Acetobacter Z127乙醇脱氢酶的纯化及酶学性质

利用自行筛选、鉴定的Acetobacter Z127,纯化出高活性的乙醇脱氢酶,并对该酶的生化特性进行了初步研究.试验表明：粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、Sephadex G-100层析分离,纯化出一种以NAD^＋为辅酶的ADH,经SDS-PAGE电泳检测其分子量为28KDa;ADH反应的最适pH值为7.0,最适温度为60℃,K^＋离子对其酶活有促进作用,二价金属离子对其活性有抑制作用,Fe^3＋极易使ADH产生沉淀.研究为ADH的应用及其新用途的探索提供了理论基础和可靠的工艺参数.     

纸表微生物的简易模型与DNA提取方法评价

微生物是造成古籍善本和纸质档案损伤的主要原因之一,近年来不依赖于实验室培养的高通量测序成为研究纸表微生物的常用方法.但是纸表微生物的含量往往偏低,DNA提取常依赖于昂贵的进口试剂盒,成本过高.本文首先构建了一个标准的纸表微生物体系,用传统棉签擦拭法获取该纸表微生物样品,再利用改良的化学法、机械破壁法、酶消解法3种方式提取样品中微生物总DNA并比较其浓度与纯度,最后利用PCR扩增验证提取效果.结果表明,酶消解法提取所得浓度最高,化学法次之,机械法最低,但DNA纯度正好相反.经PCR验证,化学法的扩增效果较好.综合上述指标,改良的化学法更适宜提取纸表微生物样品中的总DNA.     

不同土壤微生物DNA提取方法比较

用4种土壤微生物DNA提取方法提取了3种类型土壤的微生物总DNA,利用分光光度法测定4种DNA的OD260、OD280,并计算和分析DNA提取物的产率和纯度.研究发现：方法4即改良的DNA提取方法,无论是提取DNA的产率,还是提取DNA的纯度,都较其他3种方法高,说明改良的DNA提取方法能够准确有效地提取3种类型土壤的...     

从冬青叶中提取冬青油的工艺探讨

对用溶剂浸泡冬青叶提取冬青油（水杨酸甲酯）的工艺进行了探讨，结果表明在常温常压下用水；乙醇体积比为2：1的溶液提取6h后再进行蒸馏，产率可达3.18%。     

从微生物中提取超氧化物歧化酶的研究

超氧化物歧化酶，简称ＳＯＤ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ），是一种应用价值大、广泛存在于生物体细胞内的金属酶．本实验以酿酒酵母和嗜热脂肪芽孢杆菌为出发菌株，进行抗Ｈ_２Ｏ_２性能的筛选，选出耐受性好的菌株经２Ｌ发酵罐发酵后，提取到了热稳定性好的Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ和Ｆｅ－ＳＯＤ，酶活力为３２９２和３５４７ｕ／ｍＬ，其比活力为３４５７和３０８４ｕ／ｍｇ．     

三种土壤微生物DNA提取方法的比较

设计、比较了3种直接提取土壤微生物DNA的方法。实验结果表明,3种方法都可以从土壤中提取到一定的微生物DNA片段,但是使用不同的方法对于DNA提取的产量存在着很大的差异;初提的土壤DNA经进一步提纯后均可用于PCR扩增。其中方法III提取的DNA产量最高,且效果明显,是一种从小量土壤样品中直接提取微生物DNA的理想方法,在土壤微生研究中具有重要的应用价值。     

微生物产天然红色素提取技术研究进展

综述了微生物产天然色素提取技术的研究进展,展望了微生物天然色素的开发和应用的未来发展方向.     

酵母胞内海灌糖微波破细胞提取与传统提取比较

酵母胞内海藻糖大都采用50％乙醇－水溶液回流提取得到。但酵母经微波破细胞处理后,以水为溶剂在室温下提取10min,就能把海藻糖充分深出,与传统浸取相比较,微波破细胞提取具有提取时间短、不需有机溶剂、不需加热、海藻糖收率高、杂质溶出少等优点。     

油页岩微生物总DNA的提取方法

为建立油页岩微生物总DNA提取方法,以两矿区的6个样品为材料,采用SDS高盐、SDS液氮研磨、SDS反复冻融、SDS异硫氰酸胍和试剂盒提取法分别对总DNA进行提取.结果表明,各方法提取效果差异很大,改进的SDS高盐提取法效果最好,各样品均得到约23kb较完整片段,且产率显著高于其他方法,达9144~38685ng·g-1干样;以未纯化的DNA为模板,对16SrDNA进行PCR-DGGE,得到了相应的扩增产物及DGGE指纹图谱,说明该法适合油页岩样品.SDS液氮研磨和SDS反复冻融提取法仅能得到部分样品总DNA,且产率和纯度较低,而SDS异硫氰酸胍和试剂盒提取法无DNA提出,不适合此类样品.     

微生物醋酸传感器的研制

从食醋发酵液中分离、筛选出同化醋酸能力强的微生物,将其固定化制备微生物膜再与氧电极结合,制成微生物醋酸传感器。实验研究表明:该传感器响应醋酸浓度线性范围约为2～30mg·L~(-1);响应时间为2～5min;25d内测定400余次,灵敏度基本不变;取食醋发酵车间空气样品进行回收率测定,结果为97.5％～105.0％。     

酵母醇脱氢酶的分离纯化

报道了酵母醇脱氢酶的分离纯化，使用硫酸铵分级沉淀，SephadexG—100凝胶层析技术，从啤酒酵母提取液中分离出醇脱氢酶，收得率为10．9％，纯化倍数达53．2。     

杂醇油提取异戊醇和异丁醇的研究

用杂醇油为原料,经脱水,脱色处理后,一次精馏分离出乙醇（９５ｗｔ％）和异戊醇（〉９９ｗｔ％）其余部分经二次脱水后精留提取异丁醇（〉９９ｗｔ％）异戊醇和异丁醇的收得率分别达到８５％和７１％以上。     

壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质研究

以壳聚糖作载体,戊二醛作交联剂,并以游离的乙醇脱氢酶作为对照,对壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质进行研究.结果表明,当戊二醛浓度为0.6%(v/v),交联时间为6 h时,壳聚糖固定化乙醇脱氢酶对温度、碱性环境以及金属离子Cu~(2+)溶液的耐受性均明显增强,且操作稳定性明显提高.     

反胶束固定化醇脱氢酶的制备

报道了用反胶束体系固定化醇脱氢酶(ADH)的研究.在此体系中,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为表面活性剂,辛烷和己醇作为溶剂及助溶剂.考察了ADH固定化的影响因素,确立了最佳固定化条件:含水量w0即cH2O/cCTAB为13,酶液pH值为7.8,CATB浓度为0.35 mol/L,己醇浓度为13%.     

用聚乙烯醇制备固定化增殖酒精酵母方法的研究

在聚乙烯溶液中加入阴离子交换树酯,混勾后流延成簿层后经紫外5个线照射和低温冰冻制成聚乙烯醇膜,该膜韧性强、透性大、耐腐蚀。用做酒精酵母固定化吸附裁体后,经镜检、批量发酵和连续发酵证实,酒精酵母在膜中能正常增殖且不易脱落。使用寿命达三十天以上,乙醇生成能力比游离细胞增加1.8倍。     

固定化酵母细胞连续发酵生产酒精的研究

在３００Ｌ容量塔式发酵器中进行固定化酵母细胞连续发酵酒精的小型中放实验，固定化酵母细胞可连续使用３个月以上，在温度３０℃左右，ｐＨ＝４～５及糖浓度１８％（Ｗ／Ｖ）（１１°Ｂｘ）时，每升固定化酵母可产酒精２５～３０ｇ．     

葛花对酒后血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响

为了探讨葛花对急性酒精中毒的防治作用,将雄性小鼠随机分为空白组、模型组、葛花提取物组。给药30min后,模型组与葛花组灌酒0.10mL/10g^-1,在灌酒后0.5,1,1.5,2,2.5,3h分别摘眼球取血和取肝组织。采用生化酶法测定小鼠酒后不同时间内血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶（ADH）活性。结果显示,小鼠血中乙醇浓度在酒后0.5-2h达到高峰,与模型组相比,葛花提取物组0.5-3h内的血中乙醇浓度数值降低。葛花提取物组对小鼠酒后0.5-1h肝中ADH的影响较为明显,使其活性增加;酒后1.5-3h肝中ADH活性虽然也增强,但与模型组比较无显著差异。结果显示,葛花提取物可降低酒后血中乙醇浓度,增强肝中ADH活性,其机制可能是通过抑制消化道对乙醇的吸收,从而起到有效的降醇解酒作用。     

异硫氰酸酯法固定化醇脱氢酶乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ

本文探索了一条较为简便、实用的制备异硫氰酸酯活性载体的新方法,研究了用异硫氰酸酯共价法固定化醇脱氨酶、乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ的条件,并对三者进行了共固定化。按本实验方法得到的固定化醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的活力回收可达8.9%和11.9%,得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的4倍。     

酵母菌中海藻糖的提取方法与糖代谢研究

采用多种方法（三氯乙酸提取法、冷乙醇提取法、热乙醇提取法和热蒸馏水提取法）从酵母菌中提取非还原性二糖海藻糖,产率分别为１３．３８％,９．６８％,９．７５％和９．５５％．并对酵母菌中海藻糖的代谢进行研究,发现随培养条件恶化,酵母菌体内海藻糖含量有不同程度的提高．提高培养基中Ｔｒｉｓ含量,则海藻糖含量趋于下降