用双核微核实验检测多环芳烃的致突变性

探讨了大气中常见的5种多环芳烃的致突变性。采用人外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核实验检测不同浓度5种多环芳烃对人血淋巴细胞的微核诱导作用。指出5种多环芳烃各染毒剂量组微核率与阴性对照组相比有显著性差异,并且有明显的剂量反应关系,说明他们均可引起人外周血双核淋巴的微核率增加。除苯并(a)芘(BaP)外其余的几种多环芳烃也具有一定的潜在危害,应引起高度重视。     

放射工作人员外周血淋巴细胞微核变化结果分析

采用微量全血常规培养法测定放射工作人员外周血淋巴细胞微核。结果显示,其平均微核细胞率、平均微核率均高于常人;女性放射工作人员的平均微核细胞率和平均微核率明显高于男性。低剂量电离辐射能引起放射工作人员周围血淋巴细胞微核率的升高,因此应加强放射工作人员的防护。     

一定剂量秋水仙素处理的PBL微核出现率

本文取30例皮肤病患者的外周血进行体外培养。分别按0、10、20微克/毫升的浓度加入秋水仙素,继续培养4小时后观察其淋巴细胞微核出现率。所得结果经统计学处理,三组间无明显差异。     

关于微核正常值的探讨

介绍了本实验室几年来对健康的昆明种小鼠胸骨骨髓ＰＣＥ微核、胎鼠肝血ＰＣＥ微核和正常人外周血淋巴细胞微核实验的结果，发现各种细胞的微核自然发生率均呈正偏态分布，９５％正常上限以百分位数法进行计算比较合适。我们的昆明种小鼠胸骨骨髓ＰＣＥ微核９５％正常上限值为４．３７％，胎鼠肝血ＰＣＥ微核９５％正常上限值为５．０２％，人外周血淋巴细胞微核９５％正常上限值为２．４％。并与部分学者报导的正常值进行了比较，其差异可能由于所用动物的品系、饲养条件、实验方法及实验者正确判断微核的经验不同所致。     

丝裂霉素C诱发人淋巴细胞SCE及小鼠骨髓细胞微核…

研究了丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）频率及小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。实验结果表明，随着剂量的增加，ＳＣＥ频率和微核率亦相应增加，并有明显的剂量－反应关系，相关系数分别为ｒ＝０．９７２１及ｒ＝０．９７９３。本研究对于ＭＭＣ在临床上的应用具有重要的指导意义。     

硝基芳烃类化合物诱发体外人外周血淋巴细胞微核的研究

应用人外周血淋巴细胞微核试验研究４种硝基芳烃类化合物的致突变性，结果表明邻二硝基苯，间二硝基苯，２，４－二硝基甲苯，２，６－二硝基甲苯均能诱发人外周血淋巴细胞的微核率增加，并且具明显的剂量－效应关系，引进标准剂量（ｄｅｆｉｎｉｎｇｄｏｓｅ）概念比较４种硝基芳烃类的致突变性，结果表明４种硝基芳烃类的致突性变性强弱２，４－二硝基甲苯〉间二硝基苯〉２，６－二硝基甲苯〉邻二硝基苯。     

硝基芳烃类化合物诱发体外人外周血淋巴细胞微核的研究

应用人外周血淋巴细胞微核试验研究４种硝基芳烃类化合物的致突变性，结果表明邻二硝基苯，间二硝基苯，２，４－二硝基甲苯，２，６－二硝基甲苯均能诱发人外周血淋巴细胞的微核率增加，并且具有明显的剂量－效应关系。引进标准剂量（ｄｅｆｉｎｉｎｇｄｏｓｅ）概念比较４种硝基芳烃类的致突变性，结果表明４种硝基芳烃类的致突变性强弱为２，４－二硝基甲苯＞间二硝基苯＞２，６－二硝基甲苯＞邻二硝基苯。     

饮用水遗传毒性评价方法建立和应用

建立了一组多效应终点、多层次的饮用水遗传毒性测试体系,并用于盐城某水厂饮用水处理工艺的评价.采用Ames试验菌株TA98和TA100检测水样浓集物致突变效应,分别利用人外周血淋巴细胞微核试验和彗星试验检测染色体结构损伤和DNA链断裂程度.Ames试验结果显示,水样浓集物在0.5~2.0 L/皿的浓度范围内未出现致突变性.微核试验中原水、砂滤水和出厂水均表现出较强的致染色体畸变作用,0.125 L的剂量即可引起淋巴细胞微核细胞率的升高,经过臭氧-生物活性炭处理后各剂量均与对照无差异.彗星试验结果显示,各水样均在不同剂量下对淋巴细胞DNA造成损伤,原水、出厂水、砂滤水、生物活性炭(BAC)水的作用剂量分别为0.25,0.25,0.50和1.00 L,损伤程度从大到小依次为原水、出厂水、砂滤水、BAC水.     

蚕豆根尖微核技术测定美洲大蠊提取物的抑突变性

目的：了解美洲大蠊提取物的抑突变性。方法：将来自大理市周边七里桥村和小关邑村的两份蚕豆,分别随机分成4组：美洲大蠊组、美洲大蠊＋环磷酰胺组、阴性对照组、阳性环磷酰胺组,采用蚕豆根尖微核技术进行检测。结果：七里桥村和小关邑村蚕豆之间微核率无统计学意义（P〉0．05）。用美洲大蠊提取物处理过的蚕豆与阳性对照组之间微核率有统计学意义（P〈0．01）。结论：美洲大蠊提取物对蚕豆根尖微核率有抑制作用。     

绿茶多酚类(GTPP)的遗传安全性研究

本研究采用小鼠骨髓细胞微核分析法和离体培养人体外周血细胞姐妹染色单体交换(SCE)和微核试验,对绿茶水溶性提取物GTPP的遗传安全性进行检测。结果表明:小鼠口服本样品GTPP剂量达750mg/kg.body.wt./day或腹腔注射剂量为520mg/kg.body.wt.引起的雌雄小鼠骨髓PCE微核率与阴性对照组间比较均无显著性差异(P>0.05)。当小鼠口服剂量大于90％LD_(50)或腹腔注射剂量达1300mg/kg.body.wt.时,诱发的小鼠骨髓PCE微核率比阴性对照组高,具有显著性差异(P<0.05)。离体培养人体外周血淋巴细胞SCE和微核试验中的GTPP三个剂量组的SCE频率和微核细胞率(MNCF)与阴性对照组间比较也均无显著性差异(P>0.05)。     

超声-微波协同萃取-HPLC检测掺罂粟壳肉汤中的生物碱

为建立食品中可能出现的罂粟壳生物碱成分--吗啡、可待因、罂粟碱的提取和测定方法,用超声-微波协同萃取的方法提取罂粟壳中的生物碱,高效液相色谱法(HPLC)进行含量分析.其平均回收率分别为97.87%,96.80%,94.47%;精密度相对标准偏差(RSD)分别为0.070%,0.037%,0.029%;重现性相对标准偏差(RSD)分别为0.040%,0.209%,0.665%.本方法具有回收率高、灵敏度高、精密度高等优点,可适用于食品中罂粟壳生物碱的检测.     

Synthesis of the skeleton of the morphine molecule by mammalian liver

The possibility that morphine could be synthesized in animals has long been considered and a pathway in mammalian brain analogous to that in the opium poppy has been proposed. Substances have been detected in mammalian brain that are recognized by antisera raised against morphine. Recently we reported the presence of three such immunoreactive substances in bovine hypothalamus and adrenal, and in rat brain, and the definitive identification of two of them by gas chromatography-mass spectrometry as morphine and codeine. Incorporation of a labelled precursor has demonstrated the biosynthesis of morphine in the opium poppy from tyrosine-derived units (see Fig. 1). Intramolecular coupling of reticuline to form salutaridine is the critical step that generates the morphine skeleton (morphinan) and the stereochemistry of the morphinan series. We now report the conversion in vivo and in vitro of reticuline to salutaridine by rat liver, but this conversion is not detectable in rat brain and bovine adrenal. This is the first direct demonstration of the synthesis of a morphinan in an animal tissue and also supports the hypothesis that morphine and codeine in brain and adrenal are of endogenous origin.     

Analgesia: morphine-pathway block in top1 poppies

The opium poppy is a source of the pharmaceuticals codeine, morphine and their derived analgesics. Here we describe the initial characterization of the poppy mutant known as top1 (for 'thebaine oripavine poppy 1'), which accumulates the morphine and codeine precursors thebaine and oripavine and does not complete their biosynthesis into morphine and codeine. The original discovery of top1 stimulated a re-engineering of the opioid industry in the island state of Tasmania, which grows over 40% of the world's licit opiates, in order to produce thebaine and oripavine efficiently from morphine-free poppy crops to provide precursors for highly effective analgesics and for treatment of opioid addiction.     

工频磁场对离体细胞胞浆钙离子浓度的影响

研究了50 Hz工频均匀强磁场(0.097 T)对人低分化胃腺癌细胞株-SNU细胞和人淋巴细胞胞浆钙离子浓度的影响.将体外培养的SNU细胞和人淋巴细胞,施加50 Hz工频均匀强磁场(0.097 T),处理不同时间后,应用共聚焦显微镜检测胞浆内钙离子浓度.实验表明,给予工频均匀强磁场处理后,SNU细胞和人淋巴细胞胞浆内钙离子浓度均升高.     

南瓜多糖的抑瘤作用及对红细胞免疫功能的影响

目的 :探讨从南瓜中提取的多糖对动物肿瘤的抑制作用以及免疫活性 ,以寻找和开发新的植物抗肿瘤药。方法 :以小鼠 S- 180、艾氏腹水癌 (EAC)为动物模型 ,通过灌胃给予南瓜多糖 ,按 10 mg/ m L 每天灌胃 0 .4m L,连续给药七天 ,第八天处死动物 ,取瘤及胸腺称重求抑瘤率及增重率 ,并作眼底取血以检测外周血各种血细胞数、血浆总蛋白、白蛋白、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、红细胞免疫功能试验。将所有数据进行 t检验。阳性对照安瘤乳组和阴性对照生理盐水组作同样检测和统计学处理。结果 :南瓜多糖对S- 180、艾氏腹水癌的抑瘤率分别为 37.3%和 33.3% ,对胸腺增重率为 8.3%。对白细胞及淋巴细胞数的影响 ,南瓜多糖与安瘤乳组比较 ,南瓜多糖组明显高于安瘤乳组 ,P<0 .0 1。对红细胞、血小板计数及血浆白蛋白水平均无显著影响。南瓜多糖组血浆 SOD活性升高 ,MDA含量有不同程度的降低 ,但无显著差异。红细胞免疫吸附肿瘤细胞能力增强 ,P<0 .0 5。结论 :南瓜多糖具有一定的抗癌及升高血浆白细胞、淋巴细胞的作用 ,增强红细胞免疫吸附功能。     

应用彗星试验研究两种农药对小鼠DNA的损伤

探讨采用当前国际上较先进的DNA损伤检测技术-单细胞凝胶电泳技术(SCGE,又名彗星试验),来检测农药对小鼠DNA的损伤,尝试建立小鼠的单细胞凝胶电泳技术来评价农药对生态环境和人体健康的影响.结果表明两种新型杀虫剂吡虫啉和抑食肼在一定的剂量范围内对小鼠的DNA均有一定程度的损伤作用,各浓度组与阴性对照组相比具有显著性差异(P<0.01),且具有明显的剂量效应关系.认为小鼠单细胞凝胶电泳技术能敏感地检测农药对细胞DNA的损伤,并认为细胞的DNA损伤可作为农药等化学品致突变性检测的生物标志物.     

Detection of acceptor sites on human lymphocytes for antigen-specific T cell factors.

Mouse antigen-specific T cell factors are absorbed by human peripheral blood lymphocytes at acceptor sites. The acceptors are products of HLA-linked genes, which may be human immune response genes.     

CD71人-鼠嵌合抗体抗移植排斥反应裸鼠模型发生肺不典型增生的研究

目的研究裸鼠移植排斥反应模型发生肺不典型增生的形态学基础.方法将人外周血单个核细胞(PBMC)注射到裸鼠体内建立移植物抗宿主动物(人外周血-裸鼠)模型,通过注射Hanks液设立模型对照组,12天后处死.再将实验裸鼠随机分成3组,分别通过注射抗CD4人-鼠嵌合抗体、抗CD71人-鼠嵌合抗体及Hanks液,构建CD4抗体组和CD71抗体组及模型组,20天后处死.搜集裸鼠各脏器组织,10%缓冲福尔马林固定,常规石蜡包埋,HE染色,镜下观察形态学改变.结果①裸鼠模型对照组肺、胃、肠、皮肤内有少量淋巴细胞浸润,同模型组相比,各器官淋巴细胞浸润程度较轻;②存活裸鼠上皮细胞的异型增生阳性率54%,其中,46%发生不同程度的不典型增生,8%发生肺癌;20天饲养裸鼠不典型增生发生阳性率为71%,明显高于12天饲养的裸鼠(17%).结论人外周血-裸鼠移植排斥反应模型促进肺不典型增生及肺癌的发生,有可能成为研究用的原发性肺癌动物模型.     

Immunization of hu-PBL-SCID mice and the rescue of human monoclonal Fab fragments through combinatorial libraries.

Antibodies are usually prepared from recently boosted animals and reflect ongoing immune responses. In humans, this is restrictive as ethical constraints generally prevent antigen-boosting. Therefore the rich memory compartment of human antibody responses remains largely untapped. Severe combined immune deficiency (SCID) mice populated with human cells allow the stimulation of human antibody memory without the usual constraints. Here we show how peripheral blood lymphocytes can be stimulated by antigen to produce large secondary responses after transfer to SCID mice. Specific monoclonal human Fab fragments can then be isolated from the mice by repertoire cloning even when the human donor's last contact with antigen was more than 17 years ago.     

SIVmac感染食蟹猴、恒河猴的外周血血象观察

目的　比较SIVmac感染的食蟹猴、恒河猴外周血粒系统变化情况。方法　常规方法进行白细胞 (WBC)和白细胞分类计数 (WBC .DC)。结果　感染了SIVmac的恒河猴、食蟹猴其外周血粒系统变化与人类AIDS外周血变化相似 ,显现规律性的白细胞数量、形态变化。感染SIVmac病毒两周后 ,恒河猴、食蟹猴的白细胞总数开始下降 ,异型淋巴细胞数开始上升 ,随后白细胞总数持续回升至高峰 ,8周后白细胞总数及异型淋巴细胞数下降 ,其中三只食蟹猴先后于 8周后死于病毒血症和早期死亡 ,余 1只猴白细胞总数于 12周后仍持续下降。结论　本文中描述的现象同人类HIV AIDS的诊断标准实验检查部分中提及的基本一致。另外 ,本实验还表明恒河猴、食蟹猴对SIVmac毒株的实验感染是敏感的 ,食蟹猴对SIVmac更敏感