重组草酸青霉生淀粉糖化酶的酶学特性鉴定

【目的】了解在毕赤酵母中表达的来源于草酸青霉(Penicillium oxalicum)GXU20的重组生淀粉糖化酶的酶学特性。【方法】用3,5-二硝基水杨酸法测定pH值、温度、金属离子和化学试剂对纯化的重组生淀粉糖化酶的活力的影响,同时测定酶的底物特异性、酶对生淀粉的吸附能力以及酶对不同生淀粉的水解效率等,用高效液相色谱法对该酶水解生木薯淀粉的产物进行分析鉴定,用扫描电子显微镜观察重组酶对不同生淀粉颗粒的水解方式。【结果】重组生淀粉糖化酶rPoGA15A的最适pH值为4.5,最适温度为65℃,在pH值为2.0~10.0时,重组酶具有较好的pH耐受性,温度小于50℃时,酶的稳定性好。除Ag~+、Cu~(2+)和SDS之外,其他大部分金属离子和化学试剂对重组酶的酶活力影响不大。重组生淀粉糖化酶对大米和玉米生淀粉的活性较高,对木薯和马铃薯生淀粉的活性次之,重组生淀粉糖化酶rPoGA15A对不同生淀粉的吸附能力与其对相应不同生淀粉的水解活性大小呈正相关。扫描电子显微镜观察表明重组生淀粉糖化酶对不同生淀粉颗粒的降解作用明显,水解方式各有特点。高效液相色谱分析表明该重组生淀粉糖化酶水解生木薯淀粉的产物仅有葡萄糖。重组生淀粉糖化酶rPoGA15A在40℃下对大米和玉米生淀粉水解72h后水解率分别达到86.5%和71.9%。【结论】重组生淀粉糖化酶具有广泛的pH耐受性,对生淀粉具有高水解活性,在生淀粉的水解和生料同步糖化发酵生产酒精中有一定的应用潜力。     

汾酒大曲根霉糖化酶的研究——Ⅰ、菌种选育与产酶条件的初探

糖化酶[葡萄糖淀粉酶(Glucoamylase)或淀粉葡萄糖苷酶(Amyloglucosidase)EC 3.2.1.3]可水解多糖类(淀粉、糖元和其他低聚糖类)中的α—1.4—葡萄糖苷键,同时亦可作用于α—1.6—葡萄糖苷键。有关曲霉(Aspergillus sp.)、红曲霉(Monascus sp.)和根霉(Rhizopus sp.)产生的糖化酶用于葡萄糖生产和酒精发酵已有详尽的评述。有关根霉糖化酶的研究报导也陆续出现,但目前国内则偏     

“爆破”法增产酒精新技术

众所周知,生产酒精的传统工艺是先将富含淀粉的植物原料加热烧熟(糊化);然后加糖化菌或糖化酶使淀粉分子糖化、液化成葡萄糖;再加酵母菌进行发酵产出酒精,最后蒸馏成成品。此法的最大缺点是原料来路狭窄,发酵周期长,耗能大、成本高;且有一部分糖源未充分利用。为克服此弊端,前不久,美国德克萨斯州立大学的农业工程学教授布鲁斯·戴尔和一家制酒公司合作共同研制出一种奇特的氨——纤维“爆破”法(AFEX)大量生产优质酒精,其工艺流程大致如下: 1.原料粉碎:为增加得率,一定得先将富含淀粉或纤维素的大米、玉米、甘薯、棉花、黄麻等植物原料置于粉碎机内予以充分粉碎,以增大后处理的表面积。     

利用枯草芽孢杆菌发酵生产糖化酶的上游工艺研究

糖化酶-α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace),又称葡萄糖淀粉酶[Glucoamylase,(EC.3.2.1.3.)],此酶作用于淀粉分子的非还原性末端,以葡萄糖为单位,依次作用于淀粉分子中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖。此酶作用于支链淀粉后的产物有葡萄糖和带有α-1,6-糖苷键的寡糖;作用于直链淀粉后的产物几乎全部是葡萄糖。本产品广泛用于生产白酒、黄酒、酒精、啤酒;用于以葡萄糖作发酵培养基的各种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的发酵;本品还大量用于生产各种规格的葡萄糖。总之,凡对淀粉、糊精必需进行酶水解的工业上,都可适用。糖化酶产生菌主要是黑曲霉(左美曲霉、泡盛曲霉)、根霉(雪白根酶、德氏根霉)、拟内孢霉、红曲霉等经深层发酵提炼而成,本文介绍的是利用枯草芽孢菌杆发酵来生产糖化酶的基本上游工艺过程。     

比色法快速测定糖化酶活力新方法

本文介绍比色法测定糖化酶活力新方法。糖化酶水解淀粉产生葡萄糖，生成的葡萄糖与３，５—二硝基水杨酸钠盐（ＤＮＳ）作用，发生颜色改变，颜色变化的多少与葡萄糖含量成正比。因此糖化酶水解液与ＤＮＳ反应后，在５５０ｎｍ处测定吸光度，由吸光度看出葡萄糖含量，并计算出糖化酶的活力。比色法简单、快速，准确度和标准法相当，是仪器分析测定糖化酶活力的理想方法。     

比色法快速测定糖化酶活力的新方法

本文介绍了比色法测定糖化酶活力新方法。糖化酶水解淀粉产生葡萄糖，生成的葡萄８糖与３，５－二硝基水杨酸钠盐（ＤＮＳ）作用，发生颜色改变，颜色变化的多少与葡萄糖含量成正比。因此糖化酶水解液与ＤＮＳ反应后，在５５０ｎｍ处测定吸光度，由吸光度看出葡萄糖含量，并计算出糖化酶的活力。比色法简单、快速、准确度和标准法相当，是仪器分析测定糖化酶活力的理想方法。     

响应面法优化木薯生料发酵酒精的工艺条件

以生木薯为原料,通过单因素实验和响应面实验,对37℃下酒精发酵工艺进行优化.结果表明:在生淀粉糖化酶用量为173.00U·g-1、pH值为4.60和发酵时间为68.90 h的最佳工艺条件下,酒精体积分数可达到9.95％,与常温发酵相比,酒精体积分数降低1％,但发酵时间缩短39h;影响酒精发酵的3大主要因素为生淀粉糖化酶...     

谷物燃烧热的测定研究

实验采用氧弹式量热计测定了4种谷物的燃烧热值.用苯甲酸作为标准物质;在室温25℃、氧气压力2.4 MPa左右、样品量1 g左右的条件下,进行燃烧实验.用雷诺图校正法对实验数据进行处理,得出谷物燃烧前后系统温度的变化值,进而计算谷物的燃烧热.利用量热法对谷物的燃烧热进行测定,原理可靠,仪器简便,操作简单.实验结果表明大米燃烧放热最少,小麦燃烧放热最多.     

酶制剂系列新产品

酶制剂系列产品“高转化率液体型糖化酶,耐高温α-淀粉酶,中温α-淀粉酶”,采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和高活率黑曲霉变异株菌经深层发酵培养、提取等工序精制而成。该产品质量高,属食品级。主要发酵指标分为:糖化酶30000u/ml 以上;中温α-淀粉酶500u/ml 以上;高温α-淀粉酶4500u/ml 以上。广泛适用于淀粉加工、制糖(葡萄糖、饴糖、糊精、果葡糖、低聚糖)、酒精、啤酒、味精、食品酿造、有机酸、制药、纺织印染、造纸和发酵等工业。     

应用高效液相色谱分析谷物中的维生素B_6

用偏磷酸溶液抽提和高效液相色谱定量分析的方法,测定了小麦、大麦、玉米、小米和高粱等谷物中各种维生素B_6的含量.研究结果表明,谷物中所含维生素B_6的主要形式是游离吡哆醇和吡哆醇葡萄糖甙,各种谷物的维生素B_6含量与其品种和产地等因素有关.     

红曲霉固态发酵产糖化酶及酸性蛋白酶条件的优化

从8株红曲霉中筛选出红曲霉MQ7作为高产糖化酶和酸性蛋白酶的供试菌株,采用固态发酵方法测定在不同发酵温度、底物料液比、大米和麸皮比例条件下的产酶情况.利用正交实验优化固态发酵产酶过程,确定该菌株产酶最佳发酵条件为:发酵温度30,℃,底物料液比(g∶mL)20∶25,大米麸皮比例(g∶g)17∶3.在此条件下,糖化酶活力达1,641.69,U/g,酸性蛋白酶活力达151.09,U/g.同时研究了NaCl含量对红曲霉酶活力的抑制作用,当NaCl质量分数达到18.92%时,红曲霉MQ7产糖化酶活力下降64.8%,酸性蛋白酶活力下降85.6%.     

SBA—50型葡萄糖生物传感分析仪测定麦芽糖的研究

本文研究了用ＳＢＡ－５０型葡萄糖生物传感分析仪测定麦芽糖的方法。麦芽糖的测定范围为０￣２００ｍｇ／ｄＬ,测定回收率平均为９９．６９％,将麦芽糖溶液中加一定量的葡萄糖糖化酶,６０℃水解５ｍｉｎ,取水解液２５μＬ,注入ＳＢＡ－５０型葡萄糖生物传感分析仅中,２０ｓ即可得到结果。该方法简便,快速,准确度高。     

浓醪体系中共固定糖化酶与酵母木薯酒精的制取

采用海藻酸铝凝胶为载体,将酵母细胞和糖化酶进行共固定化,以木薯淀粉为原料,在浓醪体系下,进行同步糖化发酵制取酒精.对影响同步糖化发酵的主要因素:凝胶填充率、糖化酶量、湿酵母量、发酵温度进行了正交试验研究,获得的优化工艺条件为:凝胶填充率50%、糖化酶300 U/g、湿酵母2.5 g、发酵温度37℃、pH值4.0～4.5、料液比1:2.0、硫酸铵0.50 g/L、硫酸镁0.20 g/L、磷酸二氢钾0.10 g/L,浓醪液酒精含量达到13.4%,淀粉利用率达到90.2%.     

西洋烈酒

在西方,经过蒸馏提纯的高浓度酒精饮料也被称为烈酒(spirit),英美出产的威士忌和法国产的白兰地就是烈酒中的翘楚。世界各地的烈酒威士忌(爱尔兰人和美国人称之为whiskey,而在加拿大和苏格兰一般拼写为whisky)是一种用谷物酿造、并经过木桶陈酿的烈酒。在西方,经过蒸馏工艺的烈性酒还有白兰地(用白葡萄酒蒸馏),朗姆酒(发酵甘蔗汁或糖浆蒸馏),伏特加(谷物蒸馏,但非陈年酒)以及杜松子酒(同样是未经陈酿的蒸馏谷物酒,用杜松     

酿造用黑曲霉及诱变和野生根霉菌种保藏方法的探索

本文对酿造工业使用的产葡萄糖淀粉酶的几种野生和诱变根霉及黑曲霉菌种的保藏方法进行了探讨。研究表明:经7年保存的麦麸曲室温和低温(4℃)、马铃薯葡萄糖琼脂斜面石腊油封存低温保藏方法保藏菌种全部存活,室温保藏菌种糖化酶活力显著降低,而低温保藏菌种糖化酶活力虽也降低,但仍不失为工业上菌种保藏的一种有效方法。     

强制循环发酵液的酒精发酵研究

酒精发酵是一个伴有物质传递的生化反应过程。本文对强制循环发酵液的酒精发酵过程进行了研究。结果表明：采用强制循环发酵液的方法可以促进传质过程，利于糖化酶对作用底物的水解和改善酵母细胞生长状况，为高浓度糖化液发酵生产酒精探索了一条可行的路径，实现了提高发酵效率的目的。     

糖化酶中葡萄糖苷转移酶去除方法

为了去除工业糖化酶粉剂中的葡萄糖苷转移酶,提高双酶法生产葡萄糖的纯度和产率,本文分别研究了调节pH法、添加表面活性剂法、氯仿沉淀法去除葡萄糖苷转移酶.结果表明,调节pH值法和添加表面活性剂法葡萄糖苷转移酶去除可达60%以上,且糖化酶酶活损失小于25%.     

葡萄糖酶电极的制备和测试

以自制的铂电极为基础,制备了葡萄糖酶电极,并测试了淀粉-糖化酶水解液中的葡萄糖,测定的范围为2×10~(-6)～5×10~(-3)mol/L。     

青霉素在酒精发酵中应用研究

在酒精发酵过程中,发酵醒中往往因操作、灭菌工作、设备清洗等操作不当,而产生大量细菌（主要为乳酸菌、醋酸菌等）的生长繁殖,阻碍了发酵醪的正常的酒精发酵。在淀粉质原料或其他原料生产酒精时,要控制发酵醪的ｐＨ值,既要适合酵母菌的生长繁殖和代谢,又要适宜各种糖化酶的作用。传统工艺中,往往采用ＨＺＳＯ４来调节,以便降低发酵醪液中的ｐＨ值,防止杂菌的污染。本文通过对青霉素的应用研究试验,取得良好的防止杂菌污染,是一种可行的途径。１材料与方法１．１试验材料青霉素：４０万单位,华北制药厂生产;糖化酶：４～５万单…     

无粮甜酒曲节约制曲用粮91.66％

无粮甜酒曲,也称新甜酒药,是～种酿制甜酒酿的发酵剂。同时也可应用于酱、酒以及腐乳等发酵工业。用无粮甜酒曲酿制的甜酒酿,除了具有35%葡萄糖外,还含有少量的蛋白质及生物素等。由于含有糖化酶及酒化酶,所以具有