延胡索内生真菌的分离鉴定及产功能酶菌株的初步筛选

采用纯培养分离方式获得纯化延胡索内生真菌菌株,通过形态学特征、ITS r DNA序列分析对分离菌株进行鉴定,利用6种培养基筛选出代谢产功能酶菌株。分离获得312株内生真菌,可归类于9个属,其中镰刀菌属是优势类群。对已测序的30株内生真菌产酶活性研究表明20株试验菌株产纤溶酶,18株产复合酶,16株产碱性蛋白酶,10株产接触酶,1株产纤维素酶;其中4株内生真菌可代谢产生4种不同功能酶,为代谢产多酶系菌株。延胡索内生真菌的分离鉴定及产功能酶菌株的筛选不仅丰富了内生真菌资源,而且也为获得新颖结构化合物提供理论基础。     

地衣芽孢相菌高α—乙酰乳酸脱羧酶活力菌株的筛选

以从土壤中分离出的9株地衣芽孢杆菌为源菌株，通过α-乙酰乳酸脱羧酶活力实验发现BL-4的产酶活性最好，通过UV和NTG对BL-4进行复合诱变，获得了一株产酶活性比出发菌株BL-4高1.22倍的α- 乙酰乳酸脱羧酶高产菌株，并研究了该菌株的最佳发酵产酶条件是培养温度30℃，发酵时间36h，发酵液起始pH6.5。     

氨基酰化酶产生菌GR1—11菌株的选育和产酶条件的研究

采用物理因子诱变剂处理出发菌株米曲霉3．951(Aspergillus 3.951)，获得氨基酰化酶（EC3．5．1．4）高产菌株GR1－11，这株经紫外线和γ射线诱变获得的变异株的产酶能力较出发菌株提高了91％，在最佳培养条件下，每克曲含氨基酰化酶达122．4单位，40％至60％饱和度硫酸铵沉淀所得粗酶比活力达210U／mg。     

灰绿曲霉高产纤维素酶突变株的选育

以一株具有较高纤维素酶活性的野生菌株-灰绿曲霉XC9为出发菌株，经过紫外线、氯化锂、甲基磺酸乙酯（EMS）等物理化学诱变剂多重诱变处理，获得了抗葡萄糖阻遏的突变株E2-26、E5-65、U6-31和EU7-22，其CMC酶活与出发菌株相比分别提高至1．7、1．4、1．3、2．0倍．突变株经PDA斜面接种传代5次后产酶性能仍然保持稳定．变株的菌丝、孢子颜色也发生了较大的改变．对突变株EU7-22的形态结构进行了观察，并与出发菌株XC9作了发酵性状的比较，发现其产酶性能有了明显提高．     

优良碱性果胶酶产生菌选育

通过对现有碱性果胶酶产生菌的筛选和诱变，获得了一株碱性果胶酶高产菌株Ｅｒｗｉｎｉａｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ２０１，该菌株与出发菌相比，产酶期提前，１２ｈ的产酶量为出发菌株的４倍。试验表明，该菌株能使红麻快速脱胶，是一株很有希望用于生物制浆的优良菌株。     

病原芽胞杆菌几丁质酶产生菌的筛选与活性鉴定

通过特异引物PCR方法和水解圈活性法对62株苏云金芽胞杆菌菌株、26株蜡状芽胞杆菌菌株及18株球形芽胞杆菌菌株进行了几丁质酶产生菌的筛选.所测苏云金芽胞杆菌中除4株野生型菌株外均为阳性结果,蜡状芽胞杆菌仅1株为阴性结果,球形芽胞杆菌全为阴性结果,且水解圈法观察结果与PCR检测结果一致.在此基础上,通过DNS比色法对几丁质酶产生菌株的几丁质酶比活力也进行了测定.对这些具有致病性的病原芽胞杆菌几丁质酶的研究对于研究其致病机理及对其进行遗传改良具有重要的理论和实际应用价值.     

植酸酶高活性菌株的选育及酶性质的初步研究

以本实验室筛选的一株米曲霉为出发菌株，通过紫外线诱变，并经过初筛、复利筛等步骤得到一株植酸酶高产菌株，酶活约提高１５６％，最高酶活达２４０Ｕ／ｍｌ粗酶液，７２ｈ左右达产酶高峰期。     

茅台酒曲中产淀粉酶细菌分离及性质

从茅台酒曲中分离出产α淀粉酶优良菌株,经鉴定为芽孢杆菌属。在这些菌株中,所产α-淀粉酶以中温型为主,最适宜温度在50~60℃之间,也分离到一株最适宜温度为80℃高温型酶的菌株。同时研究了发酵培养基中碳氮源比对一株芽孢杆菌酶活力的影响及酶活力与培养时间的关系,结果表明,当碳氮比为9∶4 5时酶活力较高,酶活力在生长周期稳定期后期到死亡期达到最高。     

一株产纤维素酶的暹罗芽孢杆菌筛选及产酶条件优化

以一株来自海鱼肠道的暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)为出发菌株,进行紫外线诱变,诱变后通过平板初筛和摇瓶复筛,获得了五株纤维素酶高产菌株,其中菌株UV-30酶活最高,为0.082 1 U/g,较出发菌株(酶活为0.052 4 U/g)提高了56.68%.通过采用单因素和正交试验对该菌株产酶条件进行优化,结果表明最优发酵条件为:羧甲基纤维素钠1.25%,蛋白胨6%,产酶温度30℃,起始pH值8.0,装液量30%,接种量2.5%.以此条件发酵,酶活可达到0.168 6 U/g,为出发菌株的3.22倍,酶活显著提高,为该酶的进一步分离纯化及性质研究奠定了基础.     

罗汉果内生菌及其周边土壤中产α-淀粉酶菌株的筛选

对罗汉果内生菌及其种植区土壤中的微生物进行分离,筛选淀粉酶产生菌,并研究其发酵条件,结果得到15株内生菌和8株微生物,从中筛选到2株产淀粉酶高的菌株2-1(土壤)和R-4(根部内生菌)。经初步鉴定,菌株2-1为球菌,菌株R-4为芽孢杆菌,均为革兰氏阳性菌。研究显示,菌株2-1产酶条件为1.0%氯化铵、0.5%酵母粉、1.0%可溶性淀粉、0.4%氯化钠,发酵温度为40℃,发酵3d,其产酶量为127.65U/mL;R-4菌株产酶条件为0.5%酵母粉、1.0%氯化铵、0.05%氯化钠、2.0%可溶性淀粉,发酵温度为40℃,发酵3d,其产酶量为197.21U/mL。     

产果胶酶菌株的筛选鉴定及其产酶条件的研究

为筛选果胶高效降解菌株,结合HC比值(透明圈H与菌落直径C的比值)和果胶酶活力测定,从桔子园土壤和腐烂的水果等处筛选得到1株产果胶酶活力较强的菌株M3,结合菌株形态特征观察和ITS rDNA基因序列分析,确定该菌株为聚多曲霉(Aspergillus sydowii).经发酵产酶试验可知,该菌株的最适发酵产酶条件为培养温度30℃,初始pH4.5,接种量(体积分数)7%,培养时间4 d.在该条件下发酵,果胶酶活力可达42.01 U.mL-1.     

果胶酶高产菌株EIM-6的筛选鉴定及其液体发酵产酶条件优化

通过筛选得到一株适合液体深层发酵培养的高产果胶酶菌株EIM-6,基于形态学与ITS序列分子系统进化分析,鉴定为Aspergillus niger.运用单因子实验确定EIM-6产果胶酶最适碳源和氮源.在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素.然后通过最陡爬坡实验在上升最高点处由中心组合实验和响应面分析确定其最适产酶条件.实验优化的最优产酶条件为:w(橘皮粉)4.09%,w(麸皮)3.16%,w((NH4)2SO4)0.35%,w(K2HPO4)0.3%,w(CaCO3)0.24%,初始pH 6,接种量107/mL,转速250 r/min,28 ℃培养80 h酶活达30 231 U/mL,与初始相比,酶活提高2.07倍.     

亚麻脱胶菌的分离、筛选和鉴定

 从云南亚麻沤麻水、种植土、沤麻残渣堆积土中粗筛获得具有果胶酶活性的菌株51株;通过几种酶活性测定,获得果胶酶和木聚糖酶(主要的半纤维素酶)活性较高、无纤维素酶活力且脱胶周期短的目的菌株4株.基于4个菌株的果胶分解能力、沤麻周期长短以及沤麻的效果等指标,最终确认YN1.1是优良的亚麻脱胶菌株.经16S rRNA基因测序和生理生化鉴定,该株菌为芽胞杆菌属的地衣芽孢杆菌.     

大麻脱胶高酶活菌株的诱变选育

原始菌株Bacillus sp.No.46经紫外诱变后,挑取76株进行摇瓶初,复筛,复得10株诱变株,果胶酶酶活高于原菌株20％－30％,聚半乳糖醛酸酸酶活提高35％－70%,连续液大麻脱胶试验残胶率低于10％,脱胶后大麻纤维特数可达19－11,脱胶后酶活酶活损失约20％,脱胶酶液至少可用2次以上。     

不同果胶酶对蓝莓出酒率的研究

为提高蓝莓出酒率,以出酒率为指标,用进口果胶酶和国产果胶酶对蓝莓进行酶解处理,通过单因素和正交试验,探索其酶解处理的最优组合。结果表明:2种酶都能大幅提高蓝莓的出酒率,进口果胶酶最佳酶解条件为酶解温度为30℃、加酶量为0.04‰、酶解时间24 h。国产果胶酶最佳酶解条件为酶解温度为25℃、加酶量为0.04‰、酶解时间12 h。但进口果胶酶比国产果胶酶其出汁率均增加10%以上,因此,进口果胶酶更适合应用于提高蓝莓出酒率。     

Performance of a Pectinase from Bacillus Subtilis WSHB04 - 02 Used in Bioscouring of Cotton Fabrics

A pectinase produced by Bacillus subtilis WSHB04-02 isolated from soil with lyase activity operating at alkaline pH was studied. The MichaelisMenten kinetic parameters of this newly isolated pectinase on different substrates, such as citrus pectin and polygalacturonic acid （PGA）, were determined, and pectin proved to be the most suitable substrate. The effects of temperature and pH on pectinase activity and stability were also investigated. The optimal temperature for pectinase was 55℃ with a stable range of 45℃- 55℃. In general, pectinase was pH insensitive and the stable pH ranged from 8.6 to 10.0. Ultimately the bioscouring effects of cotton fabrics using this pectinase were evaluated and some promising results were obtained.     

Characterization of Bacterial Strains Isolated from a Novel Seawater-based Retting Treatment of Hemp

Cultivable bacteria were isolated from seawater-based retting treatment of hemp, in which three of purified strains （SW- 1, SW- 2, and S-SW1） produced relatively high levels of pectinase activities, and also produced mannanases and xylanases. PCR-based entebacterial repetitive intergenic consensus primers （ERIC-PCR） were employed for fingerprinting DNA of the bacterial strains. The ERIC-PCR fingerprints of stains SW- 1, SW- 2, and S-SW1 were found to be different, and should be further identified for each isolate. Strains SW- 1 and SW- 2 were identified as Stenotrophomnas maltophilia, while strain S-SW1 was assigned to Ochrobactrum anthropi by BIOLOG system. These two species represented rhizosphere bacterial genera, and possibly were introduced by the hemp plants. These organisms seemed potentially capable of producing pectinase and hemicellulase, and thus effectively degrading the gum substances in the seawater retting. This research could be helpful for improving a novel seawater-based retting treatment of hemp.     

壳聚糖固定化果胶酶的制备及其酶学性质研究

以1％壳聚糖与5％戊二醛交联8h制得交联壳聚糖载体,1g载体固定10mg的果胶酶,载体先与酶液缓慢振荡混合30min后,在固定化体系（pH3．4,4℃）中固定反应12h,该条件下制得的固定化酶强度大韧性好。酶活力回收率高达56．31％;固定化酶的最适温度50℃,最适pH3．4,Km^app值为5．42mg·mL^-1,连续使用7次后,酶活力还保留70．45％以上,具有较好的操作稳定性。     

澄清型石榴山楂复合果汁饮料加工工艺的研究

本文对澄清型石榴山楂复合果汁饮料的加工工艺进行了研究。单因素试验结果表明,利用石榴汁与山楂汁质量比为 4：1的混合果汁作为石榴山楂复合果汁饮料加工原料,可以使复合果汁感官品质最好。以透光率为指标,比较硅藻土、果胶酶和壳聚糖三种澄清方式对复合果汁的澄清效果,结果表明,果胶酶澄清方式效果最好,壳聚糖次之,硅藻土最差,且果胶酶澄清后的复合果汁稳定性最好,壳聚糖和硅藻土澄清后的复合果汁稳定性较差。通过正交试验优化复合果汁澄清工艺,结果表明,添加质量分数为008%的果胶酶,酶解温度为45 ℃,酶解时间为15 ~ 20 h,复合果汁澄清效果最好。     

果胶酶产生菌HDYM-02发酵条件的研究

由巴彦县亚麻有限公司沤麻池中分离选育得到一株果胶酶产生菌,命名为HDYM-02,通过对其进行生理生化、16srDNA序列分析及系统发育研究,初步鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌。对菌株HDYM-02进行发酵条件的单因子试验,结果表明,当发酵温度为33℃,发酵氮源选用尿素,发酵液初始pH值为7.0,NaCl浓度为0.5%～0.7%时,菌株HDYM-02分解果胶能力较强;对发酵产还原糖影响较大的三个因素,即发酵温度、尿素含量、发酵液初始pH值进行L9(33)的正交试验,结果表明发酵温度为35℃,尿素浓度为0.5%,发酵初始pH值为6.5时,菌株HDYM-02分解果胶能力较强。