牡丹籽粕多酚和黄酮提取工艺优化及其抗氧化和降糖活性研究

采用响应面法优化同时提取牡丹籽粕多酚和黄酮并检测其抗氧化和降糖活性，最优工艺为乙醇质量分数90%，提取温度85℃，提取时间50 min，料液比1∶40，在此条件下得到的多酚和黄酮提取量分别为（17.59±0.82）mg/g、（0.74±0.09）mg/g，并采用D101大孔树脂对牡丹籽粕提取液进行纯化得到牡丹籽粕多酚和黄酮成分，该成分对DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力的IC50值分别为（313.67±42.67）μg/mL、（243.67±22.12）μg/mL，对铁离子还原能力为（438.78±3.36）μmol TE/g，对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC50值为（31.11±2.44）μg/mL，稍优于阿卡波糖IC50值（34.42±1.58）μg/mL.牡丹籽粕多酚和黄酮富集成分具有较好的抗氧化和降血糖活性.     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性.采用正交实验方法, 以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16(45)正 交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGCS0-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对 肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bel-2表达的影响.结果表明:当料液比为1:4、pH为8.5、加酶 量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1:4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温 度为40℃、酶解时间为2h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bc1-2的表达.紫贻贝酶解多肽具有 抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的.     

罗非鱼鱼鳞胶原多肽的优化制备及其生物活性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合水解,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化酶解工艺,制备鱼鳞胶原多肽.测定胶原多肽的抗氧化活性、细菌低温保护活性、氨基酸组成及相对分子质量分布.结果显示,最适酶解条件为:底物质量浓度30.6 mg·m L-1、胰蛋白酶和碱性蛋白的加酶量分别为1.44和0.70 mg·m L-1、酶解温度50℃、pH值8.5、酶解时间6.35 h.酶解胶原多肽对DPPH自由基和羟基自由基的半数清除质量浓度(IC50)分别为2.89和3.54 mg·m L-1.经过细菌低温保护试验,当胶原多肽质量浓度为1 mg·m L-1时,嗜热链球菌的存活率达到75.6%.鱼鳞胶原肽相对分子质量分布显示,78%多肽片段的相对分子质量分布于180~2 000 u之间.氨基酸组成分析显示鱼鳞多肽富含甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸及天冬氨酸等,这些特定的氨基酸与胶原多肽的抗氧化活性、细菌低温保护活性相关.     

芒果和番石榴的果皮、果肉多酚含量测定及抗氧化性比较分析

采用福林酚试剂法测定70%乙醇溶液的芒果和番石榴提取物中的多酚含量,以相当没食子酸的含量(GAE,mg/g)表示;并以DPPH、ABTS清除自由基法和FRAP还原法评价其抗氧化性能,找出抗氧化性能与多酚含量的相关性.实验结果显示,提取物多酚含量大小顺序为芒果皮(40.00 GAE mg/g)番石榴皮(33.67 GAE mg/g)番石榴肉(15.35 GAE mg/g)芒果肉(5.98 GAE mg/g);DPPH法和ABTS法测定的Trolox当量抗氧化能力(TEAC)及抗坏血酸当量抗氧化能力(AEAC)结果一致,清除自由基能力大小顺序为芒果皮番石榴皮番石榴肉芒果肉,DPPH法和ABTS法测定的IC_(50)值大小顺序均为芒果皮番石榴皮番石榴肉芒果肉;FRAP还原法测定还原Fe~(3+)-TPTZ的能力大小顺序为芒果皮番石榴皮番石榴肉芒果肉.3种方法所测得抗氧化能力的结果一致,果皮的抗氧化能力高于果肉,且抗氧化能力与多酚含量正相关.     

苦荞芽多酚提取工艺优化及抗氧化活性研究

采用单因素实验结合正交试验优化苦荞芽多酚的提取工艺条件,并采用ABTS和DPPH自由基清除率法测定了苦荞芽多酚提取物的抗氧化活性.研究结果表明,苦荞芽多酚的最佳提取工艺参数为,甲醇体积分数60%、提取时间80 min、提取温度60℃、料液比1∶40 g/m L.在此条件下,苦荞芽多酚的提取量高达83.51 mg/g.抗氧化活性试验表明,苦荞芽多酚提取物具有较好的抗氧化能力,其对ABTS自由基和DPPH自由基清除的半抑制浓度(IC_(50))分别为93.36μg/m L和185.76μg/m L.     

酶解制备贻贝抗氧化肽与功能性鱼糕的研制

开发具有抗氧化活性的功能性鱼糜制品。采用酶解法并筛选中性蛋白酶为最适蛋白酶制备贻贝抗氧化肽。利用正交设计优化酶解工艺条件,确定酶解温度45℃、酶解时间1h、酶添加量1500U/g、料液比(g/mL)1∶5为较优酶解工艺条件,在此条件下酶解产物多肽得率达到(73.62±0.86)mg/g。添加质量分数大于2%的经冷冻干燥的贻贝酶解产物到鱼糕中,检测其在鱼糕中对猪油的抗氧化作用,经方差分析得知其有显著的抗氧化作用。以此说明鱼糕是具有抗氧化性的功能性食品。     

瓜蒌皮饮料功效成分与抗氧化活性研究

文章研制了一种瓜蒌皮饮料(TPB),分析其功效成分,并研究在储藏期间抗氧化活性的变化。结果表明:TPB的膳食纤维、维生素C、总酚及总黄酮的质量浓度分别为4.58g/L、43.27μg/mL、96.90μg GAE/mL和21.00mg/L,共含有14种氨基酸,其中丙氨酸、苏氨酸、精氨酸及天冬氨酸的浓度较高;在60d储藏期间,其抗氧化活性逐渐降低,储藏期结束后其DPPH·清除率、ABTS·清除率及亚铁还原能力分别降至28.40%、35.21%、1.07mmol AAE/mL,高于金银花醇饮料的抗氧化能力。由此可见,瓜蒌皮饮料储藏60d后仍具有较高的抗氧化活性,说明瓜蒌皮饮料是一种功效成分丰富的饮料,具有较强的抗氧化功能。     

藏红花花瓣粗多糖的体外抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取藏红花花瓣中的多糖,得率为3.75%.联合蒽酮-硫酸法和DNS法测得多糖纯度为68.34%.对粗多糖的体外抗氧化活性进行测定,结果表明,粗多糖具有一定的抗氧化活性,抗氧化能力指数(ORAC)值为0.572μmol TE/mg;其对ABTS+、DPPH和羟自由基具有一定的清除能力,半数清除浓度EC50分别为76.26μg/mL、165.5μg/mL和880.4μg/mL.     

乳清蛋白肽的酶法制备、分离纯化及活性评价

以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性蛋白酶、最适底物含量为4.0%、最适加酶量为8000U/g、最佳酶解时间为4h;酶解液经DEAE-52纤维素层析后得到的A组分抗氧化活性最好,其还原力为0.320 0±0.004 1,DPPH自由基清除率为6.58%±0.36%;A组分再经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析柱分离纯化后得到组分G,其DPPH自由基清除率为6.73%±0.083%;组分G的主要成分为分子质量378 u的肽段,其一级氨基酸组成为赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)及丝氨酸(Ser).     

灰星鲨鱼皮抗氧化多肽的制备及其性能分析

灰星鲨(Mustelus griseus)鱼皮中含有丰富的胶原蛋白,以灰星鲨鱼皮为原料,抗氧化能力为筛选指标,研究了木瓜蛋白酶水解鲨鱼皮的最佳工艺条件.结果表明制备鲨鱼皮抗氧化多肽的最佳水解条件为:温度55℃、pH 4.0、加酶量4%(质量分数)、酶解时间2h.对获得的鲨鱼皮抗氧化多肽进行理化性质分析,结果显示:其紫外最大吸收峰在230和280nm处,符合多肽的特征;其具有良好的吸湿性和保湿性,在湿度为43%的条件下,吸湿率和保湿率分别为(50.76±0.71)%和(85.41±1.33)%;多肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基的半抑制质量浓度(IC_(50))分别为0.55和0.28mg/mL.利用体外蘑菇酪氨酸酶模型初步探究多肽对酶活力的抑制作用,测得其IC_(50)为0.4mg/mL;对其生物活性进行分析发现该多肽对小鼠黑色素瘤细胞B16F10的黑色素形成也具有明显的抑制作用.上述结果可为今后鲨鱼皮多肽在化妆品中的应用提供理论和实践参考.     

鲭鱼罐头蒸煮液蛋白酶解产物的生物活性分析

以鲭鱼罐头蒸煮液为原料,采用生物酶解方法制备活性肽,以实现鱼罐头加工废弃液的高值化利用.研究结果表明,采用复合酶(碱性蛋白酶和胰蛋白酶)分段酶解,得到相对分子质量MW1 ku的组分占50%,高于碱性蛋白酶(30%)和胰蛋白酶(28%)单酶水解效果.进一步采用超滤方法分离酶解产物,得到不同相对分子质量范围的3个组分,其中MW1 ku的P1组分的抗氧化活性和ACE抑制效果最好.     

裙带菜多糖的结构及抗氧化、免疫调节活性

采用水提醇沉法制备裙带菜多糖(UPP),提取率为11.00%±0.25%,UPP由葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、鼠李糖组成,分子质量为691.05 ku.体外抗氧化实验测得UPP的氧自由基吸收(ORAC)能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力分别为164.54±4.85μmol/g(以Trolox为标准品计)、64.93±4.76和46.80±6.06μmol/g(后两者均以Trolox为阳性对照).选用RAW264.7细胞对UPP的体外免疫调节活性进行研究,发现UPP在50～1 500 mg/L质量浓度范围内对该细胞无明显毒性,且可显著增强该细胞的吞噬能力,当UPP质量浓度为600 mg/L时,相对细胞吞噬能力达113.22%±2.75%.当UPP质量浓度为600 mg/L时,促RAW264.7细胞释放NO量达12.60±1.01μmol/L;UPP在100～800 mg/L的质量浓度范围内可显著上调诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达量.以上研究结果表明,裙带菜多糖具有良好的体外抗氧化能力和免疫调节活性,可应用于保健食品的工业生产中.     

地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

通过体外试验，探讨了DHTW抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶的抑制活性，为地黄降糖功能因子的开发利用提供理论依据.采用紫外分光光度法(UV)测定DHTW清除DPPH、ABTS等自由基的能力，利用酶标仪测定DHTW抑制α-葡萄糖苷酶的活性.结果表明：(1)DHTW均具有抗氧化活性，质量浓度在0～6 mg/mL内，随着浓度的增加，抗氧化活性也不断增加，当溶液达到一定浓度后，抗氧化性趋于稳定.(2)DHTW的DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别为：醇洗脱物DHY(0.087 mg/mL)、粗提物DHC(2.987 mg/mL)、水洗脱物DHS(3.024 mg/mL)，故自由基清除能力表现为：DHY>DHC>DHS.(3)DHTW的ABTS自由基清除能力IC₅₀值分别为：DHY(0.137 mg/mL)、DHC(1.463 mg/mL)、DHS(2.168 mg/mL),ABTS自由基清除率表现为：DHY>DHC>DHS.(4)DHTW对α-葡萄糖苷酶均有明显的抑制作用，其中，DHY有较明显的抑制能力，α-葡萄糖苷酶抑制活性明显优...     

天然抗冻多肽的制备、 分离及细菌低温保护活性研究

利用热水抽提法提取鲨鱼皮明胶,控制酶法水解条件制备天然抗冻多肽.以细菌低温保护活性为指标,筛选蛋白水解酶种类及酶解时间,利用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段进行分离,得到细菌低温保护高活性组分.结果表明,酶解鲨鱼皮明胶得到高活性抗冻多肽的最适蛋白水解酶为酸性蛋白酶,酶解温度50℃、pH 3.0、酶/底物3 000 U·g-1、底物浓度3%、酶解时间1 h;经过Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段得到阳离子的P2组分,经过细菌低温保护测试,当浓度为500μg·mL-1时,大肠杆菌的存活率达到80.8%.分离得到的抗冻多肽具有较高的抗冻活性,可望应用于食品、医药等产业中.     

菲律宾蛤仔木瓜蛋白酶水解物抗氧化活性研究

以菲律宾蛤仔蛋白为原料,用木瓜蛋白酶对其进行水解,采用正交实验方法研究酶解温度、酶解时间,加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除率和还原力评价水解物的抗氧化性。结果表明：水解度与抗氧化性之间没有正反相关系,当温度为45℃,时间为6 h,加酶量为1 500μg/g,pH为7.0时,水解度最大;温度为45℃,时间为2 h,加酶量为2 000μg/g,pH为7.0时,水解物的抗氧化活性最强;水解物对羟自由、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均有很好的清除作用,并呈现浓度依赖性。因此,菲律宾蛤仔蛋白的木瓜蛋白酶水解物具有很好的抗氧化性。     

超滤分离纯化麦胚蛋白酶解物的研究

采用超滤法从麦胚蛋白酶解物中初步分离纯化抗氧化活性肽,考察了操作压力、操作温度及料液浓度等工艺参数对超滤过程中膜通量的影响,并对超滤前后麦胚蛋白酶解物的相对分子质量分布、氨基酸组成及抗氧化活性进行了比较.结果表明:采用截留相对分子质量3000的聚砜膜对麦胚蛋白酶解物进行超滤分离的最适工艺条件为操作压力0.30 MPa、操作温度20 ℃、麦胚蛋白酶解物浓度35 g/L;超滤有效地除去了料液中相对分子质量较大的组分,麦胚蛋白酶解物中相对分子质量1 000～500及500～130的组分分别为23.81%、48.63%,其抗氧化活性得到提高,清除O2-·的IC50由超滤前的1.64 mg·mL-1降至超滤后的1.29 mg·mL-1.图5,表3,参13.     

血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶法制备

以扇贝裙边的酶解产物——蛋白多肽对ACE活性的抑制率作为控制水解程度的指标,确定制备ACE活性抑制肽的最佳酶种及酶解工艺技术条件.通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶5种酶酶解扇贝裙边得到的蛋白多肽对ACE抑制能力的比较发现,5种酶在不同酶解时间所得到的酶解蛋白多肽都具有一定的ACE抑制能力,其中胃蛋白酶酶解蛋白多肽的ACE抑制率最高,为91.33%;再经L9(3)4正交实验对胃蛋白酶酶解工艺条件进行优化,确定酶解反应最佳条件是酶量400 U.g-底1物,pH 2.5,温度32℃,底物浓度(原料∶水)1∶2,酶解时间3 h;试验结果还表明,单酶(胃蛋白酶)的酶解蛋白多肽比复合酶(复合风味酶)和双酶(胃蛋白酶 木瓜蛋白酶)的酶解蛋白多肽对ACE活性的抑制能力都强.     

酵母酶解物对HUVEC细胞氧化损伤的保护机制

为探讨酵母酶解物(YH)对H2 O2引起的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护机制,研究了YH的抗氧化活性.结果显示:YH对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除的半数效应浓度(EC50)为1.85 mg/mL,具有良好的抗氧化活性;高剂量(500μg/mL)的YH可以极显著地减轻H2 O2对HUVEC...     

超滤对苜蓿蛋白酶解物抗氧化性的影响

采用超滤法从苜蓿可溶性蛋白酶解物中初步分离纯化抗氧化活性肽.考察操作压力、操作温度及料液质量浓度对超滤过程中膜通量的影响,并对超滤前后苜蓿可溶性蛋白酶解物的相对分子质量分布、氨基酸组成及抗氧化活性进行比较.结果表明:采用截留相对分子质量3 000的聚砜膜对苜蓿可溶性蛋白酶解物进行超滤分离的最适工艺条件为操作压力0.35 Mpa、操作温度25 ℃、苜蓿可溶性蛋白酶解物质量浓度35 g/L;超滤有效地除去了料液中相对分子质量较大的组分,相对分子质量 1 000～500,500～130及130以下的组分分别从21.85%,21.64%和4.91%提高到27.91%,30.83%和7.61%,其抗氧化活性也得到提高.     

文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。