四种邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性方法的比较

邻苯三酚自氧化法(420nm法)与邻苯三酚/DTT终止法测定SOD酶活力,结果基本一致,其转换系数(CC)为1.03;改进的邻苯三酚自氧化法(325nm法)、微量邻苯三酚/Vc终止法测定SOD酶活力与420nm法差别较大,其转换系数分别为2.51、5.51.在测定SOD酶活力时,可根据不同的测定方法采用转换系数进行校正;实验表明:终止剂维生素C(Vc)和二硫苏糖醇(DTT)对SOD酶活力的测定无影响;325nm法与Vc法灵敏度较高,可用于SOD活力较低的样品.     

邻苯三酚自氧化法在SOD活性测定中的应用

为了验证邻苯三酚自氧化法的准确性和实用性,对邻苯三酚在Tris-HCl和磷酸盐2种不同反应体系(缓冲液)中的自氧化产物进行UV-Vis吸收光谱扫描,确定其最适吸收峰;同时研究了tcv Cu,ZnSOD(简称tcvSOD)和Bovine Cu,Zn-SOD(简称Bovine SOD)分别在2种缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制模式.波长扫描显示,终浓度为0.225mmol/L的邻苯三酚在50mmol/L Tris-HCl pH 8.2缓冲液中于320nm处30s出现明显吸收峰,30min吸收峰达到最高值;30min后440nm附近出现吸收峰;A320处的自氧化速率为0.139/min.同样浓度邻苯三酚在0.2 mol/L pH8.0磷酸缓冲液中除了A320的自氧化速率稍高(A3200.152/min)外,其他性质与50mmol/L Tris-HCl相同.tcvSOD和Bovine SOD在Tris-HCl缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制作用较磷酸盐缓冲液为强.研究结果确认320nm可作为检测邻苯三酚自氧化、SOD对其产生抑制及SOD活性间接测定的特定波长.     

木瓜SOD的提取及其活性测定方法的优化

目的 建立能准确测定木瓜超氧化物岐化酶(SOD)活性的测定方法。方法 采用单因素试验分析法,通过探究邻苯三酚自氧化反应体系的最大吸收波长、测定时间段、缓冲液pH值、邻苯三酚浓度和反应温度对自氧化速率的影响,建立了测定木瓜SOD活性的邻苯三酚自氧化法最佳应用体系;通过建立的木瓜SOD活性检测方法优化木瓜SOD提取条件。结果 邻苯三酚自氧化法最佳测定条件为:检测波长319nm,测定时间范围3.5min,缓冲液pH8.20,反应温度25℃,邻苯三酚浓度4.5mmol/L。木瓜SOD最佳提取工艺为:pH6.8的磷酸盐缓冲液、超声功率600W、超声时间20min浸提木瓜SOD,丙酮分级沉淀法纯化木瓜中的SOD,最终所得SOD用邻苯三酚自氧化法测定活性为529.72U/mg。结论 建立了能准确测定木瓜SOD活性的检测方法,并筛选得到木瓜最佳SOD提取条件。     

应用极谱氧电极检测SOD活性研究

本文建立 SOD 活性测定的极谱氧电极法,同时比较了邻苯三酚和肾上腺素自氧化系统的工作条件和优缺点,结果提示,肾上腺素自氧化系统的最适条件为:30℃,0.1mol/LpH10.3碳酸缓冲液4.0ml,0.05mol/L 肾上腺素30μl,SOD 在0-0.8μg 间与产氧量成线性关系;邻苯三酚系统的工作条件与文献报道一致.实验发现肾上腺素系统灵敏度较高,但线性范围小,重复性与邻苯三酚系统一致.本文还应用极谱氧电极法筛选抗氧化天然活性物质,在若干动物、植物及酵母中进行了SOD 活性测定,证明该法简便、快速、灵敏。     

芥篮叶超氧化物歧化酶的分离提纯

本文建立硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100层析,DEAE 纤维素(DE-52)拄层析方法从芥篮(B.alboglabra Baileg)叶肉中提纯超氧化物歧化酶,纯化倍数45.2,比活力97.3u/mg-pr(肾上腺素测定).南 DEAE-DE52层折获得的 SOD 活性部分,按 Weber与 Osborn 法作 SDS-PAGE,呈现单一斑带,分子量为13,000.此酶对热稳定性不高,70℃保温90min,活力全部丧失.纯酶液的最大吸收波长为204nm,芥篮叶中有四种 SOD同工酶.     

叶绿体内多光子荧光谱及激子湮灭

实验表明,用波长为1.06μm的红外激光辐射植物叶片或叶色素提取液,在可见光区(480—520nm波段)有荧光发射.荧光发射光子能量比激发光子能量大.经分析判断,多光子荧光谱出自类胡萝卜素,这种现象为激发态离子相互作用引起的再吸收效应。     

Co60γ射线即刻照射后大鼠外周血超氧化物岐化酶的变化

γ—射线能激发体内自由基反应,产生较多的超氧自由基,超氧化物歧化酶SOD能催化超氧自由基发生歧化反应,减少超氧自由基对人体的危害作用。本文采用肾上腺素自氧化法测定即刻照射组及对照组Wistar大鼠外周血SOD的活性。结果表明:用Co6Oγ射线600拉德照射后大鼠外周血SOD活性明显高于对照组。     

邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗?

用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxide dismutase，SOD）及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物（the models of SOD，MSOD）活性。测试结果表明：Cu-ZnSOD和含Cu（Ⅱ）、Fe(Ⅲ)、Mn(Ⅱ、Ⅲ的SOD模型化合物随浓度升高，有的对邻苯三酚氧化表现为负抑制（即促进邻苯三酚氧化）；另一部分化合物在较低浓度表现为抑制，较高浓度表现为负抑制的交替变化；或抑制率的无规则变化。本文对出现负抑制的内在根源进行了探讨，鉴于邻苯三酚自氧化的复杂反应机理；含Cu(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Mn（Ⅱ、Ⅲ）SOD模型化合物的多酚氧化酶活性和Fenton反应催化活性，及MSOD中金属离子的Lewis酸性，不宜采用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。     

新显色剂1-(4-硝基苯基)-3-(4-羟基-6甲基-嘧啶)-三氮烯的合成及其与汞的显色反应

报道了1-(4-硝基苯基)-3-(4-羟基-6甲基-嘧啶)-三氮烯(NPHMPDT)的合成及其与汞的显色反应.在OP存在下,pH10.5的Na2B4O7-NaOH缓冲溶液中,该试剂能与汞发生显色反应,汞与NPHMPDT形成摩尔比为1:5型的淡黄色配合物,在440nm处有一最大正吸收峰,在540nm处有一最大负吸收.以450nm为参比波长,530nm为测量波长进行双波长测定,表观摩尔吸光系数为1.46×105L·mol-1·cm-1,汞的浓度在0～480μg/L范围内符合比尔定律.用拟定方法测定废水中的微量汞,结果满意.     

荧光动力学分析新方法测定超氧自由基抑制剂的抗氧活性

研究了荧光动力学分析法检测超氧自由基抑制剂抗氧活性的新方法．在Tris-HCI缓冲溶液中(pH=8．20),邻苯三酚自氧化产生超氧自由基和有荧光效率的自氧化产物．在433．0nm激发波长和494．5nm发射波长条件下,该自氧化产物时间扫描曲线的斜率与超氧自由基抑制剂的浓度有相关性．利用抗坏血酸、槲皮素、芦丁3种常见抗氧化剂对新方法进行了验证并将新方法与单扫描极谱法(SSP)、紫外分光光度法(UV)作了比较．结果表明新方法测活灵敏度优于UV法,而与SSP法相当．但比SSP法操作简单、准确度好．     

水溶性苝酰亚胺功能荧光染料的合成与性质

通过在苝酰亚胺染料的亚胺位置引入寡聚乙二醇亲水功能基团,同时在苝酰亚胺染料的海湾位置引入硫醚取代基团,合成了水溶性苝酰亚胺功能荧光染料(PSPBI),其化学结构通过核磁共振波谱仪(NMR)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得以证实.溶解性实验表明PSPBI在水中的溶解度大于10 mg/mL,说明其具有很好的水溶性.紫外吸收与荧光发射测试表明:PSPBI在480 nm和540 nm有2个吸收峰;荧光发射峰在620 nm.过氧化氢荧光滴定实验结果表明:PSPBI能够实现对过氧化氢的荧光增强响应,增强倍率为50倍;同时,其吸收光谱和荧光发射光谱都发生了蓝移,最大吸收峰蓝移了29 nm,最大发射峰蓝移了15 nm.     

络黑T作显色剂吸光光度法测肝铁片中铁的含量

在 p H为 1 0的氨 -氯化铵缓冲液中 ,Fe3 + 与络黑 T( EBT)形成暗红色的配合物 ,其最大吸收波长在 4 80 nm处 ,吸收系数为 2 3 0 0 0 ,线性范围为 ( 0～ 1 .2 )μg/ml,方法可用于肝铁片中铁含量的测定 ,与结果与药典法相吻合。     

IO3--I3--吖啶红体系的共振散射光谱研究及应用

在过量的I-存在的稀盐酸介质中,当有IO3-存在时,IO3-与过量的I-反应生成I3-,I3-与吖啶红、吖啶橙染料均可形成离子缔合微粒。吖啶红、吖啶橙分别在540、480 nm有较强吸收峰,在550、520 nm有较强荧光峰,吖啶红体系在605 nm处产生1个较强的共振散射(RS)峰,IO3-浓度在1.0×10-7~4.0×10-6mol/L与605nm波长处的共振散射光强度成线性关系。吖啶橙体系在560 nm处产生1个较强的共振散射(RS)峰,碘酸根浓度在2.0×10-7~1.2×10-5mol/L与560 nm波长处的共振散射光强度成线性关系。据此建立测定食盐中碘酸根的一种共振散射光谱法。采用此体系测定食盐中碘酸根,结果满意。     

一种色氨酸修饰的苯并呋咱类碱性荧光探针的合成与性能研究

以色氨酸和4 氯 7 硝基苯并呋咱为原料,设计合成了一种碱性pH荧光探针,通过核磁、质谱表征了它的结构. 光谱测试结果表明,当探针水溶液的pH值由7.94上升到12.24时,其紫外吸收光谱发生明显变化,480 nm处的吸收峰明显下降,同时在390 nm处出现一个新的吸收峰,探针水溶液的颜色由橙红色变为黄色;并且其荧光发射峰的强度逐渐下降,产生明显的猝灭现象. 因此,该探针对碱性条件具有明显的光学响应现象.     

铑-钨酸盐-番红花T缔合显色反应的研究及应用

在聚乙烯醇(PVA)存在下,铑(Ⅲ)与钨酸盐及番红花T(ST)形成的离子缔合物在480nm处产生最大吸收.据此建立了测定铑(Ⅲ)的光度分析方法,其表观摩尔吸光系数ε达108L·mol-1·cm-1数量级.方法的检测范围为0.15～1.5 ng/25ml.大量存在的常见离子对Rh(Ⅲ)的测定不干扰.用此方法测定了催化剂及工业产品中铑的含量,结果与标准方法(SnCl2法)一致.     

卡拉胶的荧光光谱特性及其质量浓度预测

针对卡拉胶在食品加工中作为增稠剂、乳化剂和稳定剂使用,而大量摄入会对身体造成严重损害,文中对卡拉胶的三维荧光光谱进行了系统研究。结果表明,其在390nm处存在一个激发峰,分别在485nm、620nm、660nm处存在荧光峰,其中660nm峰较强、485nm峰较宽且红移,提出瑞利散射和水的拉曼散射的影响导致485nm谱峰的红移。进而发现卡拉胶溶液荧光光谱强度随质量浓度的增加而增强,并通过主成分分析．BP神经网络训练,实现了对卡拉胶质量浓度的预测,准确率达到90％以上。当质量浓度高于120μg／mL时,准确率达到98％以上,表明该技术可快速测定溶液中卡拉胶的含量。     

化学共沉淀法制备Ca_2MgSi_2O_7：Eu~（2＋）荧光粉

以Ca（NO3）2.4H2O、Mg（NO3）2.6H2O、Na2SiO3.9H2O、Eu2O3为原料,采用化学共沉淀法制备了Ca2MgSi2O7：Eu2＋绿色荧光粉.其激发光谱分布在300～480 nm波长范围,谱峰位于310～385 nm,可以被InGaN管芯产生的360～480 nm辐射有效激发;在430 nm激发...     

5—Br—PADAP—H2O2一阶导数光度法测定钢铁和铝合金中的钒

研究了5-Br-PADAP-H_2O_2一阶导数吸光光度法测定钒的适宜条件和有关参数.显色反应的适宜pH值为0.5～2.0,求导的参数是狭缝宽度2nm,微分宽度△λ=10nm,扫描速度为120nm/min,扫描范围550～650nm,确定一阶导数光谱在583nm处有一波峰,在615nm有一波谷,利用峰-峰法测定钒.本法不仅有高的灵敏度,而且有很强的抗干扰能力,选择性更高.用于钢铁和铝合金中微量钒的测定,得到满意的结果.     

甘谷辣椒红色素稳定性研究

通过对甘谷辣椒红色素进行提取,确定了其中的4种成分,研究了色素提取的最佳条件及色素的稳定性.结果表明:该色素含有辣椒红色素、辣椒玉红素、β-胡萝卜素、辣椒碱、二氢辣椒碱5种主要成分.色素在480 nm有最大吸收峰,该色素水溶性较差,油溶性较好,在pH值4~10时色调不变,具有良好的热稳定性.温度为90℃时,色素稳定.良好的耐酸碱性,耐光性较差,连续光照48 h,色素残存率为45%,1 mg/L Na+,Ca2+、Al3+溶液对色素最大吸收峰无明显影响,1 mg/L Cu2+,Fe2+溶液使色素最大吸收峰偏移.     

Fractal classification and natural classification of coal pore structure based on migration of coal bed methane

According to the data of 146 coal samples measured by mercury penetration, coal pores are classified into two levels of <65 nm diffusion pore and >65 nm seeping pore by fractal method based on the characteristics of diffusion, seepage of coal bed methane(CBM) and on the research results of specific pore volume and pore structure. The diffusion pores are further divided into three categories: <8 nm micropore, 8-20 nm transitional pore, and 20-65 nm mini-pore based on the relationship between increment of specific surface area and diameter of pores, while seepage pores are further divided into three categories: 65-325 nm mesopore, 325-1000 nm transitional pore, and >1000 nm macropore based on the abrupt change in the increment of specific pore volume.