环孢霉素A微粒体抑制角膜移植排斥反应的临床观察

目的:观察结膜下注射环孢霉素A(cyclosporinA ,CsA)微粒体对人高危眼角膜移植排斥反应的抑制作用。方法:用乳化-溶剂挥发法制备环孢霉素A微粒体,观察10例角膜移植术后常规皮质激素+口服环孢霉素A治疗(对照组)和9例使用皮质激素+环孢霉素A微粒体治疗(实验组)的角膜排斥反应的发生情况,测定两组病人外周静脉血中T细胞CD2 5分子表达水平。结果:观察期对照组有2例病人发生过角膜排斥反应,环孢霉素A微粒体治疗组未发生排斥反应;术后同时期比较,实验组外周血T细胞CD2 5分子表达明显低于对照组(P <0 0 5 )。结论:结膜下注射环孢霉素A微粒体能够有效抑制角膜移植排斥反应,效果优于口服CsA。     

基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化和鉴定

牛碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＲ）ｃＤＮＡ在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，高压均质破碎菌体后，上清液以Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析、Ｃ１８反相ＨＰＬＣ分高纯化得到一分子量为２．２５×１０￣４的蛋白质，其等电点为９．３４，并能与抗牛ｂＦＧＦＭｃＡｂ反应；其氨基酸组成与ｂＦＧＦ文献值一致；活性分析结果表明此蛋白质不仅能促进ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３细胞增值，ＥＤ＿（５０）＝０．８５ｎｇ／ｍｌ，而且能促进鸡胚尿囊膜微血管增生，所得蛋白为具有生物活性的重组碱性成纤维细胞生长因子。     

FK506在同种异体兔角膜缘移植中的应用

目的：研究FK506对同种异体兔角膜缘移植术后免疫排斥反应的抑制效应。方法：建立48只新西兰白兔角膜缘于干细胞缺陷症动物模型，随机分成FK506治疗组、环孢霉素A治疗组和非治疗组，同种异体角膜缘移植术后分别给予质量分类为0．5％FK506滴眼液、1％环孢霉素A滴眼液和生理盐水点眼，用药4周。术后持续观察10周，以角膜缘植片水种、混浊程度、排斥反应发生时间、角膜新生血管和假性胬肉作为眼表评估指标。结果：观察期内，FK506组上皮排斥反应发生率、移植排斥指数均低于环孢霉素A组，差异有显著性（P＜0．05）；而两组成新生血管和假性胬肉指数方面，无显著性差异（P＞0．05）。结论：同种异体角膜缘移植术后早期应用FK506眼液点眼可以抑制排斥反应发生。     

FK506和环孢霉素A在兔角膜缘移植术后抑制免疫排斥反应的疗效比较

目的研究FK506和环孢霉素A对同种异体兔角膜缘移植术后免疫排斥反应的抑制效应。方法将30只有角膜缘干细胞缺陷症的新西兰白兔随机分成3组：FK506治疗组、环孢霉素A治疗组和对照组,同种异体角膜缘移植术后分别给予0．5％FK506滴眼液、1％环孢霉素A滴眼液和生理盐水点眼,用药5周。术后持续观察11周,以角膜缘植片水肿、混浊程度、排斥反应发生时间和角膜新生血管作为眼表评估指标。结果观察期内,FK506组在抑制新生血管指数方面低于环孢霉素A组（P〈0．05）,而两组在上皮排斥反应发生时间、移植排斥指数方面无显著性差异（P〉0．05）。结论同种异体角膜缘移植术后早期应用0．5％FK506和1％的环孢霉素A滴眼液均可有效抑制免疫排斥反应,在抑制角膜新生血管发生方面,FK506的作用强于环孢霉素A。     

阿霉素与肺癌单克隆抗体交联物的制备及其生物活性

以氧化葡聚糖法制备阿霉素（ＡＤＭ）与肺癌单克隆抗体＿３Ｄ＿３（ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３）的交联物ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３，ＡＤＭ与ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３克分子比为４６：１．经ＩＦＡ测定，交联物的抗体活性大部分保持．体外细胞毒试验显示，ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３对肺癌细胞Ｌ＿（３４２）的杀伤作用比游离ＡＤＭ增强，其５０％的杀伤浓度分别为１．１２μｍｏｌ／Ｌ和２．２３μｍｏｌ／Ｌ；对非靶细胞ＭＧ＿（ｃ－８０３）和ＢＥＬ＿（－７４０２）的毒性很弱，５０％杀伤浓度分别为１７．４５μｍｏｌ／Ｌ和２３．８１μｍｏｌ／Ｌ结果提示ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３具有导向作用，可以携带结合的ＡＤＭ特异地杀伤肿瘤细胞。     

犬细小病毒单克隆抗体在治疗上的应用研究

本试验采用犬细小病毒单克隆抗体（ＣａｎｉｎｅＰａｒｖｏｖｉｒｕｓＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙ，ＣＰＶＭｃＡｂ）对２８７例患细小病毒性肠炎的病犬，经股内侧肌肉注射进行治疗，取得令人满意的结果。１．在收治的２８７例病犬中，治愈２７９例，治愈率高达９７．２１％，尤其是小于３月龄的幼犬，治愈率高达９７．９２％，显著高于其他治疗方法的治疗效果。２．在收冶的２８７例病犬中，６月龄以下幼犬占９３．７３％。冬季发病犬占９２．６８％，说明本病主要发生于６月龄以下幼犬，冬季发病较多，其次为初春或深秋，夏季发病较少。３．在临床治疗中发现，发病一天的病犬仅注射ＣＰＶＭｃＡｂ，而不采取其他对症措施，病犬即可在２天内完全康复。发病３天以内的病犬２４１只，在注射ＣＰＶＭ＿－ｃＡｂ同时，结合对症措施，治愈２４Ｏ只，仅死亡１只。随病程延长，治愈率下降。另外，８８．５３％的治愈犬在注射ＣＰＶＭｃＡｂ４天内完全康复，说明采用ＣＰＶＭｃＡｂ治疗还可缩短病程。４，注射ＣＰＶＭｃＡｂ后７ｈ以内死亡的病犬，主要是由于发病后期，全身性衰竭、肠道广泛性出血、坏死和严重脱水，注射的ＣＰＶＭｃＡｂ未能起作用。３天后死亡的病犬，可能是由于ＣＰＶＭｃＡｂ虽     

二安替比林基－（3，4－亚甲二氧基）－苯基甲烷光度法测定微量铬（Ⅵ）

合成了二安替比林基－（３，４－亚甲二氧基）苯基甲烷（ＤＡＤＭＰＭ）．研究了ＤＡＤＭＰＭ与Ｃｒ（Ⅵ）的显色反应．在Ｈ３ＰＯ４介质中，在Ｍｎ（Ⅱ）和吐温２０存在下，Ｃｒ（Ⅵ）与ＤＡＤＭＰＭ反应生成橙黄色产物，λｍａｘ为４７０ｕｍ，摩尔吸光系数ε＝３．０×１０５Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１．铬量在０—５μｇ／２５ｍｌ范围内符合比尔定律．已用于环境水样中Ｃｒ（Ⅵ）的测定，结果满意．     

FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析

从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）,逆转录反应在６５℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板,以与２５５和１８Ｓ ｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件： ２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ８．５,２５℃）,２５ ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,２ ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｎＣｌ２,１００ μｇ／ｍｌ明胶．５ ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ,２５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ４种 ｄＮＴＰ, １μＣｉ３ Ｈ－ｄＣＴＰ, １２ｕｇ ＲＮＡ,２５ ｐｍｏｌ引物,并在此条件下测得 ＦＤ－ＴＲＴ和 Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为０．０５６,０．００４５．     

692例桡骨骨量测定分析

应用单光子骨矿分析仪测量了广州高校６９２名年龄２４～８５岁教职工的桡骨骨量（ＢＭＤ：骨质密度；ＢＭＣ：骨质含量）。结果显示男性各年龄组的骨量明显高于女性；两性在３０～３９岁组骨量最高；男性ＢＭＤ为０．７４２ｇ／ｃｍ２，ＢＭＣ为１．０６７ｇ／ｃｍ；女性则分别为０．６７６ｇ／ｃｍ２和０．７８６ｇ／ｃｍ；女性骨质丢失约从５０岁开始至７０岁后ＢＭＤ约下降２５．７％，男性的骨质丢失比女性晚约１０年，从６０岁开始至７０岁后ＢＭＤ下降约１８．５％。按ＷＨＯ建议诊断标准，５０岁后骨质疏松患病率男、女分别为３２．６％、５１．４％。另外，研究发现男性ＢＭＤ、ＢＭＣ与身高、体重有显著的线性正相关，女性只有身高与ＢＭＣ有较良好的相关性     

棘孢小单孢突变株原生质体制备及再生

以棘孢小单孢突变株（Ｍｉｃｒｏｎｏｚｐｏｒａ ｅｃｈｉｎｏｚｐｏｒａ ＪＩＭ－４０１）为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究,结合ＵＶ照射及高能电子流诱变,筛选出ＭＳ－１１６菌株,３０吨发酵罐试验,其Ｃ２ｂ组分达８５．６％。     

角膜移植的免疫学研究——实验性角膜移植排斥反应的病理组织学观察

角膜移植排斥反应现已成为角膜移植手术失败的主要原因,研究角膜移植免疫反应具有重要意义。本文报告了用同一供体皮肤移植引起兔同种穿透性角膜移植排斥反应的动物模型,描述了角膜移植术后和皮肤移植术后的经过,排斥反应的临床表现,组织学标本,包括光镜、扫描电镜和透射电镜标本的制作方法,重点报告了排斥反应实验组的角膜和对照组透明角膜的组织学观察结果。发现对照组的透明角膜,除了在供、受体组织交界处形成疤痕外,植片和受主角膜表现与正常角膜相同。而在发生排斥反应的角膜,则有大量新生血管侵入,植片有大量的浸润细胞,这些细胞主要是淋巴细胞,还有巨噬细胞、浆细胞、多形核白细胞、成纤维细胞等。植片组织遭到不同程度的损害,受主角膜除了有新生血管生长和有少量浸润细胞附着以外,没有受损。本文讨论了有关动物模型、排斥反应的临床特征、病理组织学与免疫机理及功能的联系,新生血管在排斥反应中起的作用等问题。我们认为本组实验动物模型的临床表现和组织学改变均符合典型的特异性免疫反应。这种反应以细胞免疫为主,亦有体液免疫参与。血管在免疫排斥反应的传入、传出弧中均超重要作用。     

角膜移植及其排斥反应的内皮改变——角膜内皮显微镜观察

本文报告用角膜内皮显微镜观察兔穿透性角膜移植术前、术后和角膜移植排斥反应时的角膜内皮改变结果。发现在角膜移植术前,正常角膜的中央区和周边区的内皮细胞密度、细胞面积基本相同,没有显著差异。在角膜移植术后,术眼的植片和受主角膜的内皮细胞均出现密度减低、细胞面积增大,与术前比较有显著差异。在排斥反应期间,植片内皮细胞出现细胞肿胀、边界不清、甚至模糊不能窥见等异常改变,而受主角膜内皮细胞则表现正常。本文认为兔角膜内皮细胞的形态、密度等与人角膜内皮细胞基本相同。穿透性角膜移植术对角膜内皮有较大损伤,植片内皮细胞在排斥反应中遭受严重损害,提出在角膜移植术时,要注意保护角膜内皮;发现排斥反应时,要及时治疗,防止角膜内皮的过多损伤。     

CD71人-鼠嵌合抗体抗移植排斥反应裸鼠模型发生肺不典型增生的研究

目的研究裸鼠移植排斥反应模型发生肺不典型增生的形态学基础.方法将人外周血单个核细胞(PBMC)注射到裸鼠体内建立移植物抗宿主动物(人外周血-裸鼠)模型,通过注射Hanks液设立模型对照组,12天后处死.再将实验裸鼠随机分成3组,分别通过注射抗CD4人-鼠嵌合抗体、抗CD71人-鼠嵌合抗体及Hanks液,构建CD4抗体组和CD71抗体组及模型组,20天后处死.搜集裸鼠各脏器组织,10%缓冲福尔马林固定,常规石蜡包埋,HE染色,镜下观察形态学改变.结果①裸鼠模型对照组肺、胃、肠、皮肤内有少量淋巴细胞浸润,同模型组相比,各器官淋巴细胞浸润程度较轻;②存活裸鼠上皮细胞的异型增生阳性率54%,其中,46%发生不同程度的不典型增生,8%发生肺癌;20天饲养裸鼠不典型增生发生阳性率为71%,明显高于12天饲养的裸鼠(17%).结论人外周血-裸鼠移植排斥反应模型促进肺不典型增生及肺癌的发生,有可能成为研究用的原发性肺癌动物模型.     

组织工程人角膜内皮在维持新西兰兔角膜透明中的效果研究

为了评价组织工程人角膜内皮(TE-HCE)维持动物角膜透明的效果,利用来自非转染人角膜内皮(HCE)细胞系的核型正常单克隆细胞株为种子细胞、以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,对新西兰兔进行了穿透性角膜内皮移植试验,利用肉眼观察了移植兔眼的水肿和免疫排斥情况,利用裂隙灯显微镜检测了移植兔角膜的透明情况,并利用荧光显微镜检测了移植兔角膜内皮细胞的CM-DiI标记。对撕除后板层新西兰兔眼进行TE-HCE穿透性角膜内皮移植实验的观察和检测结果显示,移植后的兔眼角膜没有出现明显的水肿和排斥等不良反应,使移植兔角膜维持透明的时间长达100d,且角膜内皮移植区的细胞均为带有CM-DiI标记、来自TE-HCE的种子细胞。由此可见,体外重建TE-HCE移植后能使新西兰兔角膜长期保持透明,有望作为HCE的替代物用于角膜内皮失代偿和角膜内皮盲的临床移植和治疗。     

小鼠同种异体及异种神经移植后脾脏T淋巴细胞亚群的变化

目的通过化学法萃取的去细胞异体及异种神经移植后,观察移植免疫排斥过程中小鼠脾脏T细胞总数与亚群变化,探讨周围神经缺损修复的可行性。方法BALB/c小鼠随机分成假手术组、新鲜自体神经移植组、新鲜同种异体神经移植组、新鲜异种神经移植组、化学去细胞同种异体神经移植组和化学去细胞异种神经移植组,每组32只。分别在神经移植术后3、71、4、28 d,每组各取8只小鼠脾脏,淋巴细胞分离液获取淋巴细胞,计数。用荧光标记的CD3+、CD4+、CD8+、CD25+单抗作用后,流式细胞仪检测T淋巴细胞及其亚群百分数,Stata7.0统计软件进行统计处理。结果在7 d1、4 d、28 d各时间点上,化学去细胞神经同种异体和异种神经移植组CD3+、CD4+、CD8+、CD25+阳性T细胞百分率与假手术对照组、自体神经移植组相比无显著差异(P>0.05),而新鲜同种异体及异种神经移植组在相同时间点上的CD3+、CD4+、CD8+、CD25+阳性T细胞百分率与假手术对照组、自体神经移植组相比则有明显增高,差异显著(P<0.05)。结论新鲜同种异体周围神经移植后的排斥属于急性排斥反应。化学去细胞处理的同种异体神经的免疫原性等于或接近于自体神经,要明显低于新鲜同种异体神经移植。     

Structure of human cyclophilin and its binding site for cyclosporin A determined by X-ray crystallography and NMR spectroscopy

The protein cyclophilin is the major intracellular receptor for the immunosuppressive drug cyclosporin A. Cyclosporin A acts as an inhibitor of T-cell activation and can prevent graft rejection in organ and bone marrow transplantation. Cyclophilin may be responsible for mediating this immunosuppressive response. Cyclophilin also catalyses the interconversion of the cis and trans isomers of the peptidyl-prolyl amide bonds of peptide and protein substrates. Here we report the X-ray crystal structure of human recombinant cyclophilin complexed with a tetrapeptide and the identification, by nuclear magnetic resonance spectroscopy, of the specific binding site for cyclosporin A. Cyclophilin has an eight-stranded antiparallel beta-barrel structure. The prolyl isomerase substrate-binding site is coincident with the cyclosporine-binding site. These results may help to provide a structural basis for rationalizing the immunosuppressive function of the cyclosporin-cyclophilin system and will also be important in the design of improved immunosuppressant drugs.