Hela细胞MTT试验作为眼刺激替代试验的研究

目的探讨Hela细胞MTT试验(Hela-MTT)是否可作为家兔眼刺激试验(Draize test)的一种替代方法。方法用该方法对22种化妆品的眼刺激性进行检测,并与1999年卫生部颁布的《化妆品卫生规范》和新颁布的《化妆品卫生规范》(2002版)测定的眼刺激试验最大平均值(MASold和MASnew)分别进行相关性比较。结果Hela-MTT和MASold、MASnew的相关系数分别为-0.811、-0.639。结论Hela-MTT可作为替代方法用于眼刺激性的评价,是比较有潜力的眼刺激替代试验方法。     

市售化妆品安全性毒理学状况调查

目的通过抽样测试,对河北省内部分城市(2011—2012年)市售化妆品安全性毒理学状况进行调查。方法采用动物试验方法,对市场采集的祛斑类、防晒类、洗面类及沐浴类等33个化妆品进行安全毒理学试验观察。结果 19个化妆品(沐浴类8个,洗面类8个,祛斑洁面类3个)对家兔的急性皮肤刺激性试验结果:无刺激性10例(52.6%),轻刺激性9例(47.4%);16个样品(沐浴类8个,洗面类8个)对家兔急性眼刺激试验结果:无刺激性0例、微刺激性3例(18.8%)、轻刺激性13例(81.2%);17个样品(祛斑洁面类3个,防晒类9个,祛斑类5个)对豚鼠的皮肤变态反应试验结果:14例无致敏反应(82.4%),出现弱致敏性和轻致敏性反应的共有3例(17.6%)。结论调查显示,各类化妆品均有不同比例的轻(或微)度毒理学反应,虽然可以判定所调查产品均在人类可接受范围之内,但提示监管部门应重视和加强风险监控,以保障消费者安全。     

新生儿溶血病血清学检查分析

通过对我院临床确诊的34例新生儿溶血病血清学检查回顾,对血清学诊断方法进行分析评价。确诊为高胆红质血症,新生儿溶血病患儿进行血型鉴定、直接抗球蛋白试验(DAT)、血清游离抗体测定试验、新生儿红细胞抗体释放试验检测。结果显示34例ABOHDN患儿中新生儿红细胞直抗试验阳性率85.29%,血清游离抗体试验76.47%,新生儿红细胞抗体释放试验100%。说明新生儿红细胞抗体释放试验是鉴定新生儿溶血病最敏感的一项试验。     

左卡尼汀注射液安全性评价的研究

摘要: 目的评价左卡尼汀注射液( 5 mL: 1. 0 g) 临床用药的安全性。方法血管刺激性试验采用耳缘静脉注射,同体左右侧自身对比的方法; 试验用兔红细胞混悬液与供试品温育,观察溶血情况; 用左卡尼汀注射液( 5 mL:1. 0 g) 在190 mg /kg 和95 mg /kg 剂量条件下进行致敏3 次,并用2 倍体积致敏浓度进行激发时均未见过敏反应症状,与平行对照品在相同剂量和浓度下进行比较; 左卡尼汀注射液( 5 mL: 1. 0 g) 在高剂量190 mg /kg 和低剂量95 mg /kg时进行被动皮肤过敏试验。结果左卡尼汀注射液在对家兔红细胞混悬液( 体外试管法) 和血管刺激的情况下结果与平行对照品类似,无溶血作用,也无明显的血管刺激反应; 在主动过敏试验中豚鼠均未出现过敏反应症状,过敏反应为阴性; 被动皮肤过敏试验豚鼠均未出现蓝斑过敏反应症状,过敏反应阴性。结论左卡尼汀注射液( 5 mL∶ 1. 0 g) 临床用药符合注射用药的要求,可以做为安全性评价的根据。     

硫普罗宁注射剂安全性再评价

目的针对上市硫普罗宁注射剂存在一定临床反应的反馈,对市售硫普罗宁注射剂进行安全性再评价。方法对硫普罗宁注射剂进行血管刺激性、溶血性、过敏性试验。人与动物剂量换算依照1:20(家兔和豚鼠)。结果硫普罗宁注射剂对家兔耳缘静脉无明显刺激作用;对家兔红细胞无明显溶血及致凝聚作用;对豚鼠无过敏作用。结论上市硫普罗宁注射剂供临床静脉注射用安全性尚好。     

新鱼腥草素钠注射液药理毒理研究

用豚鼠和家兔分别进行新鱼腥草素钠注射液全身用药的过敏性、溶血性、血管刺激和肌肉刺激试验,结果表明0.016%的新鱼腥草素钠注射液(为临床拟用浓度的2.5倍)对豚鼠无致过敏作用;0.016%新鱼腥草素钠注射液对家兔红细胞无明显体外溶血和凝集作用;0.016%新鱼腥草素钠注射液15ml/kg静脉滴注,每天1次,连续7天,对家兔耳缘静脉无明显刺激作用;0.2%(临床肌内注射的拟用浓度)的新鱼腥草素钠注射液肌内单次注射对家兔股四头肌无明显刺激作用.而同一部位连续注射3次有轻度刺激性,但停药后可以恢复.应注意避免在同一部位连续注射.     

注射用头孢呋辛钠他唑巴坦钠制剂安全性研究

为考察注射用头孢呋辛钠他唑巴坦钠(4∶1)制剂的安全性,分别进行豚鼠全身过敏性、家兔局部刺激性和家兔红细胞溶血性试验.结果显示,动物给药后未见明显溶血反应,家兔耳缘静脉和股四头肌未见明显刺激反应,豚鼠也无全身过敏反应.表明本品符合肌肉和静脉注射用药安全性要求.     

盐酸洛美沙星盐水注射液溶血试验

目的：观察盐酸洛美沙星盐水注射液与红细胞接触，是否产生溶血与凝集现象。方法：参照药理学实验方法学方法制备2％兔红细胞混悬液，加入不同剂量的受试药物的溶液，观察0．5、1、2、3小时各试管内红细胞是否出现全溶血、部分溶血及凝血现象。结果：受试药物在3小时内均未出现溶血及凝集现象。结论：盐酸洛美沙星盐水注射液（0．8mg／ml）对家兔红细胞无影响（既不引起溶血及凝集）。     

微量元素钼对小鼠及家兔免疫反应影响的初步探讨

用小鼠和家兔作为试验动物,一部分通过喂饲或注射补加钼,另一部分不加.免疫原为细菌(肠结肠炎耶尔辛氏菌)或绵羊红细胞.试验研究了钼对下列诸方面的影响:(1)小鼠胸腺和脾脏的发育;(2)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数;(3)小鼠脾脏B淋巴细胞EAC玫瑰花结形成率;(4)小鼠注射绵羊红细胞后溶血素的产生;(5)家兔注射肠结肠炎耶尔辛氏菌后的凝集类滴度.初步研究的结果,发现钼可以促进试验动物的体液免疫.     

磷酸川芎嗪注射液安全性试验研究

为了评价磷酸川芎嗪注射液的安全性,笔者采用过敏试验、静脉血管刺激试验、肌肉刺激试验、溶血试验进行动物药理实验研究.结果表明:质量浓度为0.0012g·mL-1的磷酸川芎嗪注射液对动物无过敏反应,无溶血现象,对静脉血管、肌肉无刺激反应,提示该药在本实验条件下是安全的.     

缬沙坦对兔视网膜色素上皮细胞的影响

目的:通过研究缬沙坦对兔视网膜色素上皮细胞生长的影响,以期寻找药物治疗、延缓PVR的发生、发展。方法:体外培养兔视网膜色素上皮细胞,取第三代细胞加入96孔板,分为①正常对照组;②血小板源性生长因子(PDGF)刺激组:50μg/L PDGF;③缬沙坦(Valsartan)治疗组:0.2mg/mL Valsartan+50μg/L PDGF。分别行MTT法检测兔RPE细胞增殖能力,ELASA法检测兔RPE细胞培养液TGF-β1含量。结果:PDGF刺激组兔RPE细胞的增殖速度加快,而Valsartan治疗组对PDGF刺激后的兔RPE生长有明显抑制作用,且明显抑制PDGF刺激兔RPE细胞分泌TGF-β1。结论:Valsartan可抑制体外培养的兔RPE细胞生长。     

剑麻皂素对急性血瘀大鼠血液流变性的影响研究

【目的】研究剑麻皂素对急性血瘀大鼠血液流变性的影响。【方法】采用皮下注射大剂量肾上腺素加寒冷刺激的方法制备大鼠急性血瘀模型,给予不同剂量的剑麻皂素,观察用药后大鼠的血液流变学指标。【结果】与正常对照组比较,急性血瘀模型大鼠的全血黏度(BV)、血浆黏度(PV)均明显升高(P0.01);剑麻皂素可以明显降低急性血瘀大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数(EAI)、红细胞压积(HCT)、红细胞变形指数(DI)、红细胞电泳时间、血沉(ESR)等指数,同时能降低血浆纤维蛋白原(Fib)含量,延长凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)(P0.01)。【结论】剑麻皂素能够明显改善急性血瘀大鼠血液流变性。     

北部湾金黄水母Chrysaora helvola Brandt刺细胞毒液溶血活性

【目的】探讨金黄水母Chrysaora helvolaBrandt刺细胞毒液(nematocysts venom,NV)的红细胞溶血活性特征及可能机制。【方法】通过分光光度法测定红细胞溶解释放血红蛋白的量来确认不同条件和药物对NV诱导红细胞溶血行为的影响。【结果】NV诱导的红细胞溶血与其总蛋白浓度存在依赖关系。溶液pH值、大分子非电解质渗透压保护剂PEGs均能显著影响其溶血活性;非电解质小分子糖类渗透压保护剂D-甘油和D-半乳糖对溶血活性影响很小,但D-葡萄糖能显著延缓溶血。NV同时具有Ca~(2+)依赖的弱磷酸酯酶A2(PLA_2)活性,且受组氨酸烷基化试剂p-BPB抑制。这一PLA2活性可能对其红细胞溶血活性也有贡献。【结论】NV的红细胞溶血活性可能由膜穿孔机制和所含PLA_2酶成分造成,并受到含葡萄糖单元结构的糖受体调节。     

胞二磷胆碱对贮存红细胞溶血的抑制作用是否与能量代谢有关?

前文曾报导胞二磷胆碱(Cytidine Diphosphocholine,简称CDP-胆碱)有显著抑制贮存红细胞溶血的作用。为探讨CDP-胆碱的作用是否与嘌呤核苷类相同,也参与了细胞内的能量代谢,本文就红细胞贮存过程中的某些生化指标作了分析。我们将含有CDP-胆碱、并以酸性柠檬酸葡萄糖(简称ACD)抗凝的正常人血(CDP-胆碱最终浓度约为13mM)贮存于4℃,历8～10周。测定贮存过程中全血葡萄糖、乳酸和红细胞内酸溶性有机磷及无机磷的含量变化,并与对照比较。结果显示,CDP-胆碱在抑制红细胞溶血的同时,却对全血的葡萄糖消耗、乳酸生成及贮存过程中红细胞内酸溶性有机磷含量的下降、无机磷含量的上升均无影响,表明CDP-胆碱抑制溶血的作用与能量代谢基本无关。此外,经测定贮存过程中红细胞去蛋白滤液的紫外光吸收图谱,也看到实验组与对照组完全一致,提示在本实验条件下,CDP-胆碱基本不进入红细胞内部。所有以上结果表明,CDP-胆碱抑制溶血主要不是通过参与细胞内的能量代谢而起作用,因此与嘌呤核苷类物质是完全不同的。根据以上结果,我们认为对CDP-胆碱抑制贮存红细胞溶血机理的研究应着重于细胞膜的结构和功能方面。     

胞二磷胆碱对贮存红细胞溶血的抑制作用是否与能量代谢有关?

前文曾报导胞二磷胆碱(Cytidine Diphosphocholine,简称CDP-胆碱)有显著抑制贮存红细胞溶血的作用.为探讨CDP-胆碱的作用是否与嘌呤核苷类相同,也参与了细胞内的能量代谢,本文就红细胞贮存过程中的某些生化指标作了分析.我们将含有CDP-胆碱、并以酸性柠檬酸葡萄糖(简称ACD)抗凝的正常人血(CDP-胆碱最终浓度约为13mM)贮存于4℃,历8～10周.测定贮存过程中全血葡萄糖、乳酸和红细胞内酸溶性有机磷及无机磷的含量变化,并与对照比较.结果显示,CDP-胆碱在抑制红细胞溶血的同时,却对全血的葡萄糖消耗、乳酸生成及贮存过程中红细胞内酸溶性有机磷含量的下降、无机磷含量的上升均无影响,表明CDP胆碱抑制溶血的作用与能量代谢基本无关.此外,经测定贮存过程中红细胞去蛋白滤液的紫外光吸收图谱,也看到实验组与对照组完全一致,提示在本实验条件下,CDP-胆碱基本不进入红细胞内部.所有以上结果表明,CDP-胆碱抑制溶血主要不是通过参与细胞内的能量代谢而起作用,因此与嘌呤核苷类物质是完全不同的.根据以上结果,我们认为对CDP-胆碱抑制贮存红细胞溶血机理的研究应着重于细胞膜的结构和功能方面.     

性成熟对养殖雌性异育银鲫血液生理指标的影响

以雌性异育银鲫为研究对象,对其性成熟前后(卵巢发育分别为Ⅳ期和Ⅴ期)红细胞数量(RBC)、血红蛋白(Hb)含量、红细胞比容(Ht)、红细胞渗透脆性及红细胞沉降率(ESR)进行测定。结果表明,雌性异育银鲫卵巢从Ⅳ期发育至Ⅴ期,血液中的RBC、Hb含量和Ht值均显著(p<0.05)降低,其中Ht值降低尤为明显(p<0.01);红细胞渗透脆性的变化不是很明显,开始溶血的浓度几乎没有变化,而完全溶血的浓度则有所升高,说明红细胞的渗透脆性有所增大;1h的红细胞沉降速度明显加快,2 h的则略有增加。     

组织工程人角膜内皮在维持新西兰兔角膜透明中的效果研究

为了评价组织工程人角膜内皮(TE-HCE)维持动物角膜透明的效果,利用来自非转染人角膜内皮(HCE)细胞系的核型正常单克隆细胞株为种子细胞、以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,对新西兰兔进行了穿透性角膜内皮移植试验,利用肉眼观察了移植兔眼的水肿和免疫排斥情况,利用裂隙灯显微镜检测了移植兔角膜的透明情况,并利用荧光显微镜检测了移植兔角膜内皮细胞的CM-DiI标记。对撕除后板层新西兰兔眼进行TE-HCE穿透性角膜内皮移植实验的观察和检测结果显示,移植后的兔眼角膜没有出现明显的水肿和排斥等不良反应,使移植兔角膜维持透明的时间长达100d,且角膜内皮移植区的细胞均为带有CM-DiI标记、来自TE-HCE的种子细胞。由此可见,体外重建TE-HCE移植后能使新西兰兔角膜长期保持透明,有望作为HCE的替代物用于角膜内皮失代偿和角膜内皮盲的临床移植和治疗。     

0.9%氯化钠注射液与参附注射液配伍的溶血作用研究

对参附注射液中说明书规定使用溶媒的溶血作用进行分析及安全性评价.采用紫外-可见分光光度计法测定以0.9%氯化钠注射液为溶媒稀释后的参附注射液和用2%兔红细胞混悬液混合后的吸光度值,根据吸光度值之差计算其溶血率.并采用双因素无重复试验方差分析对不同批次和不同浓度参附注射液进行统计学分析.结果显示,不同批次参附注射液间溶血作用存在显著性差异,溶血作用与浓度相关,且稀释倍数为6倍和8倍时都有溶血风险.因此,应该严格选用药品说明书中规定的溶媒,为参附注射液临床应用安全提供保障.     

肿瘤热疗用Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒的生物相容性

采用MTT实验评价自制Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒浸提液体外细胞毒性;溶血实验评价其有无溶血作用和LD50评价其动物急性毒性,微核实验评价其有无致畸、致突变作用等.兔肝脏穿刺注射Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒,观察其对兔肝肾等组织和功能的影响.MTT结果显示:该材料对L-929细胞毒性为0～1级;溶血实验中Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒溶血率为0.104%,远小于5%;昆明小鼠腹腔注射该材料混悬液,其LD50为6.026g/kg,其95%的可信区间为4.78～7.60g/kg.微核实验结果表明:该材料对小鼠骨髓微核形成率与阴性对照组相比无显著差异,而与阳性对照组CTX组相比有明显差异.兔肝脏穿刺注射Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒心,肝、脾、肺、肾组织形态和肝、肾等血生化指标均无明显改变.结果表明自制的Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒具有良好的生物相容性.     

复方丹芩颗粒治疗玻璃体积血的实验研究

目的观察复方丹芩颗粒对动物眼玻璃体积血的影响。方法用家兔自体血造成眼玻璃体出血模型,分为复方丹芩颗粒(8 g/kg、4 g/kg、2 g/kg)治疗组和普罗碘胺注射液治疗组。用复方丹芩颗粒治疗8w,观察眼底可见度;兔眼病理切片中的巨噬细胞计数变化;玻璃体液中红细胞、血凝块、机化物检出率等情况。结果与模型组比较,复方丹芩颗粒组大鼠眼底可见度明显增加,眼底红细胞消失和溶解情况明显减轻,玻璃体液中红细胞、血凝块、机化物检出率明显减少,病理切片中的巨噬细胞计数明显升高。结论复方丹芩颗粒对瘀血有明显的解聚、促溶作用,增进红细胞溶解和吸收。促使巨噬细胞趋向眼部组织,增进积血的清除。