农杆菌介导的玉米遗传转化进展

本文回顾了根瘤农杆菌的玉米遗传转化的发展历史 .对各种影响农杆菌转化玉米效率的关键因子包括农杆菌的菌株与载体 ,受体材料的基因型和发育程度 ,培养环境 ,培养基成分等因素进行了综述 .对发展现状和未来趋势做了讨论 .     

笋玉米原生质体培养及遗传转化的研究

以自花受粉的笋玉米幼胚为外植体建立了胚性细胞悬浮系,酶解游离原生质体通过液体浅层培养得到了再生植株;通过PEG法和电激法对原生质体进行了遗传转化,转化用外源基因是潮霉素抗性基因和BT基因,原生质体再生愈伤组织经潮霉素筛选后,PEG法和电激法获得抗性愈伤组织的频率分别为9 3%和8.9%,Southem-blotting证明外源基因已整合到玉米抗性愈伤组织细胞基因组中,转基因工程植株的分化工作在正在进行中.     

油菜遗传转化方法的研究进展

主要对油菜外植体类型、筛选标记、转化方法、作物改良及其成果进行了综述,并对转基因油菜存在的问题和前景进行了探讨．研究发现,现阶段油菜转基因仍存在局限性,主要表现在：1）转化受体再生周期长,转化过程繁琐,转化效率低;2）外源基因表达不确定,遗传不稳定,基因沉默现象有待解决;3）转基因油菜对人类健康和生态环境可能存在不利影响及不确定性的风险,应进行科学评估,且需建立更完善的相关法律法规．同时,应继续发展及利用油菜转基因以满足人们的需求,特别是利用油菜生产能源替代品——生物柴油,前景广阔．     

通过遗传转化获得含多基因的水稻转基因纯合植株

利用基因枪法将含有4个不同基因的3个质粒共转化由粳稻品种鄂宜105号和鄂晚5号种子胚诱导的愈伤组织（5－10d龄）。从轰击的986块愈合组织中共再生出169株独立的转基因水稻植株（转化率为17％）。PCR／Southern blot分析显示70％以上的转基因植株含有所有4个基因。GUS组织化学分析、Western blot和或RT－PCR分析表明所有4个基因的共表达率为70％。未观察到任何质粒在整合中存在优势,转基因拷贝数也与基因表达量无关。遗传分析证实外源基因在后代植株中大多以孟德尔方式遗传。从其R1代为3：1孟德尔方式遗传的后代R2代植株中,鉴定含有3个或4个不同基因的转基因纯合植株系。PCR／Southern blot分析证实了这些转基因纯合植株系。这些系的植株具有相似的外源基因表达量。我们证实通过基因枪介导的共转化,结合常规育种方法筛选可以获得含多基因的转基因水稻纯合植株。这项技术为利用基因同时改良作用多个性状提供了一种途径。     

小麦遗传转化方法的研究进展

综述了近年来小麦遗传转化方法的研究进展，分析了几种转化方法的优缺点，指出基因枪法是目前小麦转化上应用最成功的方法，同时提出了提高小麦转化频率的几种措施。     

大麦遗传转化新技术的研究

利用大麦的愈伤组织小细胞团为受体，研究了使用ＰＥＧ＋电击法进行遗传转化的技术途径，作者认为：转化参数为ＰＥＧ＋１．５ＫＶ／ｃｍ电击是合适的，同时研究还表明转化前的一系列预地提高遗传转化效率是十分有效的。     

白菜类作物转基因技术研究进展

白菜类作物是芸薹属中重要的栽培亚种群,也是重要的蔬菜之一。建立高效可重复的植株再生和遗传转化体系是利用基因工程进行遗传改良所必需的。本文从高频率植株再生体系的建立,ＤＮＡ直接转移,不依赖于植物细胞或组织培养的农杆菌介导转移,建立在细胞或组织培养基础上的农杆菌介导的转化,转化株后代的遗传行为等方面论述了白菜类作物转基因技术的最新研究进展,并提出了存在的问题和进一步的研究方向。     

梨遗传转化与遗传标记研究进展

用遗传转化的方法对梨进行遗传改良和用分子生物学的方法研究梨的遗传性状是当今梨科研的热点,基因型、抗菌肽的活性与稳定性、农杆菌的侵染力等是影响梨遗传转化的重要因素．DNA的提取方法决定DNA的数量和质量,直接影响分子生物学方法在梨中的应用和应用结果．本文综合有关文献综述了国内外梨遗传转化和遗传标记研究所取得的进展,并结合存在的问题对今后的工作重点提出了几点建议．     

小麦遗传转化技术研究进展

综述了基因枪法、花粉管通道法、离子束介导法、农杆菌介导法在小麦遗传转化上的应用及发展,展望各种转化技术的应用前景.     

Establishment of a genetic transformation system for maize inbred P9-10

It was found that the supplement of 10 -4 mol/L AgNO3 in N6 medium enhanced the induction of type Ⅰ embryogenic calli from immature embryos of maize inbred P9-10. After high-osmotic treatment, the induced calli was taken as transformation recipient to be bombarded with plasmid pMG6 carrying synthetic Bt gene by PDS-1000/He genegun. A total of 14 resistant calli were obtained after screening subsequently on the mediums with gradually increasing selective pressure. 10 plants were regenerated from the resistant calli on 3 different induction media, and 8 out of the 10 regenerated plants were confirmed to be integrated with Bt gene by PCR and Southern blotting analysis. Results of ELISA showed that the Bt-protein content in the leaves of the transgenic plants varied between 20-200 ng/g fresh weight.     

纳米材料介导植物遗传转化的研究进展

植物遗传转化对于改善农作物的性状,培育高产、优质、多抗性的新品种,从而降低农药和肥料的使用量等至关重要.传统的遗传转化方法存在着诸多局限性,如物种的不普适性,植物组织易被破坏,成本高、耗时长和转化效率低等.近几年,纳米材料介导的植物遗传转化策略逐渐被研究和尝试,并显示出了不受物种限制、生物相容性良好和操作简单等一系列优势.文章对常用的传统遗传转化方法进行了总结,重点介绍了近年来多种纳米材料在植物遗传转化中的研究和应用进展,并讨论和展望了纳米材料在植物遗传转化应用领域的挑战和发展前景.     

Genetic transformation of calli from maize and regeneration of herbicide-resistant plantlets

The herbicide-resistant geneals ofArabidopsis thaliana has been transferred into embryonic calli of maize by microprojectile bombardment. We have obtained chlorsulfuron-resistant calli and regenerated plantlets through selection by herbicide chlorsulfuron. The results of PCR analysis and Southern blotting indicate that geneals has been transferred into some plantlets. The test of spraying chlorsulfuron indicated that the transgenic plantlets had favorable herbicide-resistant trait. The purpose of the research was to obtain chlorsulfuron-resistant transgenic maize and hope that this kind of high efficient herbicide could be widely used in rotation soil of wheat and maize. In addition, through spraying herbicide, we could eliminate the hybrid plants and thereby increase the purity of F1 seeds.     

杂种优势遗传基础的研究进展

由于杂种优势的利用是农业增产的重要途径，杂种优势的遗传基础研究一直受到高度重视。近十年来发展的分子标记技术及构建的高密度遗传图谱，为阐明杂种优势的遗传基础提供了有力的工具，杂种优势研究有了新进展，通过对已有资料的分析研究，从遗传差异，基因表达调控、基因效应、基因网络系统等方面探讨了杂种优势的遗传基础及其研究进展。     

农杆菌介导禾本科牧草遗传转化的研究进展

建立禾本科牧草的遗传转化体系对于种质资源利用具有重要意义.近年来,假俭草(Eremochloa ophiuroides)、黑麦草(Lolium perenne)、结缕草(Zoysia japonica)、柳枝稷(Panicum virgatum)、高羊茅(Festuca elata)、二穗短柄草(Brachypodiu...     

两种玉米DNA提取方法的比较

本试验用改良的CTAB法和煮沸法两种方法提取玉米基因组DNA.紫外光分光光度法和0.8%水平琼脂糖凝胶电泳检测结果表明:改良的CTAB法虽然步骤多,但要比煮沸法所提的DNA的质量和纯度都要高,且都符合一般分子生物学反应DNA的最佳质量要求.     

农杆菌介导的唐菖蒲遗传转化体系的建立

在唐菖蒲‘Advanced Red’胚性愈伤组织受体系统的基础上,建立其遗传转化体系。采用根癌农杆菌（GV3101）介导法,研究了侵染液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮（AS）浓度、负压和筛选方式等因子对唐菖蒲遗传转化效率的影响。结果表明：在遗传转化过程中,不经预培养,负压处理下,农杆菌菌液OD600为0.6～0.8,侵染时间15～20min,添加100μmol/L AS,共培养3d,可获得较高的遗传转化效率。经过3～4个月选择培养,部分抗性植株经PCR和Southern杂交检测表明,目的基因gus已整合到唐菖蒲基因组中。     

桑树遗传转化技术中抗生素的浓度优化研究

调查了抗生素对根癌农杆菌介导的桑品种“新一之濑”遗传转化不同培养阶段外植体生长、分化或生根的影响及其对农杆菌的抑制效果 ,并确定 :在叶盘 (或茎尖 )转化筛选培养阶段 ,Kan (卡那霉素 )和 Cab (羧苄青霉素 )适宜浓度分别为 3 0～ 40 mg/ L和 2 0 0～40 0 mg/ L (或 6 0～ 80 mg/ L和 2 0 0～ 6 0 0 mg/ L ) ,在抗性芽继代 (或生根 )培养阶段 ,Kan和Cab分别为 40～ 5 0 mg/ L和 1 0 0～ 2 0 0 mg/ L (或 5～ 1 0 mg/ L和 5 0～ 1 0 0 mg/ L) .Cef(头孢霉素 )对桑树各种外植体的影响效果与 Cab相似 ,但两者的抑菌效果因农杆菌菌株、外植体类型以及培养阶段的不同而存在差异 ,用含 Kan、Rif(利福平 )和 Str(链霉素 )的 LB培养基浸渍叶盘则出现分化率下降、褐化死亡较严重的现象 .     

水仙胚性愈伤的获得及农杆菌介导GUS基因的遗传转化

用正交实验设计对前期影响水仙胚性愈伤诱导和分化关联性大的因素进行综合分析,结果显示,培养基类型、激素及处理方式、不同添加物等对水仙外植体胚性愈伤诱导及分化的影响是基于培养基的多因素协同效应。水仙适宜胚性愈伤诱导培养基是:改良MB+NAA(0.2 mg/L)+6BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);适宜的分化培养基是：改良N6+2,4D(0.5 mg/L)+6BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L)。实验中观察到水仙体细胞胚的发生,在胚性愈伤诱导和分化体系优化基础上实现农杆菌介导GUS基因转化,稳定表达抗性愈伤GUS染色显示最佳胚性愈伤诱导培养基能促进水仙外植体感受态的形成,有利于外源基因的接受,PCR检测表明实验中获得3株转GUS基因阳性植株。