楸树体细胞胚胎发生的研究

以楸树近成熟种子培养无菌苗,以无菌苗子叶和下胚轴为外植体进行体细胞胚胎发生研究,观察了体细胞胚胎的发育过程,分析了不同生长调节物质对楸树体胚发生的影响。结果表明：各培养基均能诱导出愈伤组织;1/2MS+0.01 mg/L NAA+1.00 mg/L 6-BA可调整愈伤至胚性愈伤,是体细胞胚胎诱导频率最高的培养基;带少量愈伤的体胚可在1/2MS0和1/2MS+1.00 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA的培养基上增殖,且增殖系数较大。     

前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育条件研究

本文通过组织培养方法,探讨生长素和细胞分裂素在紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育过程中的作用。结果表明0.5mg/LNAA是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度,添加一定比例的6-BA可有效促进体细胞胚的发生;在附加激素浓度分别低于0.1mg/LNAA和0.5mg/L6-BA的MS培养基上,体细胞胚能发育成完整的植株。因此,一定浓度的生长素是诱导紫叶酢浆草胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起增效作用。     

鼓槌石斛未成熟种子无菌萌发与小苗组培快繁的研究

本文报道鼓槌石斛未成熟种子在离体培养下发育成苗及离体快繁的研究结果．在附加1．0mg／LBA和0．5mg／LNAA的MS培养基上,鼓槌石斛未成熟种子接种后最初一个星期内,发育较慢,以后明显较快,至接种后2w时,种胚的长度或直径增加到接种前的1．5倍～2．0倍;至接种后3w时也有10％～15％的种胚突破种皮,形成裸露的种胚（原球茎体）;至接种后第4w时,可以观察到裸露的种胚开始萌芽,首先出现盾片子叶,以后第1,第2和第3片幼叶逐渐依次形成．从接种到第1片幼叶（真叶）形成时,约需80d．在初代培养基上未观察到根的形成,这可能与初代培养基中追加有1．0mg/LBA有关．由于同一蒴果中的种子是发育不同步的,故种胚、原球茎体以及幼苗的发育也是不同步的．培养物（无根幼苗及原球茎体）转接到成分与初代培养基完全相同的新鲜培养基上进行继代培养时,原球茎体及无根幼苗的基部会增殖形成新生的原球茎体,继而发育成幼苗;少部分原球茎体在发育成苗之前脱分化形成颗粒状愈伤组织,这种愈伤组织可以增殖形成新的愈伤组织;或分化出芽点,继而发育成幼苗;或分化出原球茎体,继而再发育成幼苗．生根壮苗培养过程中试验了5种基本培养基,其适应性按顺序依次为H〉1／3MS〉1／2MS〉SJ-1〉MS．     

蒙古黄芪的组织培养研究

对蒙古黄芪无菌苗的不同外植体(叶片、子叶、下胚轴)进行组织培养研究.结果表明:该三种外植体分别在MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L、LS BA2.0mg/L NAA0.1mg/L、MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L 培养基上的愈伤组织诱导率很高;在这三种外植体中,子叶和下胚轴所诱导的愈伤组织在继代培养基上能分化出芽;试管苗在1/2MS NAA5.0mg/L培养基上生根效果好.     

石防风胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的发生

石防风幼苗的根在含0.1-50mg/L 2,4-D的 MS 培养基中能诱导产生愈伤组织,最适浓度为0.5mg/L.愈伤组织来源于中柱内部的细胞。在0.5mg/L2,4-D 存在下,细胞分裂生长并发育至胚性细胞团或原胚,转移至无激素培养基后,愈伤组织表面及内部分化出发育阶段不同的体细胞胚,最后发育成为完整植株。在初生幼苗的胚轴上(有时在根或叶)常有次级胚的发生,它们能继续长成次级苗,并在苗上再次长胚,如此不断,直至多次。由此可见石防风体细胞胚发生的能力,是十分强大的。     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

番木瓜胚珠高频率体胚发生和植株再生

将番木瓜(Carica papaya L.)受精胚珠接种于MS IAA1mg/L BA2mg/L GA_3 2mg/L S(蔗糖)3％和1/2MS 谷胺酰胺400Mg/L CW(椰子汁)20％ S6％的培养基中,诱导愈伤组织,愈伤组织继代培养于MS CW 2％ S6％ 2.4-D 2mg/L的培养基上。进行了几种激素配比和基本培养基(MS和改良MS)对诱导胚性愈伤组织、体胚发生和植物再生培养基的比较实验。结果表明:在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L BA 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％培养基中获得理想胚性愈伤组织和体胚,在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L KT 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％产生正常具三裂片和根系的小植株。进行番木瓜体胚包埋、制成人工种子,实验获得小苗,并移栽成功。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

秦艽发根系体细胞胚的诱导和植株再生

在含0．1—10．0mg／L2,4-D的MS培养基上,秦艽发状根切段在30d后全部转化成淡黄色致密的胚性愈伤组织．转入不含激素的MS培养基上继续培养30d后,该愈伤组织转变成由许多淡黄色致密颗粒（球形的体细胞胚）组成的疏松愈伤组织团．把愈伤组织团切成小块,再次转到新鲜的MS无激素固体培养基上培养30d后,表面有许多独立的和丛生的芽出现,毹剖镜下观察发现,该愈伤组织团内包含许多球形、心形、鱼雷形、子叶形胚．将所得到的再生小植株移栽到土／蛭石混合物（1：1）中后,大多数再生苗可以成活．与野生苗相比,再生苗的叶子看起来相对加宽,叶面积增大,叶色较深．胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为含1．0mg／L2,4-D的MS培养基．     

仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的I／2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明：球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1／2MS＋6-BA0．2mg／L＋2,4-D2mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6．5g／L＋肌醇100mg／L＋酪蛋白100mg／L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1／2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2—3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考．     

葡萄胚性愈伤组织无性系的建立、保持及其植株再生的研究

以葡萄“胜利”品种的花药、花丝为外植体，采用附加２ｍｇ／１６－ＢＡ和０．５ｍｇ／１２，４－Ｄ的改良Ｂ５培养基诱导葡萄胚性愈伤组织，诱导频率约为２０％．具有胚性的愈伤组织，经过五年以上的继代培养，至今无性系仍保持着很强的分化和再生植株的能力．激素成份对胚性愈伤组织的建立、长期保持、胚状体发生及产生丛生芽均有明显影响．利用一种简易高效的试管苗移栽技术，使葡萄试管苗的移栽成活率高达９５％以上．     

龙眼不同愈伤组织培养方法的探讨及细胞观察

试验中以龙眼"红核子"品种胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究不同条件对龙眼胚性愈伤组织生长的影响以及龙眼非胚性愈伤组织培养体系的建立,并通过显微镜观察比较龙眼胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的形态学差异。试验结果表明,高9cm、直径6cm、瓶口内径5cm的玻璃培养瓶在接种量约为30mg/瓶时龙眼胚性愈伤组织生长最好;龙眼非胚性愈伤组织以MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+活性炭0.5 mg/L培养效果最好;细胞观察表明,龙眼胚性愈伤组织较非胚性愈伤组织细胞更规则,有更多的内含物。     

珍稀濒危植物四合木体细胞胚胎发生的组织学观察

通过对四合木愈伤组织诱导和体细胞胚胎形成过程中组织学观察的研究,得出以下结果：１）茎尖、茎段、肉质叶和花蕾四种外植体中花蕾的愈伤组织诱导率最高,其中花蕾的肉质花托是四合木体细胞胚胎发生的良好外植体来源;２）基本２基为改良Ｍｓ固体培养基;ａ．附加０．１ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ和０．５ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ可诱导产生大量的淡黄色疏松状愈伤组织;ｂ．愈伤组织在去除外源植物生长调节物质的条件下,经一年左右继代培养     

手性固定相合成中原料YWG-NH_2与Spher-NH_2性能的比较

利用液相色谱手性固定相进行手性分离的研究越来越多，因此手性固定相的合成也就成了该项研究中必不可少的关键问题．在手性固定相的合成中氨丙基硅胶作为手性固定相的键合基体，其性质的好坏直接影响手性固定相的手性分离能力．分别利用国产和进口分装的氨丙基硅胶作基体，合成结构完全相同的手性固定相，结果表明进口的氨丙基硅胶合成的手性固定相的性能优于用国产氨丙基硅胶合成的手性固定相，并论述了可能产生这种差别的原因．     

金荞麦愈伤组织诱导及其总黄酮含量测定方法的建立

金荞麦是蓼科(Polygonaceae)荞麦属(Fagopyrum Mill.)一种营养丰富并具有重要药用价值的多年生草本植物, 其块根活性提取物(其成分同悬浮培养的次生代谢产物即黄酮类化合物)是多种重要的抗癌药物和癌预防药物的主要成分之一. 利用金荞麦腋芽的叶片和茎段进行愈伤组织的诱导, 筛选出最适合愈伤组织生长的培养基为1/2MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.3mg/L(或IBA 0.3mg/L)+2,4-D 0.1mg/L. 并在借鉴其他物种利用分光光度法测定总黄酮含量的基础上,对金荞麦愈伤组织的显色时间等条件进行了优化, 得到了一种适合金荞麦愈伤组织总黄酮含量测定的方法. 该方法简单易行, 为悬浮培养和其工厂化生产黄酮类化合物时总黄酮含量的测定奠定了基础.     

沙枣微繁的初步研究

沙枣茎段在MS+NAA(0.2mg/L,单位下同)+ZEA(1)培养基上首先诱导形成愈伤组织,然后转接到MS+ZEA(0.2)+BA(2)培养基上经4次继代产生大量不定芽。沙枣的茎段也可以扦插在MS+BA(0.5)或MS+NAA(0.1)+BA(0.5)培养基上直接获得大量不定芽。以上两种途径获得的不定芽均可以在MS_0培养基上生根而培育成小苗,而通过后一种途径获得的不定芽具有很好的遗传稳定性。为进一步做遗传转化及耐盐筛选工作提供材料。     

香石竹茎段无性系的建立

以香石竹无菌茎段为外植体成功获得再生植株，并建立快速无性繁殖系，茎段愈伤组织的诱导及芽点的分化最佳培养基是1／2MS BA1 2，4mg／L-D0．4mg／L，芽增殖的最佳培养基是MS BA0．5mg/L NAA0．5mg／L，根诱导最佳培养基是1／2MS IAA0．2mg／L，最佳移栽基质是炉碳渣。