广州地区1995—1997年HIV抗体检测情况分析

为了解献血员人群ＨＩＶ感染情况，我们对１９９５～１９９７年献血员ＨＩＶ抗体检测情况进行了分析。方法：献血员ＨＩＶ抗体的初筛试验采用抗－ＨＩＶ抗体ＥＬＩＳＡ法，ＨＩＶ抗体初筛试验阳性者用蛋白印迹法（ＷＢ）进行确认。结果：３年内共检测１４００２８人次，初筛ＨＩＶ抗体阳性１８例献血员，并全部经ＷＢ法确认为ＨＩＶ抗体阳性。其中１５例为男性，３例女性，均为来自外省的流动人口。１８例ＨＩＶ抗体阳性献血员中，ＨＣＶ抗体阳性检出率为８３３％（１５／１８），ＨＢｓＡｇ阳性检出率为６１１％（１１／１８），ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体阳性检出率为３３３％（６／８）。结论：在献血员人群中ＨＩＶ抗体阳性检出率呈上升趋势，为此献血员ＨＩＶ抗体筛查对预防和控制输血传播ＨＩＶ具有重要意义。ＨＩＶ与ＨＢＶ和ＨＣＶ具有较高的重叠感染率     

反式激活HIV-1 LTR的HHV-6基因片段B701的缺失研究

ＨＨＶ－６在体外可以激活ＨＩＶＬＴＲ引导的基因表达［１］，其基因组中一基因片段Ｂ７０１已被证明与这种激活作用有关［２］．Ｂ７０１编码１４３个氨基酸的蛋白质，可与ＨＨＶ－６基因组中其它基因片段协同作用提高对ＨＩＶＬＴＲ的激活效力．对Ｂ７０１进行缺失突变，得到突变体ＲＳＶ－Ｂ７０１－ｄ１（３′端缺失１８１个ｂｐ）、ＲＳＶ－Ｂ７０１－ｄ６（３′端缺失３５３个ｂｐ），将这两个缺失突变体分别与ＨＩＶ－Ｌｕｃ共转染受体细胞，通过ＬＵＣ活性分析发现，缺失突变体ｄ１、ｄ６不但仍具有激活能力，而且ｄ６的激活能力要远远大于ｄ１．二级结构预测初步揭示了Ｂ７０１对ＨＩＶ－ＬＴＲ的反式激活作用机制，为阐明ＨＨＶ－６基因产物与ＡＩＤＳ的病理关系提供了依据．     

鸡传染性支气管炎HA抗原的制备及HI试验方法的建立

用１０％Ａ型魏氏梭菌滤液处理１００倍浓缩ＩＢＶ Ｍ４１株病毒液,成功地制备了ＩＢＶ ＨＡ抗原,效价为１：６４￣１：１０２４。用该抗原建立了ＩＢＶ ＨＩ试验方法。抗原在４℃保存,５个月效价不变;加入０．１％的甲醛及１／万的硫柳汞使抗原效价下降１￣２个滴度。对ＳＰＦ鸡血清、Ｍ４１阳性血清、其它鸡病标准阳性血清以及疫苗免疫试验鸡只血清的ＩＢＶ ＨＩ抗体监测结果证明,该方法操作简便、快速、敏感性高、特异性     

HIV-1和HBV复合型DNA免疫的初步研究

近年的研究表明,在啮齿类和非人灵长类免疫带有编码病毒和细菌抗原基因的质粒ＤＮＡ可以激发体液和细胞免疫应答．在本实验中,将ＨＢＶ的Ｓ基因和ＨＩＶ－１的ｇｐ１６０基因以融合形式插入到载体ｐｃＤＮＡ３中,其能表达ＨＢｓＡｇ和ｇｐ１６０的融合蛋白,并将此质粒ＤＮＡ分别直接注射到Ｂａｌｂ／ｃ小鼠和Ｓｗｉｓ小鼠．三次免疫后,用ＥＬＩＳＡ的方法初步检测ＨＢｓＡｇ和ｇｐ１６０抗原特异的抗体免疫应答均为阳性．结果说明,带有ＨＢＶ和ＨＩＶ－１融合基因的质粒ＤＮＡ直接免疫小鼠后,均激发了小鼠产生相应的免疫应答反应,这个结果为研究和生产多价疫苗提供了新的思路     

牛泡沫病毒LTR的反式激活因子靶序列研究

牛泡沫病毒（ＢＦＶ）是反转录病毒科泡沫病毒属成员之一．其基因组除编码ｇａｇ,ｐｏｌ,ｅｎｖ三个结构基因外,在ｅｎｖ和３＇ＬＴＲ之间有２个ＯＲＦ（ＯＲＦ－１和ＯＲＦ－２）,编码自身的反式激活因子Ｔａｓ等调节蛋白．本研究利用我们实验室分离鉴定的ＢＦＶ３０２６中国毒株［１２］为材料,克隆Ｏｒｆ－１基因,构建ｐＢＦＶＯＲＦ－１表达质粒,通过带有ｌｕｃ基因的ＬＴＲ系列缺失质粒与ｐＢＦＶＯＲＦ－１共转染,瞬时表达分析结果将ＢＦＶＬＴＲ上Ｔａｓ应答元件（ＴＲＥ）定位于－９８３／－６６８（ＴＲＥＩ）,－４７０／－１４０（ＴＲＥＩ）和ＲＵ５区．其中ＴＲＥＩ、ＴＲＥＩＩ为正调控区域,ＲＵ５为负调控区域,并进一步证明ＲＵ５在异源启动子（ＢＩＶＬＴＲ）上具有抑制其下游基因表达的功能．这些结果表明ＢＦＶＴａｓ作用机理与慢病毒（Ｔａｔ）,致瘤病毒（Ｔａｘ）等均不相同     

BIV92044毒株体外培养体系的建立

将携带ＢＩＶ９２０４４毒株的牛外周血单核细胞分别与新生牛脾细胞、肾细胞和肺细胞建立共培养，经过传代和ＰＣＲ追踪检测及一些因子的处理，发现ＢＩＶ９２０４４毒株能够持续感染脾细胞，并且在脾细胞中对ＢＩＶ的表达调控因子和一些外源因子都能做出应答，从而为ＢＩＶ９２０４４毒株的分子生物学研究建立了一个较好的体外培养体系。     

La Sota毒株胰蛋白酶作用试验

在３７℃条件下,用０．１％和１％胰蛋白酶消化新城疫病毒（ＮＤＶ）ＬａＳｏｔａ毒株１２和２４ｈ后,接种１５日龄ＮＤＶ非免疫雏鸡,接种１５ｄ内雏鸡健活,采取血清测定血凝抑制（ＨＩ）抗体效价与对照组无显著差异;用０．１％和１％胰蛋白酶分别作用ＬａＳｏｔａ毒株２、４、１２和２４ｈ后,接种１０日龄ＮＤＶ非免疫鸡胚,鸡胚平均致死时间及尿囊液中病毒血凝（ＨＡ）效价与对照差异不显著;ＬａＳｏｔａ、Ｃｌｏｎｅ－３０     

应用PCR－RFLP法作脊灰炎病毒型内分析的研究

用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法对近年来从麻痹病人分离到的２６株脊灰炎病毒（ＰＶ）作了型内分析研究。１６株ＰＶ１的ＲＦＬＰ图式呈现多样性，毒株的图式可与Ｓａｂｉｎ１型疫苗株完全相同或不同，某些毒株亦可无电泳条带出现。７株ＰＶ２与３株ＰＶ３的ＲＦＬＰ图式则分别与疫苗株Ｓａｂｉｎ２型和３型完全相同。全面分析这些ＲＦＬＰ后，我们认为１６株ＰＶ１为野毒株，而７株ＰＶ２及３株ＰＶ３则可能是疫苗相似株。鉴于近年来广西的麻痹病例仍主要由ＰＶ１所致。故此，加强突击普服ＯＰＶ运动及作好分离毒株的型内分析已成为消灭脊灰炎的关键。     

鸡传染性法氏囊病地方流行毒株的分离与制苗种毒的筛选

从河北省昌黎县不同鸡场发生的法氏囊病鸡群中,分离到ＪＤ１,ＪＤ２,ＪＤ３,ＪＤ４,ＪＤ５共５株ＩＢＤ病毒毒株,通过初步分离与试验,并对其作了致病性、鸡胚适应性和免疫保护性等项试验。结果表明：所分离的５株均为ＩＢＤＶ,且可使易感鸡１００％发病,致死率在０～４０％。其中ＪＤ２和ＪＤ５可以在鸡胚中稳定增殖并使鸡胚规律性死亡。尽管通过鸡胚驯化,使分离的ＩＢ－ＤＶ毒力有所下降,但其灭活后免疫鸡,仍可使鸡对ＩＢＤ流行毒株的攻击达到８５％的保护率。ＪＤ２可作为ＩＢＤ囊组织抗原的种毒,也可作为ＩＢＤ鸡胚抗原的种毒。     

桂林市HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析

为了解桂林市HIV-1感染者中HIV-1流行毒株亚型的分子流行病学特征,采集桂林市HIV-1感染者的抗凝全血样品42份,分离PBMC并提取DNA,用巢氏PCR方法扩增病毒env基因,并进行序列测定和亚型分析。系统进化分析表明,桂林市HIV-1感染者样品分别属于4亚型:重组型CRF01-AE亚型4份、重组型CRF08-BC亚型15份、重组型CRF07-BC亚型8份和01C亚型3份。可见,桂林市HIV-1感染者中流行毒株主要为CRF-BC,应加强对HIV-1毒株亚型变异的监测,及时制定新的防治策略。     

云南省HIV感染的流行及防制

背景：云南省是中国ＨＩＶ感染流行疫情较严重省份,其流行开始主要是由于地理位置靠近毒品生产地金三角和缅甸所致,至今流行日趋严重。方法：（１）监测方法１９８９至１９９１年使用高危人群常规检测方法,１９９１年后主要以哨点监测为主,现患调查补充,确定不同地区...     

戊型肝炎病毒抗体的研究

戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）和戊型肝炎已被研究多年，许多作者从流行病学、血清学以及病毒基因方面，作了许多工作［１～３］，在诊断试剂方面，也有不少报告［４～６］．我们在研究中发现，ＨＥＶ抗体有不同亚型，现将初步结果报告如下．１材料和方法１．１材料ＨＥＶ抗原的...     

RT—PCR技术对BTV群,型特异性鉴定的研究

根据蓝舌病毒（ＢＴＶ）Ｌ２,Ｌ３核苷酸序列,设计,合成引物,建立ＢＴＶ群,型特异性ＲＴ－ＰＣＲ鉴定方法,对我国地方毒株进行群,型鉴定,结果表明;群特异ＲＴ－ＰＣＲ方法能覆盖目前我国已知或可能存在的ＢＴＶ血清型,与相关病毒无交叉反应,ＢＴＶ－１、ＢＴＶ－１６型型特异ＲＴ－ＰＣＲ方法对本型有专一性,用于检测临诊血样和组织样中ＢＴＶ的感染,结果证实该方法快速,敏感,特异。可作为临诊和进出口动物检疫中蓝舌     

PCR检测伪狂犬病病毒的研究

用ＰＣＲ的方法，扩增了伪狂犬病病毒ｇｐ５０基因的一段较为保守区。检测了不同ＰＲＶ毒株感染的ＢＨＫ细胞以及接种的家兔，并对ＰＣＲ检测的灵敏性作了初步研究。结果表明，ＰＣＲ法扩增ｇｐ５０基因具有较高特异怀和灵敏性，是检测ＰＲＶ的有效方法。     

反显性突变Tat蛋白抑制人免疫缺陷病毒1型的复制

Ｔａｔ（Ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）蛋白是人免疫缺陷病毒ＨＩＶ基因组编码的返式式激活因子。为了进一步研究Ｍ５Ｔａｔ和Ｍ６Ｔａｔ蛋白对ＨＩＶ病毒复制的抑制作用，将可被Ｔａｔ调控的启动子ＹＬ１５８替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体ＬＮＣＸ中的ＣＭＶ启动子，构建了表达上述反显性Ｔａｔ蛋白的逆转录病毒载体，随后导入双向性包装细胞ＰＡ３１７细胞中，用产生出的复制缺陷病毒感染ＭＴ４Ｔ淋巴细胞。用ＨＩＶ－１病     

温控表达载体的构建及HIV—1 p24的表达与纯化

通过改造原核表达载体ｐＢＶ２２０和ｐＥＴ２８，构建出了一种新的通用型温控原核表达载体ｐＶＶ５，记载体携带ＰｒＰｌ串联温控启动子以及Ｈｉｓ－Ｔａｇ的纯化标签、利于目的蛋白的表达与纯化。将ＨＩＶ－ ｌｇａｇ基因的１１４８－１８５７编码序列分别插入到ｐＶＶ５ｂ，ｐＥＴ２８ｂ的相应位点，构建了重组表达质粒ｐＥＧ１ｂ，ｐＢＧ７ｂ，二者在不同受体菌中，表达重组蛋白的量分别占全菌体蛋白总量的４２％和２８％。     

86例HIV阳性肺TB临床X线征象分析

总结ＨＩＶ并肺ＴＢ的临床及胸部Ｘ线表现特点。方法：分析了８６例ＨＩＶ阳性病人肺ＴＢ的临床及胸部Ｘ线表现，男４５例、女４１例，年龄１７～５８岁。结果：咳嗽、胸痛、发热、消瘦、皮疹等为常见症状，但无特异性。Ｘ线表现：病变多位于中下肺野，单侧浸润稍多于双侧，多为浸润型肺ＴＢ（７０例），可合并心包炎、气胸。肺空洞少见。结论：ＨＩＶ阳性合并肺ＴＢ，临床表现无特征性；Ｘ线表现：结核浸润可发生于任何肺段，多见于中下肺野，空洞形成较少，有别于单纯性肺ＴＢ。     

乌桕毒蛾核型多角体病毒江苏株的研究

本文报道了乌桕毒蛾ＮＰＶ江苏株（ＪＳＥｂＮＰＶ）的形态特征、组织病理、核酸性质和生物活性等方面的研究。该毒株的包含体为三角、四角或不规则形，大小平均１．８５μｍ，病毒粒子为杆状，大小平均为２９５×５４ｎｍ，属多粒包埋型（ＭＥＶ）。主要侵染寄生昆虫的脂肪体、气管基质细胞、血细胞和体壁真皮细胞。对乌桕毒蛾３龄幼虫的ＬＣ５０为９．７２×１０４ＰＩＢ·ｍＬ－１。     

黏着斑蛋白Supervillin的抗体制备及纯化

黏着斑蛋白Supervillin（SVIL）是一个细胞膜结合蛋白分子,定位于细胞与细胞外基质接触面的黏着斑。为了进一步研究 SVIL蛋白分子在细胞内的功能,应用分子克隆技术构建原核细胞表达质粒 ｐＧＥＸＫＧ ＳＶＩＬＣ３０２和ｐＨＩＳ８ ＳＶＩＬＣ３０２,并在细菌 ＢＬ ２１（ＤＥ３）中用 ＩＰＴＧ分别诱导表达 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２和 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２融合蛋白。用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,然后免疫新西兰大白兔制备 ＳＶＩＬ多克隆抗体,并用 Ｎｉ ＮＴＡ柱子结合 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,对其进行交联,纯化抗体。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ（ＷＢ）和 Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＩＦ）实验证明该抗体可以识别外源的 ＧＦＰ ＳＶＩＬ和内源的 ＳＶＩＬ蛋白,并且可以用于蛋白免疫沉淀实验。表明此ＳＶＩＬ多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度,为进一步研究黏着斑蛋白 ＳＶＩＬ在细胞内的功能奠定了坚实的基础。     

广义变差函数的一些性质

讨论了广义变差函数ＢＶ１，ＢＶ２，（１），ＢＶ的一些性质。