高龄五指山小型猪近交系血液生化指标测定

目的 了解猪龄和性别对五指山小型猪（WZSP）近交系血液生化指标的影响.方法 WZSP近交系F17、F186月龄青年猪34头（7 ♂,27♀）,5-6高龄猪21头（8 ♂,13♀）,禁食12 h后经由前腔静脉采血,用全自动生化分析仪检测血液生化指标.结果 青年猪和高龄猪有部分血液生化指标具有性别差异（P＜0.05）,其中青年猪有3项高龄猪有7项;青年猪和高龄猪有16项血清生化指标具有差异（P＜0.05）.结论 WZSP近交系血液生化指标有着明显的年龄差异,这对选用高龄猪作为人类老年化动物模型提供了基础参考数据.     

五指山小型猪心脏起搏器的放置

将体重为 2 4— 2 6kg的成年五指山小型猪 ,用于颈外静脉放置心脏起搏器的实验研究 ,结果表明此方法操作简单 ,起搏效果好 ,为建立理想的心衰模型提供了可靠的技术方法和措施 ,为小型猪的心衰模型系列开发利用奠定了良好基础。     

实验用五指山小型猪胚胎生殖细胞的分离培养

目的对从猪的原始生殖细胞分离获得胚胎干细胞的方法进行初步研究。方法胎儿取自怀孕26～28d的实验用五指山母猪。分离胎儿生殖嵴获得PGCs,接种于STO饲养层上,以DMEM+2mmol/L谷氨酰胺+0.1mmol/L非必需氨基酸+0.1mmol/Lβ-巯基乙醇+100IU/mL青霉素+100μg/mL链霉素+15%FCS作为培养基,对细胞进行培养传代。结果培养的细胞传至4～5代,形态多样,经AKP染色、SSEA-1免疫荧光染色、Oct-4免疫荧光标记等方法鉴定为阳性,具有胚胎干细胞的特征。     

五指山小型猪PMSA6基因cDNA克隆及生物信息学分析

为了对海南五指山小型猪蛋白酶体亚基α型6（proteasome subunit alpha type 6,PMSA6）cDNA基因进行克隆和生物信息学分析,笔者以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到PMSA6全长cDNA,并向GenBank递交了该序列（登录号：FJ358606）．同时运用生物信息学软件对该基因核苷酸序列进行了分析,并预测了其编码蛋白的理化性质及二级结构等．生物信息学分析表明：该cDNA全长1029bp,5’非翻译区长96bp,3’非翻译区长192bp,含有一个741bp完整的开放阅读框,编码246个氨基酸．该蛋白的分子量为37．680kD,等电点为8．76．进一步比对分析发现,五指山小型猪PMSA6基因的核酸序列及其氨基酸序列与人、牛等哺乳动物具有很高的相似性．本研究成功克隆了海南五指山小型猪P肛SA6基因cDNA,并进行了相关生物信息学分析,为进一步研究PMSA6在动物体内的作用机理奠定了基础．     

五指山小型猪动脉粥样硬化模型的建立

目的建立五指山小型猪动脉粥样硬化模型,探讨小型猪动脉粥样硬化模型复制规范。方法3~4月龄五指山小型猪30头,随机分为3组:对照组6头,喂基础饲料;实验组分别饲喂含1.5%胆固醇的高脂饲料(T1组)和含3.0%胆固醇的高脂饲料(T2组)。实验过程中进行一般临床观察和血脂相关指标检查,在实验后4、6、8和12个月,实验组分别处死动物3头,对照组分别在实验后6个月和12个月各处死3头,对动物的心血管系统和主要脏器做病理学检查。结果高胆固醇、高脂饲料能够引起五指山小型猪血清胆固醇指标升高和动脉粥样硬化病变形成。实验组血清LDL-C、TC和HDL-C值在实验后1个月显著升高,升高幅度最高分别达到对照组的13.3~15.0倍、8.2~10.2倍和3.3~4.2倍。在实验后4个月,实验组动物均出现明显的早期动脉粥样硬化病变,至6个月和8个月,动脉病变逐渐加重,最严重的病变可达病理分级的Ⅳ级。至实验后12个月,在动物的大、中动脉观察到广泛的病变,最严重部位达到病理分级的Ⅴ级。动脉病变易发且严重的部位为腹主动脉、髂动脉和冠状动脉,动脉病变少见且较轻的部位为颈总动脉、肠系膜总动脉和肾动脉。血脂相关指标的升高幅度、动脉病变的出现时间和严重程度T2组比T1组略重,但是差异不十分显著。结论小型猪食饵性动脉粥样硬化模型的诱导配方中,胆固醇含量以1.5%~2.0%为宜,观察早期动脉病变诱导时间需要4至8个月,晚期病变则需要12个月以上的诱导时间。     

五指山小型猪动脉粥样硬化模型的病理学研究

目的观察小型猪动脉粥样硬化模型动脉病变的形态特点、分布规律和发展过程,为小型猪动脉粥样硬化模型的应用提供基础资料。方法3~4月龄五指山小型猪30头,随机分为3组,对照组6头,喂基础饲料,实验组分别饲喂含1.5%胆固醇的高脂饲料(T1组,12头)和含3.0%胆固醇的高脂饲料(T2组,12头),在实验后4、6、8和12个月,T1和T2组分别处死动物3头,对照组分别在实验后6个月和12个月各处死3头,对动物的心血管系统和主要脏器做病理学检查。结果实验后4个月,实验组动物均出现明显的早期动脉粥样硬化病变,至6个月和8个月,动脉病变逐渐加重,在实验后12个月,于动物的大、中血管观察到广泛的动脉病变。动脉病变易发且严重的部位为腹主动脉、髂动脉和冠状动脉,动脉病变少见且较轻的部位为颈总动脉、肠系膜总动脉和肾动脉。动脉病变大体分为3种类型,分别为以胸主动脉为代表的脂纹性病变,以腹主动脉为代表的纤维斑块病变和以冠状动脉为代表的中小动脉病变。动脉病变的发展过程在不同血管和不同部位也有差别,动脉病变的出现时间和严重程度动物个体之间差别较大,T1组和T2组差别不十分显著,以T2组略重。结论小型猪动脉粥样硬化病变与人类十分相似,但是不同部位的血管病变类型和发展过程有所不同,应根据实验需要选择观察血管和实验周期。     

实验用小型猪在毒理学研究中的应用

在药物和化学物安全性研究中,通常使用啮齿类和非啮齿类动物,而非啮齿类动物常选择犬和灵长类。猪解剖学和生理学的某些特性与人非常接近,已经广泛应用于医学研究中,但在毒理学研究中很少使用。自从1949年第一个小型猪——明尼苏达小型猪（Minnesotaminipig）培育成功后,小型猪作为实验动物开始引入药理和毒理学研究领域。     

实验用小型猪胚胎移植技术研究进展

猪虽与人为非近缘关系,但二者在解剖学、生理学上相似性很高,且生化指标和器官大小极近似于人。所以广泛应用于生物医学等领域的研究。随着人类医学以及生物科学的发展,以猪作为实验动物的需求量不断攀升,自1966年以来,猪作为试验动物的用量排在各类试验动物使用量的第4位。     

三个品系小型猪Ⅱ型糖尿病模型的比较研究

目的比较三个品系小型猪对高糖高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病模型的敏感性,为我国小型猪在Ⅱ型糖尿病研究中的应用提供基础资料。方法4~5月龄巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪各6头,以4头中国农大小型猪为对照,同步开展高糖高脂饲料喂养试验,试验周期8个月。每月称1次体重,测定血糖、血清胰岛素含量,每2个月进行1次静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),测定脂质代谢相关指标。结果巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料比较敏感,在饲喂5~6个月后,开始出现糖代谢异常,表现为显著肥胖、血清胰岛素升高和胰岛素敏感性下降。至实验后8个月,巴马小型猪和五指山小型猪各有1头发展为糖尿病,分别有3头和2头出现糖尿病前期症状。中国农大小型猪对高糖高脂饲料诱发糖尿病相对不敏感,实验期间空腹血糖水平、血清胰岛素含量、胰岛素敏感指数和IVGTT一直无显著变化,仅在实验后7个月开始表现肥胖,8个月出现胰岛素敏感性减低。三个品系小型猪在高糖高脂饲喂后,血脂相关指标(TG,CHO,HDL-C,LDL-C)普遍升高,以巴马小型猪升高幅度最大。结论巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病比较敏感,品系内个体差异较大。中国农大小型猪相对不敏感。这一结果为进一步的Ⅱ型糖尿病相关基因分析和高敏感家系培育研究提供了基础资料。     

小型猪近交系鉴定研究进展

本文综述了国内外小型猪近交系鉴定方法的研究进展,包括：异体皮肤移植鉴定、基因组水平鉴定、生理生化标记、同工酶蛋白质鉴定、DNA遗传标记、SNP分析等分子遗传学的方法。综合分析,异体皮肤移植技术是大型哺乳动物近交系最佳鉴定方法。该技术将为我国创新资源近交系猪培育和开发利用奠定科学基础,为大型哺乳动物近交系鉴定提供科学的检测技术和方法,并使我国大型哺乳动物近交系研究处于国际领先地位。     

突变无毛小鼠F_2代的血液学和血液生化指标测定

目的　突变无毛小鼠是一种新型的基因定位小鼠 ,为了更好的研究该突变基因对小鼠特性的影响。方法采用日本光电血球计数仪、荷兰半自动生化仪对二月龄的F2 代小鼠血液学及血液生化指标进行测定。结果　雌雄无毛小鼠之间的Bun和Ca差异显著 ;稀毛小鼠雌雄之间的WBC、RBC、HCT、GPT、Alb和Mg差异显著 ,其它指标差异不显著。表型之间比较 ,Tbili、Cl、Ca差异显著 ,其它指标差异不显著。结论　突变无毛小鼠F2 代生化指标、代谢产物及电解质表型之间存在差异 ,体现出该突变对其机体的代谢功能有一定的影响。研究结果为进一步说明突变基因的特性提供了参考     

Smad3基因剔除小鼠的血液生理生化指标检测——35日龄Smad3基因剔除小鼠

对 35日龄的血液生理生化指标进行了检测 ,反映出日常生长繁殖中Smad3基因剔除小鼠性成熟时血液生理生化指标的变化。纯合型 (- - )小鼠的白细胞和血小板明显高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、GPT、CL、CA、MC差异显著 ,其它指标均差异不显著。纯合型 (- - )的GLU、CK、UA、TG、GPT、GOT、BUN、LDH L指标高于野生型的小鼠 ;CRE、CA、MG的指标低于野生型的     

Smad3基因剔除小鼠的血液生理生化指标检测——70日龄Smad3小鼠

对成年 70日龄的Smad3基因剔除小鼠血液生理生化指标进行检测 ,结果只有少数指标雌雄之间差异显著 ,纯合型 (- - )小鼠的白细胞 (WBC)和血小板高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、CK、UA、GOT、TP、ALP、LDH L、MG、CA差异显著 ;纯合型 (- - )的CK、UA、TG、ALP、LDH L指标高于野生型的小鼠 ;GLU、P、MG、CA指标低。     

近交培育五指山小型猪GHR基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的探讨近交培育五指山猪矮小的分子机理,为五指山猪实验动物化奠定基础。方法近交系五指山猪肝脏组织提取总RNA,然后RT-PCR成功扩增出GHR基因,克隆入pGEM-Teasy载体进行测序,并与正常猪GHR基因序列进行比对;然后经SalⅠ和XbaⅠ双酶切回收后与同样经过双酶切回收的pEGFP-C1真核表达载体连接,构建五指山猪GHR基因真核表达载体。结果测序结果表明:五指山猪GHR基因编码区包括639个氨基酸;经过酶切和测序验证五指山猪GHR基因真核表达载体构建成功。结论经序列比对后发现GHR信号肽编码区发生两处氨基酸替换,可能会影响到生长激素的胞内运输;生长激素受体胞内域编码区发生多处突变,并且导致相应氨基酸发生替换,可能会影响生长激素受体的下游信号转导。五指山猪GHR基因真核表达载体的成功构建为进一步研究GHR的功能和下游信号转导奠定了基础。     

三种小鼠血液生理生化正常值的测定

本文通过对三种小鼠－ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠和昆明远交群小鼠的血液学和血液生化指标进行测定。其结果：⑴血液学指标：ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的嗜中性白细胞、淋巴细胞雌雄间差异显著;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠、昆明小鼠雌雄间差异不显著;昆明小鼠的白细胞比ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠的低;ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的单核细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞记数比Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小     

HBK-SPF鸭生理生化指标的测定

目的测定不同日龄的HBK．SPF(哈尔滨白壳无特定病原体)鸭生理生化指标,并分析比较雌雄之间的差异。 方法采用常规方法测定7日龄和56日龄的雌、雄HBK．SPF鸭的生理生化指标,并对雌雄差异进行了统计学分 析。结果在所测定的生理生化指标中,不同日龄、性别之间表现显著性差异的项目不同,其中7日龄时,嗜中性 粒细胞(NE)、血小板计数(PLT)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血 清钠(Na)血清钾(K)、血清镁(Mg)等参数存在性别差异,达到极显著(P<0．01),单核细胞(MO)和血清磷(P)存 在显著性别差异(P<0．05);56日龄时,白细胞计数(V／8C)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、ALT、ALP、乳酸 脱氢酶(LDH)、BUN、P、Mg等参数存在极显著性别差异(P<0．01),平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量 (MCH)、PLT、血清氯(C1)等差异显著(P<0．05),其它生理生化指标在雌雄之间差异不显著。结论不同日龄的     

10种常见SPF级实验大、小鼠血液学及生化指标正常参考值的探讨

目的建立10种常见SPF级实验大、小鼠血液及生化正常参考值。方法采用半自动生化测定仪及血球计数仪对不同周龄、不同性别的常见10种SPF大鼠的血液学指标及生化指标值进行测定。结果取得4周龄和8周龄不同周龄、不同性别大、小鼠血液学及生化值平均值及正常参考范围;多数生化指标受年龄及性别的影响,除了不同品系、年龄和性别的大、小鼠ALP呈现规律性变化,其他指标也与相关报道有差异。结论在基础生物学研究中,要充分考虑到性别和年龄对实验动物血液学及血清生化指标的影响。     

新西兰兔血气和部分血液生理生化参数的测定

目的建立新西兰兔血气等生理参数,为医学实验研究提供数据。方法在麻醉状态下采取股动脉抗凝血,应用血气分析仪进行血气和部分血液生理生化指标的测定;通过股动脉插管测量血压。结果总二氧化碳(TCO2):19.9 mmol/L～37.1 mmol/L;红细胞压积(HCT):28.1%～42.9%PCV;血红蛋白(Hb):9.6 g/dL～14.6g/dL;pH:7.40～7.52;二氧化碳分压(PCO2):28.3 mmHg～49.1 mmHg;氧分压(PO2):53.4 mmHg～91.0 mmHg;碳酸氢根离子(HCO 3-):19.00 mmol/L～35.8 mmol/L;碱剩余(BE):-6.38 mmol/L～13.3 mmol/L;血氧饱和度(sO2):90.0%～99.0%;iCa:1.59 mmol/L～1.71 mmol/L;Na+:125.3 mmol/L～151.9 mmol/L;K+:1.77 mmol/L～4.55 mmol/L;平均动脉压(MABP):77.5 mmHg～128.5mmHg。结论新西兰兔的血气和部分血液生理生化参数与人和其他实验动物有较大差异。     

矿泉水对ICR小鼠生理、生化的影响

目的研究饮用某矿泉水对lCR小鼠的生理、生化指标和主要脏器组织结构的影响。方法在同一饲养条 件下,给不同组别的小鼠分别饮用矿泉水和城市居民饮用水,比较两组小鼠子代的相关生理生代指标。结果饮 用某矿泉水对ICR小鼠血红蛋白、血小板和红细胞有影响。其脏器系数、血糖和血脂没有影响。结论饮用该矿泉 水使雌性ICR小鼠血小板数量降低;使雄性ICR小鼠血红蛋白、红细胞数量增加,红细胞体积增大。     

生理参数对不同室内环境的敏感性分析

摘要： 观察了室内环境参数（温度、相对湿度、新风量、噪声和照度）改变时心电、血氧饱和度、指尖血流量、皮肤电和呼吸率等生理参数的变化,分析了各生理参数对不同室内环境参数的敏感性.结果表明：对于声环境,可以考虑将心率变异性、指尖血流量和呼吸率结合作为指标;对于热湿环境,可选取心率变异性和血氧饱和度作为指标;对新风量发生变化的环境,可选取呼吸率作为指标;对光环境,可将指尖血流量和皮肤电导结合作为指标.