RNA,并利用紫外分光光度计和凝胶电泳对其浓度和质量检测进行分析.结果表明:该方法可快速高效地获得适用于RT-PCR、基因表达的高通量分析、cDNA文库的构建等研究的高质量的总RNA.  相似文献   

11.
作者借鉴高山红景天总RNA提取方法,成功提取了蓖麻的总RNA,并对出现的问题进行了分析.  相似文献   

12.
本文报道了利用异硫氰酸胍:酚:氯仿一步法成功分离纯化出高质量水稻叶片RNA并对其进行质量检测的结果,并且就该技术的方法、原理及操作中需注意的关键环节作了介绍。  相似文献   

13.
红曲霉RNA的提取方法   总被引:4,自引:1,他引:3  
汤祖辉  赖卫华  许杨 《江西科学》2002,20(2):118-120
采用异硫氰酸胍和β_巯基乙醇联合变性 ,酚 ,氯仿和异戊醇抽提的方法 ,对红曲霉总RNA进行提取。得到的RNA样品经过甲醛变性凝胶电泳和紫外分光光度法检测 ,证实为完整、均一的总RNA ,为构建红曲霉的cDNA(complemetaryDNA ,互补DNA)文库和筛选差异表达的基因奠定了基础。  相似文献   

14.
日本沼虾血淋巴RNA提取方法的改进   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍了一种提取日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)血淋巴RNA的改进方法.针对日本沼虾血淋巴中RNA含量较少,易被降解的问题,比较了常规的血淋巴RNA提取方法和改进后的RNA血淋巴提取方法,并进行了血淋巴酚氧化酶的扩增.结果表明,用改进的方法提取的RNA降解少,含量多,纯度高,可用于进一步分子生物学的操作,有着重要的实际意义.  相似文献   

15.
富含多糖番茄果实组织中总RNA的有效提取方法   总被引:8,自引:0,他引:8  
本文介绍了一种从富含多糖的番茄果实组织中提取总RNA的有效方法,其产率约为每200 m g组织80μg RNA,并且RNA的吸光值的比值A260/A230在1.5~2.0之间,A260/A280在1.6~1.9之间.提取的RNA能够用于RT-PCR反应.这种方法也能有效地应用于富含次级代谢产物的真菌总RNA提取.  相似文献   

16.
几种提取苔藓植物总RNA方法的比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
将3种RNA提取方法加以比较,以期获得提取不同生境毛尖紫萼藓(Grimmia pilifera P.Beauv)总RNA的最适方法.经比较,改进后的SDS法更适合于毛尖紫萼藓总RNA的提取.此方法简单快捷,所得RNA完整性好,纯度高,试验稳定性好,可用于RT-PCR、基因克隆等进一步分子生物学研究.  相似文献   

17.
一种适用于盐生植物的RNA提取方法   总被引:9,自引:1,他引:8  
介绍了一种红树RNA提取方法,此法无需特殊试剂和贵重仪器设备,可有效地排除红树细胞中大量存在的胶质和多糖类物质的干扰,所得RNA样品经紫外分光光度计检测和1%琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性,可满足多数分子生物学实验的需要,尤其适用于提取多糖含量较高的植物细胞的RNA.  相似文献   

18.
隔离放大器是一种重要的放大器,在通信、工业设备、医疗器械、电源及测试装置等仪器中使用广泛,它关系到系统是否能可靠运行.本文介绍由运算放大器LM358和普通光电耦合器TLP521组成光隔离放大器的设计方案,对直流或缓变信号该方案的线性度优于99.5%,与其它同类放大器比较,具有结构简单、成本低的优点.  相似文献   

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