柚子皮中抗氧化活性成分的分离及其鉴定

采用乙醇浸提法,通过乙醇不同浓度,固液比,温度及时间等条件的正交实验,对柚皮中抗氧化活性成分进行分离提取并筛选出最佳的提取方法,乙醇提取物的定性鉴定表明柚皮的抗氧化活性成分主要为黄酮醇类的芦丁。     

沙田柚花柱S-糖蛋白的分离及鉴定

采用层析和电泳相结合的技术,分离和鉴定沙田机花柱中与自交不亲和相关的蛋白质,结果表明：自交沙田柚花柱蛋白质提取液的３５％（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析级分,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０层析,可得２个峰,其中峰Ⅰ具有抑制自交花粉管生物的活性,峰Ⅰ含２种蛋白质,且均为糖蛋白,蛋白质Ａ相对分子质量为３２．１０ｋｕ,等电点为ｐＨ７．２;蛋白质Ｂ相对分子质量为２５．１２ｋｕ,等电点为ｐＨ６．４．峰Ⅰ还具有核酸酶活性     

短葶山麦冬内生真菌分离鉴定及抗氧化活性

以福建短葶山麦冬主产区之一泉州罗溪镇采集的1 a生和盆栽6 a生短葶山麦冬为研究材料,分别从叶、须根和块根中分离内生真菌,测定根部内生真菌的抗氧化活性.结果表明:1 a生块根的内生真菌分离率高于6 a生,须根中分离的内生真菌数量最少.以总抗氧化能力为指标,评价从根部分离得到的18株菌株的抗氧化活性,对其进行降序排序,筛选前5株菌株,测定其清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的能力,结果发现,d5菌株发酵产物的清除效果最为明显.进一步测定其乙酸乙酯萃取部位3种自由基清除能力表明,d5菌株对DPPH自由基和羟自由基的能力最强,EC50分别为0.572和1.257 mg/m L.经真菌18 s r DNA序列比对测定d5菌株属于青霉菌属,可以作为进一步研究的对象.     

龙须菜多糖的提取、分离及抗氧化活性的研究

对龙须菜多糖的最适提取工艺条件、分离方法及其抗氧化活性进行了研究. 结果表明: 提取多糖的最适条件为浸提温度90℃, 浸提时间4 h, 料水比1∶100. 分别经DEAE 纤维素离子交换层析柱和Sephadex 100层析柱分离, 均显示出提取的多糖含有3种以上组分. 抗氧化实验显示该多糖对Fenton体系产生的·OH自由基具有较强的清除能力.     

长白山林蛙输卵管糖蛋白的分离鉴定

以长白山林蛙为研究对象, 对其输卵管糖蛋白进行提取分离及鉴定. 长白山林蛙输卵管冲洗液经饱和硫酸铵沉淀, DEAE-Cellulose 52离子交换柱, Sephadex G-100凝胶柱层析纯化, 得到蛋白质和糖的重合峰, 经透析、 冷冻干燥得长白山林蛙输卵管糖蛋白纯品OGP-Ⅰ. SDS PAGE电泳实验结果表明, OGP-Ⅰ是分子量为116 000的均一带. 对其分别进行蛋白和糖染色, 同一位置都出现单一条带; 紫外全扫描OGP-Ⅰ有多糖特征峰和蛋白吸收峰, 表明OGP-Ⅰ是糖蛋白纯品.     

翡翠贻贝糖蛋白提取工艺优化及体外抗氧化活性

以翡翠贻贝肉为原料,在单因素试验的基础上,通过响应面试验设计优化了翡翠贻贝糖蛋白提取的工艺条件.采用超滤方法获得翡翠贻贝超滤截留液糖蛋白PGFR(Pernaviridis glycoprotein of the filter remains of MW cut off 5KDa)和翡翠贻贝超滤透过液糖蛋白PGFL(Pernaviridis glycoprotein of the filter leaching of MW cut off 5KDa)2个组分,并分别评价其体外抗氧化活性.结果表明,从翡翠贻贝肉中提取糖蛋白粗提物的最佳工艺条件为提取时间61min,提取温度62℃,NaCl浓度0.2mol/L,料液比1∶1,在该条件下提取率为51.55%.体外抗氧化试验结果表明,翡翠贻贝PGFR对·OH,·O_2~-和DPPH自由基的清除率及总抗氧化能力均优于PGFL,可作为后续研究的主要对象,具有开发新型天然抗氧化剂的潜力.     

大鼠胆管上皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,在32%～90%Perco11密度梯度离心法的基础上进一步用免疫磁珠分离胆管上皮细胞(biliary epithelial cell,BEC),用γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transferase,GGT)和角蛋白19(cyto-keratin19,CK19)免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的胆管上皮细胞,用RT-PCR定量胆管上皮细胞的GGT和CK18mRNA,用蛋白免疫印迹定量胆管上皮细胞的GGT、角蛋白18(cytokeratin 18,CK18).初步证实分离的细胞中GGT和CK19阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的胆管上皮细胞的GGT和CK18mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离胆管上皮细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,方便适用.     

牛大力总黄酮抗氧化作用的研究

为了研究牛大力总黄酮(Flavonoids from Millettia specisoa Champ,以下简称FMSC)的抗氧化作用,通过制备牛大力总黄酮,分别测定了其体外和体内的抗氧化活性,FMSC的体外抗氧化活性结果表明:FMSC对DPPH·,OH·,O_2·自由基有较强的清除能力,其IC_(50)分别为31.50μg/m L,225.04μg/m L,115.39μg/m L;此外,它对金属离子还具有较强的螯合和还原能力;在小鼠体内试验中,与模型组比较,FMSC不仅能降低小鼠血清中的BUN(29.63%)含量和提高T-AOC(58.89%)的活性(P0.05),而且它还能提高肝组织中的T-SOD(43.99%),CAT(47.33%)和GSH-Px(40.76%)酶的活性和GSH(62.17%)的含量(P0.05),此外,它还能降低MDA(36.53%)的含量(P0.05).由此可得出:FMSC在机体内外的抗氧化作用存在差异,其在体外的作用强于其在体内的作用,整体而言,其抗氧化活性较强,且具有多途径和多方面参与抗氧化的特点.     

蒙古黄芪花化学成分的分离鉴定及其抗氧化活性的研究

采用硅胶柱色谱法对蒙古黄芪花提取物进行分离,结合MS,1 H-NMR等波谱手段鉴定化合物的结构,以紫外分光光度法测定分离化合物的抗氧化能力。共分离鉴定出8种化合物,分别为:(1)金丝桃苷,(2)异槲皮苷,(3)7-甲氧基-山萘酚-3-O-半乳糖苷,(4)7-甲氧基-山萘酚-3-O-葡萄糖苷,(5)7-甲氧基-山萘酚-3-O-(6"-O-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷,(6)紫云英苷,(7)异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,(8)毛蕊异黄酮。其中化合物(3)(4)(5)(7)为首次从黄芪属中分离得到。测定了黄芪花不同粗提物及纯成分的抗氧化活性,其中金丝桃苷与异槲皮苷抗氧化活性最强。     

栗叶多糖的分离、纯化及抗氧化活性(英文)

从栗叶中分离纯化得到多糖并研究其体外抗氧化活性。从栗叶中提取得到栗叶粗多糖CLP。CLP经DE-52纤维素柱分离纯化后,于蒸馏水洗脱液中得到一个纯化多糖组分CLP1。采用体外试验研究了CLP与CLP1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除能力及还原能力。结果表明,CLP与CLP1均具有一定的清除羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的能力及还原能力,而且与多糖的浓度成正相关性。其中,CLP对过氧化氢的清除作用效果与VC相当。说明CLP与CLP1可以开发用作天然抗氧化剂。     

玫瑰花中两种抗氧化成分的分离鉴定与活性测定

通过体外抗氧化活性检测寻找玫瑰花（rosarugosa）中的抗氧化活性成分．方法采用大孔树脂，硅胶柱层析分离技术对玫瑰花抗氧化活性部位进行分离纯化；并通过理化数据及色谱分析，鉴定化合物的结构．结果分离鉴定出2种抗氧化活性成分Ⅰ，Ⅱ．分别是3，5，7，3′5′-五羟基黄酮（槲皮素）和3，4，5-三羟基苯甲酸（没食子酸）．化合物Ⅰ（槲皮素）为首次从玫瑰花中分离得到．化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的抑制小鼠红细胞溶血活性和抗小鼠组织匀浆脂质过氧化活性均高于玫瑰花粗品，     

内生真菌MG-9的主物质麦角甾醇的分离鉴定及抗氧化活性分析

从疏花水柏枝中的一株内生真菌MG-9的粗提物中重结晶出一种主物质,采用NMR、MS等现代波谱学技术鉴定这种主物质为麦角甾醇.以LDH(乳酸脱氢酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、caspase 3、caspase 9的酶活表达情况为指标,研究了MG-9主物质对神经细胞SH-SY5Y的毒害作用及抗氧化保护作用机理.结果表明:麦角甾醇在6.25-25μg/mL时对神经细胞SH-SY5Y毒性的量效关系不明显,而在6.25μg/mL时对神经细胞SH-SY5Y的氧化损伤保护具有更好的效果,将神经细胞SH-SY5Y在H_2O_2(800μmol/L)胁迫下的相对存活率提高了74.5%.并且麦角甾醇可通过抑制凋亡蛋白caspase 3的活性来达到对神经细胞SH-SY5Y的抗氧化保护作用.     

杨梅叶芳香精油的成分鉴定及抗氧化活性

采用气相色谱-质谱联用技术并结合Kovats保留指数（Ⅰk）对比法分析鉴定了乌杨梅（Myrica rubra Var．astropurea Tsen．）鲜叶芳香精油的成分,同时运用1,1-二苯基-2-苦基苯肼（DPPH）清除法、β-胡萝卜素漂白法和硫代巴比妥酸法对其抗氧化活性进行了对比分析．分析结果表明：乌杨梅叶精油成分以倍半萜类化合物为主（占总相对含量的97．45％）,其中β-石竹烯（17．67％）、（E）-橙花叔醇（16．68％）、5-羟基去氢白菖烯（7．13％）、β-蛇麻烯（6．63％）、异石竹烯（6．46％）和α-杜松烯（5．81％）是其特征组分;乌杨梅叶精油具有一定的自由基清除能力和优异的脂质抗氧化活性,抗脂质氧化能力相当于强抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）的60％-85％．乌杨梅叶精油的强抗氧化活性可能与其合有较多的5．羟基去氨白菖烯有关．     

大鼠肝星形细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2／3肝切除（pafital hepatectomy，PH）模型，用两步灌流法分散肝脏细胞，用60％Percoll梯度离心和免疫磁珠相结合分离肝星形细胞，用结蛋白（desmin，DES）和波形蛋白（vimentin，vIM）的免疫组织化学定性、定位再生肝（regenerating liver，RD、分散的肝脏细胞及分离的肝星形细胞，用RT—PCR定量肝星形细胞的DES和VIM mRNA，用蛋白免疫印迹定量肝星形细胞DES和VIM．初步证实，分离的肝星形细胞中DES和VIM阳性细胞占95％以上，从PH后各时间点分离的肝星形细胞的DES和VIM mRNA量稳定，相应的蛋白量亦稳定．表明改进的分离肝星形细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点，值得采用．     

大鼠肝窦内皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2／3肝切除（parital hepatectomy,PH）模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60％ Percoll梯度离心和免疫磁珠分离肝窦内皮细胞（hepatic sinusoidal endothelial cell,SEC）,用分化抗原簇14（cluster of differentiation 14,CD14）和内皮素-1（endothelin-1,ET-1）的免疫组织化学定性、定位再生肝（regenerating liver,RL）、分散的肝脏细胞及分离的窦内皮细胞,用RT—PCR定量窦内皮细胞的CDl1和ET-1的mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量窦内皮细胞的CD14和ET-1蛋白．初步证实,分离的窦内皮细胞中CD14和ET-1阳性细胞占95％以上,从PH后各时间点分离的窦内皮细胞的CD14和ET-1mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定．表明改进的分离窦内皮细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用．     

粘细菌的分离鉴定及活性检测

近年来,粘细菌由于其次级代谢产物结构新颖、生物活性多样而备受关注,成为发展新药的重要来源.利用已灭活酵母菌或大肠杆菌(Escherichia coli)诱导法和滤纸片诱导法等方法进行粘细菌的分离,并采取多种方法对所分离出菌株进行纯化,从95份土样中共分离出118株粘细菌,纯化出54株.根据16S rDNA进行菌株鉴定,主要的粘细菌为粘球菌属(Myxococcus)、珊瑚菌属(Corallococcus)、多囊菌属(Polyangium)和堆囊菌属(Sorangium).对获得纯化的菌株进行了抗菌抗肿瘤活性测定,结果显示有46.3％的菌株具有抗菌作用,有66.7％的菌株具有抗肿瘤作用,表明粘细菌是抗菌抗肿瘤活性物质的重要来源.     

高酸苹果多酚鉴定及抗氧化、抗溶血活性研究

对新疆产高酸苹果—"洪勋1号(红肉)"进行系统研究,发现其可滴定酸度为1.31%,总酚和花青素含量依次为果皮果渣全果(总酚含量为(2026.88±28.30)mg/kg;花青素含量为(244.92±13.88)mg/kg)果肉.采用高效液相色谱法对高酸苹果多酚进行分离鉴定,共鉴定出10种多酚类化合物,包括绿原酸、根皮苷、表儿茶素、阿魏酸、杨梅酮、儿茶素、香草酸、p-香豆酸、芦丁和咖啡酸,全果中以绿原酸(391.19±18.37)mg/kg)、表儿茶素(698.82±17.21)mg/kg)和儿茶素(570.30±9.21)mg/kg)为主.采用DPPH自由基清除法、氧自由基吸收能力法、2,2-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(AAPH)损伤人血红细胞氧化模型评价苹果各部位的抗氧化活性与抗溶血活性,结果表明:高酸苹果的皮、肉、渣、全果均具有较强的抗氧化活性,抗溶血能力依次为果皮果渣全果果肉.研究表明,高酸苹果值得深度开发加工为高营养价值的产品.     

大豆凝集素的分离纯化及活性鉴定

以D-半乳糖胺为配基、 FF-sepharose 4B为固定相, 制备大豆凝集素亲和层析填料. 分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白, 测定其纯度、 免疫原性和凝集活性, 并与美国Sigma公司的标准品比较. 结果表明： 每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10 mg大豆凝集素; 纯化获得的大豆凝集素分子量为30 000; SDS-PAGE测定纯度大于98%; Western blot结果为阳性; 1 mg/mL SBA血集效价为1/2^10; 其纯度、 免疫原性和凝集活性等指标与大豆凝集素标准品相同, 与理论值相符.     

柠条花总黄酮的提取、纯化鉴定及体外抗氧化活性研究

以柠条花为原料,采用超声微波协同萃取法提取柠条花总黄酮,得率为5.80%;AB-8大孔树脂纯化柠条花总黄酮效率最高,纯化后柠条花总黄酮纯度达到77.09%。利用高效液相色谱-质谱联用技术在纯化柠条花总黄酮中鉴定出18种化合物,包括3种黄酮醇苷元、1种二氢黄酮苷元、3种黄酮苷元、1种花色素类物质以及10种其他类物质。柠条花总黄酮对清除DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC₅₀)分别为5μg/mL,8μg/mL,370μg/mL,柠条花总黄酮浓度为40μg/mL时,DPPH自由基清除率、ABTS清除率和超氧阴离子自由基清除率分别为93.07%,99.05%和10.13%。柠条花总黄酮体外呈现出较强还原力,其体外抗氧化活性与抗坏血酸相近。     

苏都黄连内生放线菌的分离、鉴定及抗菌活性研究

对分离自内蒙古呼伦贝尔的苏都黄连根部的内生放线菌进行抗真菌活性测试,并对农作物致病真菌具有拮抗作用的内生放线菌进行分类学鉴定.研究结果表明,苏都黄连根部分离得到的10株内生放线菌中,菌株LJ-1发酵液对9种农作物病原菌具有较好的拮抗作用,抗真菌谱较广,其中对大豆菌核病菌和辣椒疫病菌具有显著的拮抗作用,抑菌圈直径分别为22.10mm和30.90mm,具有开发为新型生物农药的潜力.经形态特征、培养特征、生理生化特征和分子分类学分析鉴定,菌株LJ-1与Streptomyces tauricus JCM 4837T在同一分支上,相似性为99.73%,最终鉴定为Streptomyces tauricus.