常见赤潮藻类的变性梯度凝胶电泳分析

为了解我国典型有毒有害赤潮藻类的变性梯度凝胶电泳( DGGE)指纹图谱以及DGGE技术在赤潮藻类分析鉴定中的作用,本课题组运用DGGE技术,研究了我国沿海7种重要赤潮藻类的单一种类以及混合种类样品的18S rDNA V3区的DGGE指纹图谱,并且对2009年10月底在广东省珠海海域发生的双胞旋沟藻(Cochlodinium gemtnatum)赤潮样品进行了DGGE分析.结果表明,DGGE技术能够对环节环沟藻、海洋原甲藻、血红哈卡藻、锥状斯氏藻、中肋骨条藻、塔玛亚历山大藻、双胞旋沟藻7种常见的海洋赤潮藻类具有较好的区分效果,同时监测出赤潮样品中双胞旋沟藻、血红哈卡藻、环节环沟藻和海洋原甲藻4种优势种,种类组成与显微镜观察结果具有较好的一致性.结果说明DGGE技术可作为一种辅助方法对赤潮藻类进行分类鉴定.     

氮磷比对两种赤潮藻生长特性的影响

研究了两种赤潮藻即赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）和东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense）在不同氮磷比培养条件下的生长特性,探讨了氮磷含量及比值对赤潮爆发的影响机理。结果表明,在试验条件下赤潮异弯藻的比生长速率与N源浓度之间的关系符合Monod公式（P〈0.001）,氮磷比在25和50时藻细胞密度高于其他比值的藻细胞浓度,说明该氮磷比是赤潮异弯藻最佳生长营养盐条件。对东海原甲藻而言,在以NaNO3为N源时,氮磷比为40时藻细胞密度高于其他比值的藻细胞浓度,说明该氮磷比是东海原甲藻最佳生长营养条件。     

海洋浮游植物休眠期的生态学研究

休眠期是甲藻和硅藻抵御外界不利环境条件的一种有效的生理反应机制,也是许多赤潮藻生活史中的一个重要生活阶段.从生态分布、生态作用尤其是在赤潮生消过程中的作用等角度简述了海洋浮游甲藻和硅藻休眠期的生态学的研究情况,并对二者的生态学特征进行比较.甲藻孢囊和硅藻休止细胞在海洋沉积物中的丰度有明显差别,前者较后者具有更明显的季节性萌发能力.温度和光照是影响二者萌发的重要生态因子,温度是甲藻孢囊萌发不可或缺的因素,而光照是硅藻休止细胞萌发的触发因子.二者在种源策略和生态特征上的差异导致了不同的群落演替模式和引发藻华的机制.     

嵊泗列岛养殖海区发生的菱形裸甲藻Gymnodinium rhomboides SCHUTT赤潮

1991年7月13日在嵊泗海域发生大规模的菱形裸甲藻赤潮。菱形裸甲藻的形态和生态特性与已报导的几种裸甲藻有所不同。发生赤潮时,水温范围为23—25℃,盐度范围为20.2—23.5‰。并且,菱形裸甲藻常与中肋骨条藻Skeletonema costatum同时出现。赤潮发生的严重程度随着表层水中菱形裸甲藻的密度增大而加重,重赤潮区3.53×10~6cells/L,次重赤潮区6.1×10~5cells/L。按重赤潮区—次重赤潮区—赤潮不明显区的顺序排列,表层水的pH、DO、COD顺序递降,而透明度、盐度和总氮量顺序则递增。本文列举了赤潮各期多种生态因子变化,其中消退期造成的水质污染最严重。但此次赤潮时间短,受潮汐影响大,对养殖业未造成严重危害。     

南麂列岛海域硅藻和甲藻群落的分布特征

于2006年4月~2007年3月采集浙江南麂列岛海域水样,研究了硅藻和甲藻群落在该海域的种类组成、生态分布特征和季节动态.共鉴定浮游植物93种,其中硅藻35属68种,甲藻11属21种.南麂海域浮游植物细胞丰度较高,年平均细胞丰度达到3.19105cellsL-1.硅藻集群的高峰区主要集中在夏季和秋季,细胞在表层水体的含量高于底层水体,调查期间共记录硅藻赤潮事件1起,发生于2006年8月,优势种类是中肋骨条藻.甲藻赤潮仅在春季（5月）发生,优势种类为原甲藻种类,包括三角棘原甲藻和东海原甲藻,分别在5月中旬和5月下旬先后引发赤潮,甲藻在表层水体含量高于底层水体.     

大鹏湾有毒赤潮生物孢囊研究

自１９９年至１９９４年间，对大鹏湾海域９个站位进行了多次采集，对６０份样品进行了分析和观察，从其中发现了４种在世界上引起毒害的赤潮生物孢囊，它们是塔马亚历山大藻，海洋褐胞藻、链状裸甲藻、巴哈马梨甲藻，对这种几种有毒赤潮藻类孢囊的形态特征，生态分布进行了描述，对几种毒害藻大鹏湾引发赤潮的可能性进行了预测。     

浙江中、南海域的赤潮和赤潮生物

通过对2002年至2004年浙江中、南海域赤潮发生的连续监测分析,表明浙江中、南海域的赤潮高发期集中在每年的4月至7月,近年来赤潮发生规模和频率呈上升趋势.2003年5月在南麂列岛附近海域还监测到一次伴有链状亚历山大藻的小规模有毒赤潮.本区主要赤潮优势种为具齿原甲藻.     

海洋浮游植物休眠期的生态学研究

休眠期是甲藻和硅藻抵御外界不利环境条件的一种有效的生理反应机制，也是许多赤潮藻生活史中的一个重要生活阶段．从生态分布、生态作用尤其是在赤潮生消过程中的作用等角度简述了海洋浮游甲藻和硅藻休眠期的生态学的研究情况，并对二者的生态学特征进行比较．甲藻孢囊和硅藻休止细胞在海洋沉积物中的丰度有明显差别，前者较后者具有更明显的季节性萌发能力．温度和光照是影响二者萌发的重要生态因子，温度是甲藻孢囊萌发不可或缺的因素，而光照是硅藻休止细胞萌发的触发因子．二者在种源策略和生态特征上的差异导致了不同的群落演替模式和引发藻华的机制．     

桉木粉及其粗提物对几种常见赤潮藻生长的影响

研究了桉木粉及其粗提物对塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)、东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)、球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)、海洋卡盾藻(Chattonella marina)和赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)等5种典型赤潮藻生长的影响,以期为赤潮藻的治理以及除藻剂的筛选提供参考和依据.结果表明,托里桉木粉对5种赤潮藻都有显著的抑制作用,但敏感性有所不同.1g/L托里桉木粉24 h对海洋卡盾藻(5.0×106/L)抑制率已达100%,48 h对塔玛亚历山大藻(9.7×106/L)、东海原甲藻(2.8×107/L)、球形棕囊藻(5.0×108/L)和赤潮异弯藻(4.7×107/L)48 h抑制率分别为56.0%、79.2%、52.5%和51.4%.托里桉木粉水-丙酮提取物(相当1 g /L托里桉木粉)对塔玛亚历山大藻、东海原甲藻、球形棕囊藻、海洋卡盾藻和赤潮异弯藻48 h抑制率分别为54.6%、45.8%、44.8%、72.1%和43.2 %.这些结果提示,托里桉木粉可显著抑制赤潮藻的生长,其中存在的抑藻活性物质可能是抑制藻类生长的主要原因.     

不同柱后衍生温度检测麻痹性贝毒的高效液相色谱方法研究

采用高效液相色谱分析并结合柱后衍生法，以不同的衍生温度对麻痹性贝毒的检测方法进行比较和优化，并对来自环境和实验室培养的赤潮藻样品进行检测．结果表明：检测PSP最适的柱后衍生温度为80℃；对实验室纯培养的赤潮藻东海原甲藻未能检测出毒素，对塔玛亚历山大藻CI01(ATCI01)则比较容易地检测出了C毒素和GTX2、GTX3、GTX5等毒素，而对厦门港赤潮水样的裸甲藻虽能检测出毒素，但不属于PSP类的毒素，提示此方法能对PSP毒素进行有效地检测．     

海洋甲藻包囊及沿革

某些甲藻在面对不良环境时,机体会采取一定的措施——失去鞭毛、积累营养物质形成甲藻包囊沉入水层底部,一旦周围环境适宜,沉积物中甲藻包囊便可以萌发形成营养细胞再次进入水体.甲藻包囊的大量萌发极易形成甲藻优势种爆发,进而出现有害藻华现象.作为甲藻生活史中的一个重要阶段,包囊对甲藻种群的生存与发展具有重要的作用.甲藻包囊组成与分布可以间接反映一段时期内上层水体的营养状况,继而推测出调查海域是否有藻华爆发的潜在威胁.本文主要阐述了甲藻包囊的基本形态分类和术语,甲藻包囊沿革及其国内外研究现状,并对甲藻包囊与上层水体浮游植物的相互关系进行讨论.     

不同分子探针对赤潮样品检测效果的比较研究

采用荧光标记的DNA和lecfn探针对来自赤潮现场样品中的目标赤潮原因种进行了检测.结果表明这些探针能从比较复杂的现场样品背景中把目标赤潮生物识别出来.从检测效果上看,各种DNA探针对塔玛亚历山大藻、微小原甲藻和T.pulchellum标记识别的荧光信号强度相对于lectin探针要弱.Lectin探针与明视野下的显微镜计数结果呈现出很好的相关性,但lectin探针对目标藻的绝对栓出数量比明视野下的计数结果要低.lectin探针(ConA)和DNA探针(PM18S02、PM28S02)对现场样品中微小原甲藻的检测计数结果也有较好的相关性.表明在这些检测条件下,不同的探针对特定目标藻的检测结果具有可比性、相关性和可操作性.     

浙江北部海域的具齿原甲藻赤潮分析

对2003年5月浙江北部的1次具齿原甲藻赤潮进行了调查分析,结果表明:细胞密度106个/L是具齿原甲藻发生赤潮的临界值,赤潮生物数量与DO、COD、叶绿素a、被囊类及水母有较好的正相关作用,与桡足类、箭虫类则呈相反的走势,具齿原甲藻赤潮的暴发及持续并不需要过高的营养条件,其连续、大规模的发生估计与海洋渔业资源及生态系统的变迁有着密切的联系.     

几种赤潮藻对中华哲水蚤摄食、产卵和孵化的影响

研究桡足类中华哲水蚤(Calanus sinicusBrodsky)对几种赤潮藻(假微型海链藻Thalassiosira pseudonana,威氏海链藻T.weissflogii,三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum,锥状施氏藻Scrippsiella trochoidea,裸甲藻Gymnodiniumsp.,东海原甲藻Prorocentrum donghaiense,塔玛亚历山大藻Alexandrium tamarense)的选择摄食以及赤潮藻对桡足类产卵率与孵化率的影响.结果表明,桡足类在混合食物中对个体小的藻类摄食率明显降低.在高浓度饵料条件下,桡足类对藻类的摄食模式与低浓度时不同,即滤食率与饵料藻细胞的大小成反比.桡足类在以威氏海链藻为饵料时,产卵率随藻类浓度的增加而上升(0.2~20.6 ind.ind-1.d-1),而孵化率却随之下降(100%~70.9%).以裸甲藻、东海原甲藻、塔玛亚历山大藻为饵料,桡足类仍能有较高的产卵率(分别为13.0、16.6和9.4 ind.ind-1.d-1).但喂食裸甲藻、塔玛亚历山大藻,其卵孵化率降低(分别为58.2%和79.8%).     

东海原甲藻和链状亚历山大藻对硝酸盐和氨盐的生理响应

比较研究了硝酸盐和氨盐培养下,两种甲藻(东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)和链状亚历山大藻(Alexandriumcatenella DH01))对氮营养盐的生理响应.结果表明,两种赤潮生物的最大比增长率均随着培养液中硝酸盐浓度的升高(20～80μmol/L)而增加,且硝酸盐培养下的最大比增长速率高于同浓度的氨盐,表明在高浓度下,硝酸盐是适宜的氮源.东海原甲藻硝酸还原酶活力(1.14～5.20 fmol/(cell.L.min))与硝酸盐吸收速率呈正相关,链状亚历山大藻中则未检测到硝酸还原酶活力;两种赤潮生物谷酰氨合成酶活力对硝酸盐和氨盐的响应存在差异,链状亚历山大藻谷氨酰胺合成酶活力(10.93～30.97 pmol/(cell.L.min))要远高于东海原甲藻(0.34～0.95 pmol/(cell.L.min)).两种赤潮生物对硝酸盐和氨盐的不同生理响应可能是引起赤潮期间种群更替的一个重要原因.     

东海赤潮生物具齿原甲藻及其特征

2000年至今连续三年的5月在东海的舟山海域发生大规模红褐色具齿原甲藻赤潮。在赤潮监测中对该种的形态及习性作了观察研究，结果表明：本种分布于我国东南沿海，主要分布于盐度较高的水域，5月份是繁殖盛期易发生赤潮，在河口低盐水域和高温季节不易发生赤潮，具齿原甲藻赤潮在近几年频繁发生与东海沿岸富营养化加剧有关。具齿原甲藻具有昼夜垂直移动特性，使得它们在获得光能、营养盐方面更具优势，在低磷环境中具有较强的种间竞争能力。对于大规模赤潮发生的原因、富营养化的贡献、种间竞争在赤潮发生过程中的作用等问题有待于进一步深入研究。     

四种赤潮藻多克隆抗体的制备及特异性分析

为了建立4种赤潮藻（赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）、海洋褐胞藻（Chattonella,marina）、卵圆褐胞藻（Chattonella ovata）、具齿原甲藻（Prorocenlnmz dentatum））的免疫学检测方法,分别用4种赤潮藻免疫Balb／C小鼠,制备针对4种不同赤潮藻的抗血清,间接ELISA检测其亲和性和特异性．结果显示,4种赤潮藻的抗血清对各自藻体均有良好的亲和力和特异性,交叉反应结果显示,抗血清与同种藻之间有较强的反应而异种赤潮藻之间交又反应较弱．表明单种藻免疫获得的小鼠多克隆抗体可特异性地与相应赤潮藻作用,可用于赤潮藻的免疫学检测分析．     

几种赤潮藻对温度、氮、磷的响应及藻间相互作用的研究

目的：研究３种赤潮藻对主要生态因子的响应以及藻间的相互作用。方法：改变温度及氮（Ｎ）、磷（Ｐ）质量浓度的条件下对单独培养及混合培养下拟菱形或（硅藻）、链状亚历山大藻和锥状施克里普藻（甲藻）的增殖情况作出比较研究,结果：发现两种甲藻的存在能促进硅藻的增殖,但需具备一定的条件;当温度为２０℃,Ｎ、Ｐ质量浓度分别达到９６７μｇ／Ｌ和１２８μｇ／Ｌ时,混合培养中的拟菱形藻发生了爆发性增殖,藻细胞浓度已达到     

泉州湾虾池浮游植物种类多样性研究

2003年11月～2004年5月对福建泉州湾东海虾池进行定点采样,并分析其浮游植物的种类多样性和种群动态.结果表明,泉州湾虾池共有浮游植物42属166种,硅藻为优势种群,共35属154种;甲藻3属6种.新月筒柱藻Cylindrotheca closterium、微小小环藻Cyclotella caspia、狭窄双眉藻Amphora angusta、菱形藻属Nitzschia为主要优势种,它们在浮游植物群落总细胞数中的百分比平均高达34.8%.通过对水温、营养盐、浮游植物种群密度及群落的多样性指数和均匀度的分析,发现虾池高强度的排污排废所引起的富营养化已很大程度影响了浮游植物的群落结构和时空分布,使生物多样性和均匀度下降,少数优势种类大量繁殖.硅藻和甲藻赤潮的发生机会增多.     

强氧化自由基对裸甲藻的影响

用强电场放电方法把O2、H2O加工成强氧化羟基自由基水溶液,投加于裸甲藻藻液中,研究其对裸甲藻的杀灭情况以及对裸甲藻叶绿素a和类胡萝卜素含量的影响.海水羟基比值浓度达到0.68 mg/L时,裸甲藻从0.89×104/mL减少到未检测出;羟基水溶液比值浓度为0.6 mg/L时,裸甲藻的叶绿素a、类胡萝卜素含量均低于检测方法的最低限值.实验结果表明,羟基在较低的质量浓度下便能完全杀灭裸甲藻、彻底分解叶绿素a和类胡萝卜素,有望成为治理赤潮新的绿色、有效方法.