Exendin-4高活性短肽模拟物的筛选及生物活性

以细胞表面胰高血糖素样肽(GLP-1)受体为靶标,利用噬菌体筛选技术,通过Exendin-4竞争性洗脱筛选GLP-1受体激动剂,得到了12肽模拟物EPA.细胞增殖实验结果表明:EPA和Exendin-4均可促进胰岛β细胞增殖活性,在40～200μmol/L内,EPA比Exendin-4的活性高5%～25%;在100mmol/L高浓度葡萄糖毒性下,EPA通过抑制bax基因和上调bcl-2基因表达及抑制Caspase-3活性来抑制胰岛β细胞的凋亡;EPA是具有高活性的Exendin-4短肽模拟物,可通过bcl-2/bax…Caspase-3信号通路抑制线粒体的凋亡.     

一类高活性SOD模拟物的研究

采用脉冲辐解法分别测得Ｃｕ（Ｔｈｒ）２,（苏氨酸铜）的不同体系在不同温度下催化Ｏ２（超氧阴离子自由基）歧化反应的速率常数,算出活化能,并与天然ＳＯＤ进行了比较,结果发现在相同条件下,Ｃ１２ＴｈｒＣｕ（ＩＩ）（十一酰苏氨酸铜）的活性几乎与天然ＳＯＤ相当。     

尿激酶短肽抑制剂的初步研究

以尿激酶为目标蛋白, 在噬菌体表面展示六肽库中对尿激酶的短肽类抑制剂进行了三轮特异性筛选. 提高噬菌体与尿激酶的比例及缩短作用时间从而提高筛选压力后, 与尿激酶亲和结合的噬菌体得到富集. 通过对第三轮筛选到的重组噬菌体的DNA序列分析, 获得一组相对保守的肽序列. 相应的合成短肽 NEPKAN 和VSPKVL 对尿激酶的抑制常数分别为32.5 μmol/L和88.6 μmol/L.     

分电距矢量（MEDV）用于肽模拟物的定量构效关系研究

利用电距矢量（MEDV）表征肽模拟物的分子结构,并与包含N、O、S杂原子,饮和与不饱和键或共轭体系的二肽分子的生物活性相关,利用多元线性回归方法,构建了两组二肽分子的定量构效关系（QSAR）模型,对于58个二肽组,模型相关系数和均方根误差分别为R=0.8423和RMS=0.535,对于48个二肽组,R=0.8199,RMS=0.357。为了检验QSAR模型的预测能力,对两个二肽组数据集进行了交叉校验（CV）。采用LOO法即每次从n个样本中抽出n-1个样本建立QSAR模型继而用该模型去预测余下的1个样本的生物活性的方法,对于58肽组,58次预测的生物活性与原实验活性之间的R=0.7906,RMS=0.608,而48肽组的R=0.7422和RMS=0.417,MEDV只利用了分子二维拓扑图中元素电负性和相对化学键长的有关信息,不需要任何三维结构知识或分子校准步骤或有关物理化学性质的信息。此外构建QSAR模型时只利用MLR方法而不需应用主成分回归或偏最小二乘技术。方法简便快速,模型稳定有预测能力。     

新型谷胱甘肽过氧化物酶模拟物-SeHA的合成及体外抗氧化活性研究

用化学修饰法合成了一个新的具有GPX活性的模拟物-硒化透明质酸(SeHA),其GPX活力可达276.88 U/μmol。用红外光谱和核磁共振光谱对模拟酶的结构进行研究,证明硒的修饰位点位于透明质酸的N-乙酰氨基葡萄糖的-CH2OH。为进一步研究SeHA的抗氧化活性,建立了Fe2+/Vc诱导的牛心线粒体损伤体系,对SeHA的体外生物活性进行研究。结果显示SeHA能够有效抑制损伤线粒体的膜膨胀、脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)的生成及线粒体细胞色素氧化酶(CCO)活力的降低;同时在与另一种GPX模拟物-PZ51的比较中SeHA也表现出了更为明显的体外抗氧化活性。     

胰岛素受体短肽配体的亲和筛选

以高效表达胰岛素受体的中国仓鼠卵巢细胞(CHO-IR)为筛选靶标, 经过一轮酸洗脱和三轮特异性竞争洗脱筛选, 成功地富集了与胰岛素受体结合的重组噬菌体克隆. 随机挑 取噬菌体克隆检测其与胰岛素受体的结合活性, 选取结合力最强的6个单克隆, 测得其与 CHO-IR之间的Ｋ_d值为纳摩级, 表明为特异性结合; 经序列分析表明短肽之 间有明显的基序存在.     

噬菌体肽库技术及应用

噬菌体肽库技术是近年来发展起来的一项重要技术,具有广泛的应用前景.本文综述了这一技术的发展以及它在各个领域内的应用.     

生物活性肽对罗非鱼嗅囊EOG反应的影响

通过记录奥尼罗非鱼嗅上皮产生的嗅电图(electro-olfactogram,EOG)反应,研究了几种小肽(包括GSH、丙谷二肽、肌肽、双甘氨肽、阿斯巴甜)以及几种蛋白酶解物(包括鱼粉酶解物、两种大豆酶解物)对罗非鱼嗅觉反应的影响。结果表明:罗非鱼嗅电图是一个单相负电位。EOG幅值随着刺激浓度的升高而增大。在小肽组中,罗非鱼嗅囊在受到GSH刺激的时候产生的EOG反应最强烈,在刺激浓度为2mmol/L时,反应幅值显著大于其它4种小肽(P(0.05);在浓度为5、10mmol/L时差异极显著(P(0.01)。在3种酶解物中,在同一刺激浓度下,鱼粉酶解物引起的EOG幅值比其它两种大豆酶解物的要大,在刺激浓度为50、200mg/L时差异显著(P(0.05)。结果揭示生物活性肽对罗非鱼有嗅觉刺激作用,与其它小肽相比,罗非鱼嗅囊对GSH的刺激反应更强烈。在3种蛋白酶解物中,鱼粉酶解物对罗非鱼嗅囊EOG反应的刺激较为强烈。     

噬菌体展示肽库技术淘选蚕丝纤维蛋白连结短肽的实验研究

采用噬菌体随机肽库展示技术研究与蚕丝纤维蛋白连结的功能性短肽的淘选方法.实验结果显示,淘选的与蚕丝纤维蛋白连结的功能性短肽都包含有一个相同的氨基酸残基序列QSWS.噬菌体与蚕丝蛋白的连结试验和合成肽与蚕丝蛋白的连结试验都证实了QSWS序列与蚕丝蛋白连结的重要性.随着对淘选方法进一步改进和优化,这些功能性短肽将有助于对蚕丝进行功能化改造,可拓宽蚕丝在生物材料领域中的应用.     

国内外食品包装模拟物的选用比较及化学物迁移研究

食品包装材料的卫生安全是食品安全的一个重要方面,化学物的迁移对人身健康造成的伤害引起了社会的关注。本文综述了食品包装材料化学物向食品迁移的研究现状和迁移实验中食品模拟物的选择。     

异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选

利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术, 优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选. 先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶（ICL）具有高亲和力的结合肽, 再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体（1F8I）的分子对接, 最后用Fmoc固相合成法合成多肽, 并对其生物活性进行检测. 实验结果表明, 通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列, 其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接. 体外生物活性检测结果显示, 得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用（抑制率均超过50%）.     

食源性生物活性肽对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨食源性生物活性肽对小鼠免疫功能的影响.方法 小鼠灌胃给予食源性生物活性肽,剂量分别为0.4 g/kg·bw,0.2 g/kg·bw和0.1 g/kg·bw,连续给药30天,观察其对小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性测定的影响.结果 食源性生物活性肽能够使小鼠碳廓清能力增强,提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能和血清溶血素含量,但对小鼠迟发型变态反应(DTH)、小鼠脾淋巴细胞转化、NK细胞活性、抗体生成细胞的数量无明显影响.结论 食源性生物活性肽对小鼠体液免疫及单核-巨噬细胞功能测定两项试验结果均为阳性,故可判定食源性生物活性肽具有增强免疫力功能的作用.     

Exendin-4螺旋结构对生物活性及稳定性的影响

针对Exendin-4的螺旋结构特点,采用去掉螺旋序列、用3个连续Ala替换螺旋以及Gln13替换为Tyr13的方式对N端α-螺旋及C端α-螺旋进行改造,设计出4个结构模拟物.通过圆二光谱和荧光光谱进行结构分析,结合模拟物生物活性实验,分析Exendin-4螺旋结构与生物活性的关系.结果表明:Exendin-4的N端螺...     

大豆蛋白与大豆肽的生物活性及加工特性研究进展

大豆提供了具有良好营养和理化特性且低成本的蛋白质来源。在大豆加工产业链中,大豆蛋白和大豆肽是非常重要的延伸产品,因在预防和缓解某些疾病方面有不可忽视的利用价值,受到国内外研究人员以及消费者的关注,其作为重要的优质蛋白质来源在食品工业等领域具有广阔的应用前景。介绍了大豆蛋白及大豆肽的生产工艺、生理活性,同时论述了大豆蛋白的食用安全性及加工特性。分别比较了大豆分离蛋白和大豆肽的现存工艺及新工艺的差异,提出了新工艺的优势和特点,为大豆蛋白和大豆肽的生产加工技术的提高提供了新思路;重点介绍了大豆蛋白及大豆肽的生物活性,包括降血脂、调节免疫力、改善骨质疏松和调节肠道菌群平衡等,并对新的生物活性的研究方向进行了总结;同时对大豆蛋白加工特性中良好的凝胶性、乳化性和组织化进行了介绍,特别对于组织化大豆蛋白(人造肉)国内存在的技术问题和今后研究方向做出了展望。     

生物活性肽对水上运动员训练期生化指标的影响

将专业水上运动员按项目随机分为对照组和实验组,强度训练照常。实验前和实验后5周对受试对象的血液生化指标进行测试。结果显示,补肽组血睾酮水平比对照组显著提高,血色素水平也有显著提高,补肽组尿素氮显著下降,血清肌酸激酶亦下降。实验所选生物活性肽可促进蛋白质的合成,促进骨骼肌损伤组织的修复以及减少细胞内肌酸激酶外渗的作用从而达到提高运动员的耐力水平和抗疲劳的作用。     

某些生物活性肽的电化学和电致化学发光特性研究

探讨了某些生物活性肽的电化学和电致化学发光特性的联系．     

胃癌细胞及临床标本特异结合的多肽的筛选与鉴定

从噬菌体随机十二肽库筛选出两个与人胃腺癌细胞SGC-7901表面特异结合的阳性噬菌体克隆,用细胞免疫荧光法鉴定这些克隆与SGC-7901结合的特异性,据亲和力确定克隆GSP5为最佳克隆,进一步以免疫细胞/组织化学等方法鉴定此克隆与胃癌细胞和临床组织的特异性/敏感性.结果显示,噬菌体克隆GSP5对SGC-7901细胞及胃癌临床组织具有较好的结合特异性/敏感性.该多肽有望成为胃癌分子影像诊断与靶向治疗的候选多肽导向分子.     

基于核四极共振的爆炸模拟物探测研究

针对当前爆炸物探测中存在的突出问题,基于固体物理学相关理论和核四极共振基本原理,给出一种具有本征探测能力的核四极共振爆炸物探测方法. 该方法以爆炸物分子中普遍存在的¹⁴N核为探测对象,探测不同分子结构所具有的不同核四极共振特征信号. 试验测得亚硝酸钠、乌洛托品、尿素和硫脲等几种爆炸模拟物的核四极共振信号. 试验结果表明,该探测方法能本证标识各被探物是一种准确有效的本征探测方法.     

模拟超氧化物歧化酶二（乙二胺）配合物的合成及生物活性

以乙二胺为配体,合成了三种具有不同构型的模拟超氧化物歧化酶的模拟化合物：ｔｒａｎｓ－「Ｃｏ（ｅｎ）２Ｃｌ２）」．Ｃｌ,ｃｉｓ－「Ｃｏ（ｅｎ）２（ＮＯ２）２」．Ｃｌ及ｃｉｓ－「Ｃｏ（ｅｎ）２（ＮＯ２）２」２Ｓｂ２（Ｃ４Ｈ４Ｏ６）２．２Ｈ２Ｏ,并对它们进行了紫外,红外谱图的表征,利用邻苯三酚自氧化法进行了活性检测,活性数据ＩＣ５０及ＰＩ５０表明配合物具有抑制Ｏ＾－２的活性,ｃｉｓ－「Ｃｏ（ｅｎ）２（Ｎ     

吉西他滨3′-氨基酸酯化拟肽类化合物的合成及生物活性评价

吉西他滨是临床上常用的一种拟核苷类抗肿瘤药物,临床实验表明吉西他滨在小肠中的渗透效率偏低,其在体内的平均口服生物利用度仅为37.6%。小肠寡肽转运蛋白(PEPT 1)是位于小肠细胞膜上的一种跨膜转运蛋白,其对于体内拟肽类化合物具有显著的主动跨膜转运活性。针对于PEPT 1的转运特性,选择性地合成了8种吉西他滨3'-氨基酸酯化拟肽类化合物,所有的化合物结构经ESI-MS和1HNMR确证。同时体外活性实验表明,所有化合物与PEPT 1的亲和度都有一定程度的提高,其在Caco-2细胞的膜渗透效显著增强,同时部分化合物5c,5e还展现出了很好的体外抗肿瘤细胞增殖活性。