家蚕和柞蚕卵壳的微区元素分析

昆虫卵巢发育过程中,卵母细胞在卵黄沉积完了之后,即由滤泡上皮细胞分泌沉积一厚层卵黄膜,就在此时,卵母细胞吸水,而显著膨胀起来,卵母细胞随即开始进入卵壳的形成阶段,在大约两天的时间里,由滤泡细胞程序性地分泌出卵壳蛋白,依次沉积于卵母细胞外面,凝聚固化而成卵壳,卵壳上有受精孔,是精子进入卵内的孔道;在卵壳上还分布有气孔,是卵及     

昆虫卵壳的晶态特征和卵壳蛋白纤维走向的研究

昆虫的卵母细胞在完成卵黄沉积之后,接着由滤泡细胞分泌和沉积一层卵黄膜,随后滤泡开始行使分泌卵壳蛋白的功能。在滤泡细胞连续分泌的时相中,程序性地合成和分泌卵壳蛋白,依次沉积于卵母细胞外面,凝聚硬化而成卵壳。当卵壳沉积完成时,卵母细胞就被完整的卵壳包被起来,卵壳的表面则由滤泡细胞的顶膜压印成特定的依种类而各异的花纹结构特征。     

蓖麻蚕卵壳的微区元素含量和脑激素的作用

一、引言 昆虫的卵母细胞在卵黄沉积完了之后,接着由滤泡细胞分泌卵黄膜前体物质包围卵母细胞,形成一层卵黄膜,随后滤泡细胞合成和分泌出卵壳蛋白,依次沉积于卵母细胞外,凝聚固化而成卵壳,昆虫卵壳多呈片层状结构,不同种类的昆虫卵壳结构特征、生化性质和物理性质     

卵泡生长、分化和闭锁的调控

研究卵泡生长启动和分化对于了解雌性生殖机制至关重要. 哺乳动物卵细胞在胚胎发育过程中已经形成, 并且在生殖嵴每个卵原细胞都与若干原始卵泡细胞组合分化成一个原始卵泡. 出生后原始卵泡数不再增加. 原始卵泡生长启动的分子机制至今还不清楚. 相关研究的最新进展表明: (ⅰ) 原始卵泡的生长启动可能主要受卵泡内外产生的生长因子、激活素和孤儿受体等调节, 而可能不受FSH调节; (ⅱ) 在颗粒细胞上一旦分化出现FSH受体, FSH即与雌激素以及激活素/抑制素、卵泡抑素一起成为决定卵泡分化倾向的主要因素; (ⅲ) 卵泡闭锁可起始于颗粒细胞或卵母细胞凋亡两种形式, 卵母细胞中组织型纤溶酶激活因子(tPA)蛋白活性的提前表达将引发卵母细胞凋亡.     

蓖麻蚕卵壳的偏光显微镜研究

昆虫的卵壳,是滤泡细胞所分泌的卵壳蛋白,依次沉积于卵母细胞外面,凝聚固化而成的。当卵壳沉积完成时,卵母细胞就被完整的卵壳包被起来,卵壳的表面则由滤泡细胞的内表面压印成特定的依种类而各异的花纹结构特征,在卵面上形成受精孔区和在卵面其他部分形成气孔分布特征。近年来对一些昆虫种类的卵壳表面结构进行了光镜和扫描电镜观察,但     

MAPK参与调节猪卵母细胞和受精卵细胞周期的转变

从猪卵巢中获取卵母细胞，在体外成熟，体外受精和电激活后的不同时间采集样品，经裂解变性后利用蛋白电泳和蛋白免疫印迹技术，检测其中MAPK磷酸化变化，并且用免疫荧光化学法观察ERK2的迁移，结果显示，猪卵母细胞中MAPK的量基本不变，体外培养前GV期猪卵内MAPK无磷酸化，培养20h和MAPK开始发生磷酸化，30h时进一步增加，36h时有所下降，40h时达到最高，一直到60h仍未降低，在卵母细胞成熟过程中，ERK2由胞外向胞内迁移，并分布于核区，猪卵母细胞电激活后18，20hMAPK磷酸化降低，几乎被灭活，但22h时开始上升，体外受精12h后MAPK完全去磷酸化，16h时重新磷酸化，以上结果表明，MAPK磷酸化/去磷酸化在猪卵母细胞MⅠ向MⅡ转化，受精后原核的形成及第一次有丝分裂的启动等方面可能发挥重要的调节作用。     

文昌鱼卵巢的神经支配:超微结构和免疫组织化学研究

用透射电子显微镜技术首次发现文昌鱼卵巢有无髓鞘神经纤维分布,它位于卵巢被膜下方,紧靠被膜神经纤维终末内有两种类型的突触小泡,一种是致密核心小泡,另一种为清亮小泡,另外,还可见神经终末与滤泡细胞相接触。免疫组织化学方法进一步证明,这种无髓鞘神经纤维很有可能是去甲肾上腺素能神经纤维,并定位在卵巢被膜和滤泡细胞上。     

人类体细胞克隆胚的构建

人类体细胞克隆胚的构建是治疗性克隆的基础和前提. 将供体细胞核注射到成熟卵母细胞, 然后用钙离子载体(A23187)和6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活卵母细胞. 在卵母细胞活化并出现原核样核(2PN)后, 去掉雌原核而保留供体细胞核, 避免了去核时对卵母细胞进行DNA荧光染色和紫外线照射, 同时也避免了去除过多的细胞质. 经体外培养后, 有少量核移植胚发育到囊胚阶段.     

游离的小鼠胚胎卵巢细胞体外重组形成卵泡

胚胎期生殖细胞和体细胞相互作用形成卵泡是一个复杂的生理过程,生殖细胞定向分化成卵母细胞后,必须以卵泡的形式存在才有可能完成最终的生长发育。因此,研究生殖细胞和体外细胞体外重组形成卵泡的可能性具有重要的理论和实践意义。利用微滴培养法将胶原酶消化分离的12－16d胎龄的小鼠卵巢细胞分别培养,发现不同胎龄的卵巢细胞均能相互黏连形成多细胞聚集体：12－13d胎龄小鼠卵巢细胞体外不能形成卵泡：14－15d胎龄小鼠卵巢细胞体外经过4d培养后形成少量卵泡样复合体。16d胎龄小鼠卵巢细胞培养2d后形成大量具有典型卵泡特征的小卵泡。实验结果直接证实一定胎龄的小鼠卵巢生殖细胞和体细胞能够在体外重新构建形成卵泡;胎鼠卵巢生殖细胞获得诱导体细胞分化形成卵泡的能力是一个渐进过程。该研究为卵泡体外重组并重新构建卵巢进行卵巢移植提供了直接的实验依据。     

半固态镁合金流变凝固方式及凝固组织

利用光学显微镜、扫描电子显微镜及能谱仪观察分析了压缩形变AZ91D合金半固态等温处理后的流变凝固组织及凝固方式. 结果表明, 半固态合金凝固过程中, 当原始固相晶粒较多时, 初晶α相的生长以依附生长方式为主; 当浆料中液相相对较多时, 初晶α相以树枝晶方式生长; 半固态共晶转变时, 既存在离异生长方式, 也存在共生生长方式, 主要取决于初晶α的生长方式; 纯共晶成分液相凝固时主要以共生生长的层片状方式进行; 晶内小液池凝固时, α相以依附生长方式生长, 共晶转变以离异共晶加少量棒状方式生长.     

多氯联苯对鸡胚性腺发育的影响

研究了多氯联苯（PCB）对鸡胚胎期性腺发育和生殖细胞分化的影响。在入孵前将PCB（Aroclor 1254,剂量为0－100μg/枚）注入海兰种蛋卵黄内，取出雏鸡的性腺并进行组织学研究。结果表明：雄性雏鸡的睾丸结构发生了明显改变，与对照组相比，其横截面积、精细管直径和精细管的相对面积均显著减少。在100μg/x枚组，大部分精细管解体甚至消失，精细胞的分化受到了不同程度的抑制、几乎所有生殖细胞都发生了核固缩和胞质空泡化。相反，处理PCB后雌性雏鸡的左侧卵巢横截面积、皮质厚度和皮质内的卵母细胞数均比对照组明显增加。只有个别的卵母细胞发生了核固缩和胞质空泡化。研究表明PCB干扰鸡胚性腺的发育，并揭示了PCB对性腺发育和配子分化影响的性别差异，即PCB抑制精原细胞的分化却促进卵原细胞的分化。     

颗粒细胞的增殖分化及其在卵泡发育中的作用

颗粒细胞(GC)是卵巢中十分重要的细胞. 从原始卵泡生长启动、增殖、分化、闭锁/排卵到黄体形成, GC在形态、功能等方面都发生各种变化. 卵母细胞(OC)指导了GC的增殖、分化; 同时GC也影响OC的成熟. 有众多因子参与这个调节过程, 牵涉到复杂的分子作用机制和信号转导通路, 如p38 MAPK通路可选择性调控FSH对GC的甾体生成; 而转录因子LRH-1和DAX-1在该过程中可能发挥重要作用; FSH通过促进PCNA和StAR表达及甾体生成, 诱导GC的增殖和分化; 而ERK1/2通路的激活也可能参与FSH对GC增殖分化的诱导作用. 因此, GC是一个用以研究细胞增殖、分化和细胞相互作用及其信号转导通路和分子机制的十分理想的细胞模型. 本文评述了近几年国内外研究的最新进展.     

AcMNPV诱导sf9细胞在核内产生纤维网状基质

来源于昆虫卵巢的ｓｆ９体外传代细胞,在核内虽存在核纤层却没有哺乳动物细胞核内部那样的核基质网络。当其被ＮＰＶ感染后核内产生纤维网络结构。快速冷冻－深度蚀刻电镜图象显示这种网络由８－１０ｎｍ的均一纤维交而成。     

小鼠成熟卵子培育成功

可能不久我们就能从实验室无限地培育出完全健康、能够受精的人的卵子。当然，我们是否这样做，那是完全不同的问题。女人的卵巢，与其说是生的摇篮，毋宁说是死的坟墓。甚至还在娘胎里时，女胎卵巢里毁灭就已开始。人的一个女胎，约有700万叫做卵母细胞的前卵。在女胎快出世前，存活的前卵就不超过200万了，其余的，都被神秘的细胞自杀过程所吞噬。女婴出生，过程继续。到了青春期，存活的卵母细胞最多只剩25万。终女人一生，长成熟、能受精的卵子，约400枚，其余卵母细胞，则陆续死去，到绝经时，实际上已荡然无存了。“成熟的卵细胞”，…     

AcMNPV诱导sf9细胞在核内产生纤维网状基质

来源于昆虫卵巢的sf9体外传代细胞 ,在核内虽存在核纤层却没有哺乳动物细胞核内那样的核基质网络 .当其被NPV感染后核内产生纤维网络结构 .快速冷冻 深度蚀刻电镜图象显示这种网络由 8～ 10nm的均一纤维交织而成 .有一些电子致密的物质与未装配好的病毒衣壳存在于网络结构中或周围 ,说明核内产生的纤维网络结构可能与NPV的复制与装配有关     

Kit基因错义突变导致KitW-2Bao小鼠生殖腺的异常发育

Kit^W-2Bao是本实验室培育的B6背景、呈单基因显性遗传的突变系小鼠, 杂合子腹部、肢端及尾端白化, 纯合子全身白化、黑眼、不育. 突变纯合子小鼠生殖腺变小、结构异常、缺乏生殖细胞, 杂合子雄鼠部分精曲小管内无生精细胞. 通过连锁分析将突变基因定位于第5号染色距着丝粒42.8 cM处, 确定Kit为候选基因. RT-PCR扩增Kit全长的mRNA, 经测序发现其ORF的第1228位碱基由G转换成T, 这一变化导致第410位的氨基酸由V变成F, 预测会引起局部二级结构发生显著变化; 随后将杂合子突变小鼠互交, 在基因型鉴定的基础上, 通过碱性磷酸酶染色等方法追踪生殖细胞异常发育过程, 发现在胚胎11.5 d, 突变纯合子小鼠的原始生殖细胞未出现在尿生殖嵴区, 突变杂合子小鼠的原始生殖细胞显著减少; 在胚胎15.5 d, 纯合子小鼠睾丸内精曲小管结构分化不清, 无精原细胞, 卵巢内无原始卵泡; 杂合子小鼠精原细胞及原始卵泡数量显著减少. W^-2Bao为KIT胞外区第4个Ig结构域内唯一的等位突变, 是研究其功能及生殖系统发育机制的新材料.     

低氧培养早期胚胎克隆小型猪(Sus Scrofa)

猪的体细胞克隆在人类的异种器官移植方面有着巨大的应用前景. 以中国实验用小型猪胎儿成纤维细胞为核供体, 从屠宰场采集初情期前母猪的卵巢, 卵母细胞体外成熟后去核构建克隆胚胎, 重构卵电融合并激活, 在7% O₂, 5% CO₂及88% N₂的气相条件下NCSU-23或PZM-3培养基培养. 给3头代孕母猪移植230枚克隆胚胎, 其中一头妊娠足月并产下3头仔猪, 生产克隆猪的效率达到1.3%; 其中一头健康状况良好, 存活至今, 毛色及DNA微卫星遗传分析证实为克隆个体. 以上结果表明, 利用初情期前母猪的卵母细胞, 克隆胚胎培养在低氧条件下, 是生产克隆猪的一条有效途径.     

基质金属蛋白酶系统与卵巢功能调节

哺乳动物的大多数器官在形成后,极少出现周期性的组织重建.然而,雌性动物的生殖系统,包括子宫内膜、乳腺、卵巢卵泡和黄体等在生殖周期或生命过程中的不同阶段经历着生长、成熟和萎缩等周期性变化.这些动态组织的变更要求细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的不断重建.ECM成分包含蛋白和非蛋白分子,它们形成具有组织特异性的细胞黏附结构.其中基质蛋白与其细胞受体的相互     

猪卵泡内促卵丘扩展因子的来源

猪卵丘的扩展不依赖于卵母细胞，因此推测，猪卵母细胞可能不是卵泡内促卵丘扩展因子（cumulus expansion enabling factor,CEEF)的惟一来源，实验应用小鼠摘除卵母细胞的卵丘－卵母细胞复合体（oocytectomized complex,OOX)检验猪透明带，不同质量生发泡期卵母细胞以及卵泡内的其他细胞成分产生CEEF的情况，结果证明：（1）猪和小鼠控透明带都不能产生CEEF。（2）猪不同质量（A，B，C三类）未成熟卵母细胞均能分泌CEEF，其分泌CEEF的能力和CEEF活性没有明显差异（P＞0．05），（3）猪3－6mm卵泡的OOX和小于1mm卵泡的颗粒细胞都有较高的CEEF分泌能力，且此能力不依赖于激素作用。但3－6mm卵泡的壁颗粒细胞不能分泌CEEF，（4）3－6mm卵泡的卵泡液中含有CEEF，但其活性与培养时所用的卵泡液浓度有关，浓度过高CEEF活性反而下降，（5）进行培养时必须添加促性激激素小鼠OOX才发生扩展，说明由猪卵母细胞和卵泡成分产生的CEEF的促卵丘扩展作用依赖于促性腺激素。     

人卵巢未成熟卵母细胞体外成熟及受精的研究

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET,简称IVF)技术已经建立.但是,目前IVF技术主要适用于能够进行超排卵的病人,对于绝经期过早或卵巢发育不全及生殖障碍的妇女、经过放疗或化疗后的年轻妇女、对超排卵治疗长期无反应者、X-连锁遗传病及常染色体显性遗传病都需要卵子的捐献.成熟卵子的捐献来源还十分困难.学者们设想如果能把人未成熟卵母细胞在体外培养至成熟状态从而建立卵子库,将具