白腐菌产漆酶的发酵条件研究

漆酶(E.C.1.10.3.2)是一类含铜的氧化还原酶,其可以催化对苯二酚(也叫氢醌)氧化生成对苯醌,也常被称为对苯二酚氧化酶。漆酶一般存在于真菌和植物中,由于具有较高的稳定性和较好的底物专一性,在印染和环境有机毒性化合物的降解、专用生物传感器的构建、以及造纸领域有机废弃物的生物加工利用等方面具有实际工业应用。考察了白腐菌的培养和产漆酶条件,对白腐菌产漆酶的培养条件和培养基进行了优选。结果显示,以小麦皮为碳源,硫酸铵和尿素为氮源,白腐菌生长产酶的适宜培养温度为28℃,pH值为3.5~6.0,培养基的C/N比以20合适。当培养基中添加一定的木质素沉淀物和葡萄糖时对白腐菌液体发酵产漆酶具有明显的促进作用,菌体发酵液中加入10 g/L的葡萄糖、6 g/L木质素时发酵产漆酶的活力达到最大值。     

白腐菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化

在静置和振荡两种培养条件下研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(1igninperoxidase,LiP)的影响。静置培养时,LiP在碳氮比(C/N)低的培养基中显示较高的酶活力,碳源以葡萄糖(0.02%)和糊精(0.18%)同时存在及分段加入要比单一葡萄糖作为碳源时获得更高的酶活;振荡培养时,在碳氮比高的培养基中LiP酶活最高,而类似于静置培养的氮源组合及分段模式却明显地抑制了LiP的合成。优化后,静置培养在第6天可获得7560U/L的酶活;振荡培养在第8天获得6500U/L的酶活。发酵液中LiP酶活力与菌体分泌的其同功酶的数量成一定的对应关系。     

不同缓冲培养体系下三株白腐菌的生物学特性

研究了 5种不同缓冲培养体系对云芝 (Coriolussp .)S、栓菌 (Trametessp .)CD和平菇 (Pleurotussp .)BP的生长及其调节系统 pH值和产漆酶能力的影响 .结果发现 :pH对这三株白腐菌的生长、改变体系pH能力、漆酶分泌均有显著影响 .这三株白腐菌最适合的生长条件均为中、酸性 ,一定的 pH范围内菌株S具有较强的降低 pH的能力 ,可使培养体系 pH持续降低 ,随后有所回升 ,菌株S不分泌漆酶 ;菌株CD持续抬升体系pH ,可使起始 pH为 3.0左右的培养体系 pH在第 10d升到 8.2 ,其最适合产漆酶的 pH为 3.0 ,第 6d漆酶酶活可达 9.0U/mL ;菌株BP基本不改变体系的 pH ,最适合分泌漆酶的pH为 5 .0 ,第 6d漆酶酶活可达 192 .0U /mL .     

白腐菌云芝腐朽杨木的超微结构研究

应用透射电镜对云芝（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ ＮＦＵ ００８）腐朽杨木的过程和试材的超微形态变化以及云芝降解木材的方式进行了研究和探讨。实验结果表明，Ｃ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ ＮＦＵ００８对木质素不仅具有很强的降解能力，而且选择性也较强，它在腐朽早期优先降解纤维胞间层的木质素，并能使纤维达到解离。结果还显示，菌丝在其周围产生的粘液在木材腐朽过程中起到了十分重要的作用，它们参与了细胞壁     

白腐真菌及其漆酶的应用研究

白腐真菌及其漆酶在工业和生活方面的应用研究受到广泛重视,因其强大的木质素降解酶系显现出广阔的应用潜力,可用于结杆降解、生物漂白以及污染物的治理等方面,漆酶是白腐真菌普遍产生的一种含铜多酚氧化酶,本文重点介绍了白腐真菌及其漆酶在工业和生活中的具体应用。     

13种白腐真菌产漆酶能力的初步比较研究

通过PDA-Bavendamm平板显色反应和变色圈试验方法,对13种白腐真菌产漆酶的能力进行了比较研究,实验结果表明,M5、M6、M7和M12菌株不产生漆酶;M1、M10、M8、M44个菌株产漆酶能力较强.     

亚热带木腐真菌产漆酶及其酶学性质

对选育的一株木腐真菌Psathyrella candolleana进行液体深层发酵生产漆酶,通过硫酸铵盐析和离子交换色谱等纯化技术分离发酵酶液后,得到纯度较高的漆酶,并对其酶学性质进行研究.结果表明:P.candolleana在发酵罐中的漆酶产量最高可达9 100 U/L;分离纯化后得到漆酶活性组分,其比活力达到438...     

白腐菌相容菌株的筛选及其混合培养产酶

在纤维素筛选培养基中加入了黄孢原毛平革菌稻草固态发酵的浸提液,并用这种培养基直接从自然环境中筛选了与黄孢原毛平革菌相容的菌株,在PDA和MEA平板上进行了进一步的相容性测试,选择出了生长稳定、可以与黄孢原毛平革菌较好共存的6株真菌.然后,对它们进行了固态发酵产酶的研究.对发酵体系中滤纸酶活(FPA)、木素过氧化物酶(L iP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Lac)活力的测定结果表明,这种筛选出来的菌株组合可以部分增强酶的活性,完善体系中胞外酶的组成,其中编号为F05的菌效果最好,它在混合培养时,体系中的FPA和Lac都得到了加强,比单独培养F05和P.C.时的酶活分别提高了55.5%,24.1%和217%,146%.     

产漆酶菌株的筛选及产酶条件的优化

以愈创木酚培养基为底物,利用平板筛选法从土壤朽木中筛选能够产漆酶的菌株,通过测定漆酶活力进行复筛,筛选出一株产漆酶活力较高的白腐茵菌株。以漆酶活性为参考指标,确定葵花粉发酵产漆酶条件：发酵培养基中硫酸铵0．025％,初始pH值5．5,接种量8％,装液量50mL,愈创木酚0．10％,培养时间7d。     

不同秸秆基质中白腐真菌漆酶分泌动力学研究

研究了侧耳属白腐真菌Pleurots sp．在木屑、玉米秆和稻草秆三种固体秸秆基质上分泌漆酶活性、漆酶动力学参数米氏常数Km和漆酶同工酶的动态变化．结果表明：该菌株在不同秸秆基质上分泌漆酶规律不一致;漆酶Km值随时间变化很大,相差高达一个数量级;通过PAGE活性电泳研究漆酶性质,表明体系中存在多种漆酶同工酶,不同时间不同秸秆基质上漆酶同工酶数量和性质存在很大差异,木屑固体秸秆基质上漆酶同工酶I的表达比另外两种固体秸秆基质更明显,同时还发现漆酶同工酶谱带和酶活性大小存在一定的关系,基本上漆酶活性越高,同工酶谱带I颜色就越深越长,而同工酶Ⅱ和Ⅲ只起辅助作用．     

白腐菌对焦化废水中吲哚的降解及其机理

选用白腐菌BP降解吲哚,研究了白腐菌在不同培养基中对两种浓度吲哚的降解过程和机理,以及吲哚的降解与白腐菌漆酶酶活、生物量、培养基pH值的关系.结果显示不同培养基中白腐菌可去除99%以上的吲哚;吲哚去除率与白腐菌漆酶活率具有较好的相关性,白腐菌漆酶活率达到最高时,可去除97%以上的吲哚;高浓度吲哚会抑制白腐菌的生长,同时也激发了白腐菌漆酶的产生,秸秆滤出液能促进白腐菌的生长和漆酶活力的增长;白腐菌BP最适pH值为6~7,pH值在5~8之间对吲哚都具有较强的降解能力;在HPLC谱图3~6 min之间出现的新物质可能有氧化吲哚和靛红.     

白腐工程菌生化降解TNT炸药废水的研究

利用白腐工程菌生化降解TNT废水,其效果显著,且克服了以往白腐菌在应用上的不便,填补了国内彻底处理TNT废水的空白.该方法具有处理效果好、周期短、安全可靠等特点.通过试验证明了该方法在技术上是可行的,有着良好的应用前景.     

白腐菌降解造纸黑液中木质素的研究

研究了白腐菌对造纸黑液中木质素的降解及影响因素.发现白腐菌的降解作用发生在次级代谢阶段,影响白腐菌降解木质素的因素有木质素浓度、pH值、搅拌速度、碳源和氮源、Fe2+浓度等.     

白腐真菌产木质素降解酶及固定化载体研究

从四种白腐真菌中优选出最适产酶菌株黄孢原毛平革菌（〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗）,并对其在不同载体的附着及产酶情况进行了相关研究.试验结果表明,白腐真菌〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗的锰过氧化物酶（MnP）及木质素过氧化物酶（LiP）活性最高分别可达225.67 U/L、110.35 U/L,较其它三种菌株要高;〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗对尼龙纤维、厨用金刚砂尼龙、纤维海绵、玉米芯及海绵有较好的附着能力,但以厨用金刚砂尼龙、纤维海绵和玉米芯为最佳,而以玉米芯为载体所产生的MnP和LiP活性为最高,分别可达244.94 U/L和263.71 U/L,较未加载体的酶活有所提高且持续时间较长.实验优选出白腐真菌〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗,且其以玉米芯为载体时所产MnP及LiP活性为最高.     

白腐菌对高pH值的耐受性及驯化提高

为提高白腐菌对黑液高碱性的适应性，研究了5株经驯化在pH值为7－8碱性条件下能够生长的白腐菌在高pH值（8－12）条件下的生长状况及耐受性能，并对菌株进一步驯化，结果显示不同白腐菌耐高碱性能力不同，终止pH值高的菌株，耐高碱性强。经过高pH值环境的驯化，可提高耐高碱性能力，如3^#菌株经过驯化，耐碱能力从pH9提高到pH12，其终止pH值、生物量也得到了提高，说明通过经过驯化后的白腐菌对高碱性的耐受能力增强。     

微生物对原油的乳化及促进白腐真菌原油降解研究

从胜利油田东辛采油厂含油废水中分离到3株能以原油为唯一碳源和能源并能乳化原油的菌株,采用油膜扩散法测其乳化能力,筛选原油乳化较好的菌株并预处理原油,再接种白腐真菌降解原油.结果表明筛选的3株细菌（分别命名为zsh7、zsh10、zsh11）发酵液使油膜空斑直径均大于19 cm.分别接种3株菌株和白腐真菌,在7天内可显著提高白腐真菌对原油的降解率,从71％分别提高到90％、93％、954％.经鉴定3株菌株分别为短芽孢杆菌属(Brevibacillus sp) 、芽孢杆菌属（Bacullus sp     

一株产耐高温漆酶真菌的筛选

从安徽省合肥市西郊的大蜀山上采集了40余株木腐真菌,将其在含有α-萘酚的麸皮汁平板上分离纯化后,根据菌落周围产生紫色氧化圈的显著程度筛选出4株漆酶活性较高的菌株,将这4株真菌进行摇瓶培养,测定并比较它们所产漆酶的活性,得到一株产酶活力最高的菌株SY04.菌株SY04在液体培养3d后粗酶液漆酶活力为330U/mL,在对其漆酶粗酶液进行活性分析后发现,该菌所产漆酶在60℃下保温30min后,活性不受明显影响,其最适反应温度为60℃.该菌所产漆酶具有较高的最适反应温度和热稳定性,具有一定的研究和应用价值.     

天然浸出液对自分离白腐真菌产木质素降解酶的影响

为提高木质素降解酶产量,使其应用于环境工程领域,在T ien&K irk培养基的基础上,添加玉米芯、柏树、桃树、玉兰和连翘等浸出液,在空气环境中,对白腐真菌F 2进行自由悬浮振荡培养。白腐真菌F 2能够大量产木质素过氧化物酶(L iP)和锰过氧化物酶(M nP)。添加天然浸出液后,L iP最高酶活为122.6 u/L,M nP最高酶活为135.4 u/L。在基础T ien&K irk培养基中培养则未检测出这两种酶的活性。在不同地区采集到的天然浸出液对两种酶的影响也不一样。结果表明,保持白腐真菌生长条件与天然生长条件相似,加入天然浸出液,可以促进产酶。     

造纸废液的白腐菌处理及特性研究

就具有较强木质素降解能力的白腐菌对造纸黑液的处理能力及特性进行初步研究。采用液体发酵对不同状况下的造纸废液进行处理，以白腐菌处理造纸废液过程中的生长状况，浊度，COD，可溶性糖等指标进行观察与测定，结果显示出不同种属的白腐菌对各种状态的造纸液处理程度不同，其中效果较好的2^#菌株在光解，非光解造纸废液上的COD去除率达到80％以上，处理后的水质清亮无色，说明木质纤维素分解菌－白腐菌具有处理造纸黑液的潜在能力。