大鼠十七种组织器官的蛋白图谱和它们的蛋白水解酶活性分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶的原位复性电泳方法分析了大鼠脑、心脏、肺、舌、胃、小肠、大肠、肝脏、胰脏、肾脏、睾丸、附睾、输精管、阴茎、卵巢、子宫、肌肉等组织器官的蛋白质图谱和蛋白水解酶活性。     

蛋白质组亲和分离研究(Ⅰ)蛋白质氨基生物素化反应条件的研究

运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,以马心肌红蛋白为代表研究蛋白质氨基生物素化的条件,包括蛋白质与生物素量的关系、反应物浓度、反应完全所需的时间以及蛋白质助溶剂对反应的影响等,为基于生物素—抗生物素蛋白质相互作用的亲和分离,简化复杂蛋白质组体系,实现蛋白质的分析鉴定奠定基础。     

两种冬凌草种子的生物学特性及蛋白质电泳的比较研究

为确定冬凌草优质种子,并揭示其种子发育成熟的内在机制,采用常规方法和SDS-PAGE蛋白电泳技术,对两种不同类型的冬凌草种子生物学特性及其蛋白质进行了研究.结果表明,两种类型的种子种皮颜色明显不同,主要分为褐色具花纹种子和褐色种子;且褐色花纹种子的千粒重、发芽率、活力等性能明显高于褐色种子;种子蛋白研究表明,褐色花纹种子较褐色种子蛋白表达量丰富,这可能是冬凌草种子发育过程中是由于营养物质积累或蛋白质表达的不同而导致其出现两种不同程度的发育类型,从而导致其生物学特性的差异。     

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法提纯蛋白质

对于含有多种成分且各蛋白质成分的分子量相差较小的菌体蛋白质的提纯,用一般的沉淀法、层析法均达不到理想效果.作者选用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法进行提纯,并尝试电泳后不经过染色,直接从凝胶中分离所需要的蛋白质成分.该实验对制胶、电脉、染色、脱色等各个环节进行了适当的改进,取得了较好的提纯效果.     

5种黄精属植物的蛋白指纹分析

本文用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ—ＰＡＧＥ）技术分析了５种黄精属植物根状茎和叶的蛋白指纹．结果表明：（１）它们的根状茎均含有３８．５、２８、１８．６ｋＤ蛋白质;（２）根状茎和叶的蛋白质种类有很大差异;（３）５种黄精属植物各含有自己特有的蛋白质,它们在本属植物物种鉴定中一定参考价值．     

玉米种子萌发期几种酶活性及其蛋白质谱带的变化

以玉米为材料,研究了玉米在萌发过程中,胚中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)、蛋白质谱带的变化,以及SOD和POD活性的变化.结果表明:SOD同工酶相对活性随萌发时间延长而降低,72 h以后下降趋势更明显;POD和AMY同工酶的相对活性都呈现升高的趋势;EST同工酶的相对活性变化不大.蛋白质谱带颜色的深浅也有变化,除少数谱带着色随萌发时间延长逐渐加深外,大多数谱带的着色都变浅.     

辣椒疫霉菌蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定

本文以辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)A~1和A~2两个交配型及寄生疫霉菌(P.micotianae Var.parasitica)A~1和A~2两个交配型为标准菌株,对从新疆石河子、塔城、吐鲁番、伊犁、哈密和昌吉六个不同地区辣椒病株上分离的疫霉菌株(分别编号为Ph—2、Ph—11、Ph—14、、Ph—15、Ph—16、Ph—17)的蛋白质,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行了分析和比较。结果证明,这6个菌株的蛋白质电泳图谱与辣椒疫霉菌标准菌株一致,它们都有相同的5条重带和基本相同的3～4条弱带,而与寄生疫霉菌完全不同。说明该法可做为疫霉菌鉴定的重要辅助手段之一,实验中同一菌种不同交配型间的蛋白质电泳图谱完全相同,但6个菌株中Ph—2、Ph—14和Ph—16的弱带与标准菌株间稍有差异,是属于菌株间的差异还是其它原因有待进一步研究。     

不同基因型小麦籽粒生育期蛋白质的动态变化

本文运用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳技术，比较分析了３个小麦品种籽粒生育过程中叶片和籽粒各种蛋白质的动态变化，结果表明，（１）小麦籽粒生育过程中叶片和籽粒中蛋白质的种类和数量有较大变化；（２）叶片和籽粒蛋白质动态变化存在负相关性；（３）叶片中５２和４７ｋＤａ蛋白质起初最多，后期很少，籽粒中６３和５８ｋＤａ蛋白质前期很少，后期最多，变化幅度较大；（４）叶片蛋白质含量最后阶段骤然下降，籽粒蛋白质含量显著上升，这些变化对不同品种有一定差异．     

家蚕卵蛋白的 SDS-PAGE 分析(动物科学)

本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响。分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6%～12%、6%～15%两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果。结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9 mol.L-1尿素、4%CHAPS、1%DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取;6%～12%梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜。利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础。     

Tris-HCl法提取蝶类干标本蛋白质的研究

用Tris-HCl法对蝶类干标本头部、胸部和腹部进行蛋白质的提取,提出了适合蝴蝶干标本蛋白质的提取方法,并成功地应用于SDS-PAGE分析.表明用该方法提取蝴蝶干标本蛋白质可行.     

一种优化的双向凝胶电泳方法

双向凝胶电泳技术是蛋白质组学研究的基础性技术平台 ,如何得到一张高质量的双向凝胶电泳图谱是进一步深化研究的关键 .该文利用人永生化食管上皮细胞系SHEE为材料 ,采用IPG DALT系统双向凝胶电泳技术 ,通过对样品的制备及预处理、第一向等电聚焦、平衡和两向间的转移等关键步骤进行改进和优化 ,获得了高分辨率、高重复性的双向凝胶电泳图谱     

用蛋白质组学技术分析家兔MODS血清蛋白质组的方法初探

应用蛋白质组学技术比较家兔肠源性多器官功能障碍综合征(MODS)模型复制前后的血清蛋白质组表达差异,探索该技术在家兔肠源性MODS研究中应用的可能性.取家兔肠源性MODS模型复制前后血清各50 μL,去除高丰度蛋白后用丙酮将洗脱液中的蛋白沉淀,加入水化液使沉淀中的蛋白充分裂解,离心后取上清液上样.双向电泳后银染,用PDQuest7.4软件进行胶图分析,比较两组血清双向电泳图谱中的差异蛋白点.家兔肠源性MODS前后血清双向电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好,可以满足进一步研究的需要.其中11个点在复制MODS后表达上调,8个点下调.复制家兔肠源性MODS前后血清双向电泳图谱存在显著差异;初步建立的家兔血清蛋白质双向凝胶电泳技术,将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础.     

Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice （Oryza sativa L. ） by Two-Dimensional Electrophoresis

For searching out male sterility-related proteins (polypeptides) in rice (Oryza sativa L.), we examined the difference of panicle protein (polypeptides) between hybrid rice (Wujin2A/R168, Wujin5A/R988) and their parents (male-sterile line Wujin2A, Wujin5A, and restorer line R168, R988) at the formation stage of pollen mother cell by two-dimensional electrophoresis (2-DE). The results revealed that the 2-DE polypeptide maps were similar among these experimental materials. A small group of polypeptides were disappeared in 2-DE polypeptide maps of male-sterile line (Wujin2A, Wujin5A) by comparing to restorer line (R168, R988) and the first filial (F₁) generation (Wujin2A/R168, Wujin5A/R988). The isoelectric points of these polypeptides were pI 5.8–6.5 molecular, weight 42.7×10³−66.2×10³. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China (30340079) and the Science and Technology Key Research Foundation of the Education Ministry of China (03109) Biography: HU Yao-jun (1960-), male Ph. D candidate, research direction: molecular cytogenetics.     

Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice (Oryza sativa L.) by Two-Dimensional Electrophoresis

0Introduction Malesterilityisacomplicatedphenomenoninhigherplants,whichestablishesthebiologicalbasisofhetero sisutilizationincropsbreeding,especiallyinrice(Oryzasati vaL.).Themolecularandphysiologicalresearchinplantmalesterility,especiallythediscoveryofth…     

根类中药材的电泳分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),对根类中药丹参、黄芪、桔梗、远志、板蓝根、前胡、欧当归、花土当归、防风、北沙参进行了蛋白电泳分析。实验结果表明,不同种药材的蛋白谱带明显不同,鉴别效果良好,为根类中药的鉴定和质量控制提出了一个分辩率高、专属性强的鉴别方法。     

动物角膜蛋白质组分种属差异的初步研究

本文用ＳＤＳ线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析和比较了鱼类、两栖类，乌类及哺乳类共８种动物的角膜中蛋白质组分及数目的异同。结果表明：这些动物角膜中所含蛋白质组分约为：鱼１７种，蟾蜍２８种，鸡３４种，小鼠３２种，家兔３５种，羊３４种，牛３６种，猪３５种。若根据两种动物角膜中不同的蛋白质组分数与两种动物角膜中蛋白质组分总数之比为蛋白质组分差异距离的定义。则牛和羊的蛋白质组分差异距离最近，小鼠和家兔的次     

原生动物四膜虫(TetrahymenaS1)高迁移率非组蛋白的研究

利用原生动物四膜虫(Tetrahymena shanghaiensis S1)作材料,经高氯酸抽提,丙酮沉淀等方法,制备取得高迁移率的非组蛋白。在高分辨率的乙酸一脲电泳图谱上,具有小牛胸腺所具有的典型的全部蛋白带。此外还含有一些未经检测的蛋白带。作者认为这些多余蛋白带可能是四膜虫所特有的高迁移率的非组蛋白。     

Cr3+对玉米萌发的影响

玉米为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测了玉米种子萌发过程中和不同浓度的Cr3 胁迫48h后恢复过程中淀粉酶的变化,实验结果表明玉米萌发过程中淀粉酶同工酶发生系列变化;铬盐对玉米幼根的生长抑制作用明显;当铬盐浓度为0.1mol/L时,对玉米的抑制表现为不可逆,直至种子萎蔫死亡;铬盐对淀粉酶的活性影响不是很显著,但刺激了Rf为0.242淀粉酶的提前表达。     

原生动物四膜虫(TetrahymenaS1)高迁移率非组蛋白的研究

利用原生动物四膜虫(TetrahymenashanghaiensisS1)作材料,经高氯酸抽提,丙酮沉淀等方法,制备取得高迁移率的非组蛋白。在高分辨率的乙酸一脲电泳图谱上,具有小牛胸腺所具有的典型的全部蛋白带。此外还含有一些未经检测的蛋白带。作者认为这些多余蛋白带可能是四膜虫所特有的高迁移率的非组蛋白。